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肠致病性大肠杆菌PCR检测试剂盒

3380 50T 起订
上海 更新日期:2024-12-23

上海一研生物科技有限公司

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产品详情:

中文名称:
肠致病性大肠杆菌PCR检测试剂盒
品牌:
一研
产地:
国产
保存条件:
-20℃
产品类别:
PCR试剂盒 PCR检测试剂盒
型号:
EY00P436

参数规格:
产品名称:肠致病性大肠杆菌PCR检测试剂盒
型号 :   EY00P436
产品规格:50T
产品运输:低温运输
产品保存:-20保存
产品有效期:一年
运输:低温
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5PCR 反应液的配制;6PCR技术的基本原理;7PCR的反应动力学;8PCR扩增产物;9PCR反应体系与反应条件。
实验操作过程:
一、 CHO DNA 定量参考品的稀释及标准曲线的制备
用试剂盒中提供的 DNA dilution buffer CHO control DNA 进行梯度稀释, 稀释浓度依 次为 300pg/ul 30pg/ul 3pg/ul 300fg/ul 30fg/ul 3fg/ul 。具体操作如下:
1.
将试剂盒中的 CHO control DNA DNA dilution buffer 置于冰上融化,待完全融化后,
轻微振荡混匀,简短快速离心。
2.
6 支干净的 1.5ml 离心管,分别标记为 SD1 SD2 SD3 SD4 SD5, SD6
3
SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer,其余管中分别加入 180ul DNA dilution buffer
4,
2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中,  然后涡旋振荡混匀 5- 10s 后短时快速离心 5s,涡旋振荡和快速离心各重复 3 次。
5,
按表 2 依次进行 6 次梯度稀释操作,稀释操作同步骤 4
                                 
2. CHO control DNA 的稀释

稀释管

释体积

浓度

SD1

2ul CHO control DNA+198ul DNA dilution buffer

300 pg/ul

SD2

20ul SD1+180ul DNA dilution buffer

30 pg/ul

SD3

20ul SD2+180ul DNA dilution buffer

3 pg/ul

SD4

20ul SD3+180ul DNA dilution buffer

300 fg/ul

SD5

20ul SD4+180ul DNA dilution buffer

30 fg/ul

SD6

20ul SD5+180ul DNA dilution buffer

3 fg/ul

二、加样回收质控 ERC 的制备
根据待测样本的残留量设置 ERC CHO  control  DNA 的加样浓度  (以制备加 45pg  CHO control DNA 的样本 ERC 为例),操作如下:
1
,取待测样本 100u,加至 1.5ml 干净的离心管中;
2
,加入 1.5ul SD2,混匀,标记为样本 ERC
注:样本 ERC 和同批待测样本需一起进行样本前处理。
三、阴性质控 NEG 的制备

5.jpg

根据实验设置阴性质控,操作如下:
1
,取 100ul 样本基质溶液(或洗脱液)加至 1.5ml 干净的离心管中标记为阴性质控 NEG 注:阴性质控 NEG 样本和同批待测样本需一起进行样本前处理。
四、 qPCR 反应液的制备和加样
1
,根据所要检测的标准曲线及待测样本数量,计算所需反应孔数,一般做 3 个重复孔/样。
反应孔数=  (6 个浓度梯度+1 个无模板对照 NTC+1 个阴性质控 NEG+待测样本×2) ×3 注:待测样本×2 是为了让每个待测样本检测时都同时做样本 ERC                   2,根据反应孔数计算本次实验所需的各组分的所需总量以制备 pre-mix
2×Taqman master mix=(
反应孔数+2) ×15ul    (含有 2 孔的损失量)
10×CHO qPCR mix=  (
反应孔数+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (
反应孔数+2) ×2ul
3
,各试剂置于冰上融化,振荡混匀,按表 3 所示进行加样:
                                 
3.各反应孔加样示例

标准曲线

20ul pre-mix+   10ul SD1/SD2/SD3/SD4/SD5/SD6

NTC

20ul pre-mix+ 10ul DNA dilution buffer

NEG

20ul pre-mix+ 10ul NEG

测样本

20ul pre-mix+ 10ul  待测样本

ERC 样本

0ul pre-mix+ 10ul ERC 样本

注意事项
1.整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作,各区实验服、仪器、耗材应独立使用,不能混用;实验用吸头采用带滤芯吸头;样本处理区应配有生物安全柜,样本处理在生物安全柜中进行操作;三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2.
为避免RNA降解,样本处理过程应在0-4条件下操作,且完成实验后立即上机检测;样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3.
每次实验应该设置阴、阳性对照。
4.
试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀,并应瞬时离心。
5.
试剂盒内所配阴性和阳性对照在次使用前应全部转移至标本准备区,并单独存放。
6.
为防止荧光干扰,应避免裸手直接接触PCR反应管,并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7.
仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置;不同批号试剂不能混用。
8.ABI
系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正,淬灭基因选择None
9.
实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
 
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盐酸多柔比星/盐酸阿霉素质量规格:>98%,BRDoxorubicin HCl/Adriamycin  大鼠羧甲基赖氨酸(CML)试剂盒 Rat Carboxymethyl lysine,CML ELISA Kit  HumanChlamydiaachomatisCTELISAKit人沙眼衣原体抗体(CT)ELISA试剂盒规格:96T/48T

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4-氨基-5-咪唑甲酰胺质量规格:>98%(滴定)5-Amino-4-imidazolecarboxamide  小鼠Ⅰ型前胶原C末端肽(CCP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装  CLIAKitforPTHrPELISAKit大鼠甲状旁腺激素相关蛋白规格:48T/96T

TNP 470/O-(氯乙酰氨甲酰基)烟曲霉素醇 质量规格:≥97%AGM-1470   Rat plasmin aiplasmin complex (PAP) ELISA Kit 大鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒  石蜡切片中性脂质油红O直接染色试剂盒50

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人解整合素样金属蛋白酶8(ADAM8)试剂盒 Human A Disiegrin And Metalloprotease 8,ADAM8 ELISA Kit  22368-21-4异泽兰黄素说明书  Eupatilin

Ratai-ActivinAreceptoraibody,ACV-RAbELISAKit大鼠活化素A受体抗体(ACV-RAb)ELISA试剂盒规格:96T/48T  18085-97-7棕矢车菊素品牌  Jaceosidin

组蛋白H2A-T1201酸化检测试剂盒10/20  26544-34-3芹菜苷规格  Apioside

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肠致病性大肠杆菌核酸检测试剂盒;肠致病性大肠杆菌PCR试剂盒;肠致病性大肠杆菌PCR扩增试剂盒;肠致病性大肠杆菌PCR荧光探针试剂盒;肠致病性大肠杆菌通用型PCR试剂盒;

公司简介

上海一研生物科技有限公司Shanghai yiyan bio-technology Co. Ltd.主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂等为一体的科研产品销售企业,公司自成立以来,秉承""全心全意服务于科研工作者""的企业理念,立足生物科技领域,运用生物技术和科研试剂,发展现代生物科技,为各类大中小医院及其它医疗机构、高等院校、科研院所、企事业单位提供优质的产品,服务生物科技领域的科学研究人员。 公司具有对普通货物、冷藏及冷冻仓库的存储、包装及运输能力。 公司将始终坚持信誉立业、以人为本、质量保证、诚信服务的宗旨,不断拼搏,开拓进取,与各界朋友携手共创美好未来。

成立日期 (11年)
注册资本 100
员工人数 50-100人
年营业额 ¥ 100万以内
经营模式 工厂,试剂
主营行业 生化试剂,抗体,细胞培养,分子生物学,免疫安全

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