服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称 | 规格 | 型号 |
幼虫芽孢杆菌PCR检测试剂盒 | 50T | EY00P860 |
组成及试剂配制
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
实验外包
1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建
PCR实验步骤:
①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
COS-1(非洲绿猴SV40转化的肾细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0174NRK-52E(大鼠肾小管导管上皮细胞)5×106cells/瓶×2 大鼠嗜碱性粒细胞性白血病细胞;RBL-2H310,12-二十七二炔酸(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)10,12-Heptacosadiynoic
正常大鼠肾细胞(EGF受体阳性);NRK49F2,4-十七二炔酸(>95.0%(T))质量规格:>95.0%(T)2,4-Heptadecadiynoic
CSF1R Others Human CSF1R / MCSF Receptor / CD115 (aa 543-922) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2,4-二十一二炔酸(>95.0%(T))质量规格:>95.0%(T)2,4-Heneicosadiynoic
T-105AIII型胶原酶(含10mL酶解缓冲液)1mL10,12-十七二炔酸(>97.0%(T))质量规格:>97.0%(T)10,12-Heptadecadiynoic
SK-MEL-1, 皮肤色素瘤细胞 白血病细胞,CEM细胞 SW579(甲状腺癌细胞)三亚苯(>96.0%(GC))质量规格:>96.0%(GC)Triphenylene
保护胸甙(DMT-T)质量规格:>98%,BRDMT-dT Rat niic oxide (NO) ELISA Kit 大鼠血清(NO)ELISA试剂盒 石蜡切片组织P35蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20
DMT保护性脱氧尿苷质量规格:>98%,BRDMT-dU HumanCompleme3,C3ELISAKit 人补体蛋白3(C3)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装 ELISAKitDPPⅣ人二肽基肽酶Ⅳ规格:48T/96T
D-木糖(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品D-(+)-Xylose Humandesmin,DesELISA试剂盒人结蛋白(Des)ELISA试剂盒规格:96T/48T 大鼠视黄醇结合蛋白4(RBP-4)ELISA试剂盒 ,英文名: RBP-4 ELISA Kit
D-木糖质量规格:>98.5%,BRD-(+)-Xylose 组织MAPKAPKINASE3激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C)20 人C多肽(CP)ELISA检测试剂盒HumanC-Polypeptide,CPELISAKit 96T/48T
幼虫芽孢杆菌PCR检测试剂盒利福昔明(标准品)质量规格:>98%,标准品Riimin 人T细胞急性母细胞白血病相关抗原(TALLA-1/CD231)ELISA检测试剂盒Huma-cellacelymphoblasticleukemiaaigen,TALLA-1ELISAKit 96T/48T HumanFactor-relatedApoptosisligand,FASLELISA试剂盒人凋亡相关因子配体(FASL)ELISA试剂盒规格:96T/48T
比卡鲁胺(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Bicalutamide 大鼠酪氨酸蛋白激酶JAK3(Jak3)试剂盒 Rat tyrosine-protein kinase JAK3,Jak3 ELISA kit HumanImmuneRNA,IrnaELISAKit人核糖核酸(Irna)ELISA试剂盒规格:96T/48T
白消安质量规格:>98.5%,USP,可用于细胞培养Busulfan/Myleran 英文名称RaesistinElisakit大鼠抵抗素(Resistin)Elisakit规格:96T/48T 猴超敏C反应蛋白(hs-CRP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
白消安(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Busulfan/Myleran 金黄色葡萄球菌(Staphylocusaureus)鉴定16SrDNAPCR扩增检测试剂盒20 人叶酸受体α(FOLR1)试剂盒 Human FOLR1 ELISA Kit
使用方法:
一、样品DNA的制备用自选方法提取细菌样品DNA。注意:DNA纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品DNA,后面的PCR再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备O157:H7标准曲线(以10-10E6这6个10倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的DNA片段作为阳性对照。
1. 标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2和1号。
2. 用带芯枪头分别加入45 μL纯水(*用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用TE缓冲液或纯水10倍梯度稀释到10E7拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至10E7拷贝/μL,建议每次稀释10倍,梯度稀释至10E7拷贝/μL)。
4. 在6号管中加入5 μL 10E7拷贝/μL的O157:H7阳性对照(上步稀释得),充分震荡1分钟,得10E6拷贝/μL的阳性对照。
5. 换枪头,从6号管中取5 μL溶液到5号管中,充分震荡1分钟,得10E5拷贝/μL的阳性对照。6. 换枪头,从5号管中取5 μL溶液到4号管中,重复上面的操作直到得到6个稀释度的阳性对照。
7. NC管中不加任何阳性对照。
8. 从1-6号管中分别取5 μL和待测样品一起进行定量PCR(见下步),每个样品做3次重复。PCR后得到每个阳性对照稀释样品的荧光PCR Ct值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。