双埃柯病毒PCR检测试剂盒

参数规格：
产品名称：双埃柯病毒PCR检测试剂盒
型号　:　　 EY00P868
产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
运输：低温
注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。
实验操作过程：
一、 CHO DNA 定量参考品的稀释及标准曲线的制备
用试剂盒中提供的 DNA dilution buffer 将 CHO control DNA 进行梯度稀释， 稀释浓度依 次为 300pg/ul 、30pg/ul 、3pg/ul 、300fg/ul 、30fg/ul 、3fg/ul 。具体操作如下：
1.将试剂盒中的 CHO control DNA 和 DNA dilution buffer 置于冰上融化，待完全融化后，
轻微振荡混匀，简短快速离心。
2.取 6 支干净的 1.5ml 离心管，分别标记为 SD1 ，SD2 ，SD3 ，SD4 ，SD5, SD6。
3，SD1 管中加入 198ul DNA dilution buffer，其余管中分别加入 180ul DNA dilution buffer。
4,取 2ul  CHO  control  DNA 加入 SD1 管中，  然后涡旋振荡混匀 5- 10s 后短时快速离心 5s，涡旋振荡和快速离心各重复 3 次。
5,按表 2 依次进行 6 次梯度稀释操作，稀释操作同步骤 4。
                                 表 2. CHO control DNA 的稀释

二、加样回收质控 ERC 的制备
根据待测样本的残留量设置 ERC 中 CHO  control  DNA 的加样浓度  (以制备加 45pg  CHO control DNA 的样本 ERC 为例)，操作如下：
1，取待测样本 100u，加至 1.5ml 干净的离心管中；
2，加入 1.5ul SD2，混匀，标记为样本 ERC。
注：样本 ERC 和同批待测样本需一起进行样本前处理。
三、阴性质控 NEG 的制备

根据实验设置阴性质控，操作如下：
1，取 100ul 样本基质溶液(或洗脱液)加至 1.5ml 干净的离心管中标记为阴性质控 NEG。 注：阴性质控 NEG 样本和同批待测样本需一起进行样本前处理。
四、 qPCR 反应液的制备和加样
1，根据所要检测的标准曲线及待测样本数量，计算所需反应孔数，一般做 3 个重复孔/样。
反应孔数=  (6 个浓度梯度+1 个无模板对照 NTC+1 个阴性质控 NEG+待测样本×2) ×3 注：待测样本×2 是为了让每个待测样本检测时都同时做样本 ERC 。                  2，根据反应孔数计算本次实验所需的各组分的所需总量以制备 pre-mix：
2×Taqman master mix=(反应孔数+2) ×15ul    (含有 2 孔的损失量)
10×CHO qPCR mix=  (反应孔数+2) ×3ul
RNase-free H2O=  (反应孔数+2) ×2ul
3，各试剂置于冰上融化，振荡混匀，按表 3 所示进行加样：
                                  表 3.各反应孔加样示例

注意事项
1.整个检测过程应严格按照本说明书要求分别在试剂准备区、样本处理区和PCR扩增区进行操作，各区实验服、仪器、耗材应独立使用，不能混用；实验用吸头采用带滤芯吸头；样本处理区应配有生物安全柜，样本处理在生物安全柜中进行操作；三个区应该配有紫外线杀菌装置。
2.为避免RNA降解，样本处理过程应在0-4℃条件下操作，且完成实验后立即上机检测；样本处理过程中使用的器具耗材应经过无核酶处理。
3.每次实验应该设置阴、阳性对照。
4.试剂盒所有试剂在使用前应该在常温下充分融化混匀，并应瞬时离心。
5.试剂盒内所配阴性和阳性对照在次使用前应全部转移至标本准备区，并单独存放。
6.为防止荧光干扰，应避免裸手直接接触PCR反应管，并应避免在PCR反应管上进行任何标记。
7.仪器扩增相关参数应按照本说明书相关要求进行设置；不同批号试剂不能混用。
8.ABI系列荧光定量PCR仪参数设置中不选ROX校正，淬灭基因选择None。
9.实验过程中产品的废弃物应该进行无害化处理后方可丢弃。
 CM-R095大鼠成年表皮角质形成层细胞完全培养基100mL两性霉素B(标准品)质量规格：含量测定Amphotericin B

NP Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) Nucleocapsid / NP 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 醋酸增血压素质量规格：>98%,BRAngiotensin Acetate

小鼠胚胎成纤维细胞-处理MEF-mt镁试剂II质量规格：ARMagnesonII

非洲绿猴肾细胞;Vero E6 类恶性色素瘤，A375细胞 LS 174T(结肠腺癌细胞)高铁试剂质量规格：AR,98.5%Ferron

EB病毒转化的B细胞;KMY0922酚试剂(3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙盐酸盐)质量规格：AR,>98%3-Methyl-2-benzothialinone

双埃柯病毒PCR检测试剂盒百里香酚,麝香草酚Thymol质量规格：AR  ELISAKitAIL-R1人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1规格：48T/96T  衔接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA试剂盒 ，英文名： APAF1 ELISA Kit

Sulfo NHS;N-羟基硫代琥珀sulfo-NHS质量规格：>99%,BR  小鼠球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒 ，英文名： IgM ELISA Kit  MouseIerleukin15,IL-15ELISA试剂盒小鼠白介素15(IL-15)ELISA试剂盒规格：96T/48T

亚甲兰,亚甲基蓝Methylene Blue质量规格：BS  大鼠游离三甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA检测试剂盒RatFreei-iodothyronineIndes,Free-T3ELISAKit 96T/48T  ELISAKitbFGF兔子碱性成纤维细胞生长因子规格：48T/96T

盐酸沃尼妙林Valnemulin HCl质量规格：>97%,BR  人多巴胺(DA)试剂盒 human dopamine,DA ELISA KIT  ChickenLipopolysaccharides,LPSELISAKit鸡脂多糖/内(LPS)ELISA试剂盒规格：96T/48T

类叶升麻苷,毛蕊花糖苷（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Acteoside  ELISAKitFLU人流感病毒抗体IgG规格：48T/96T  大鼠8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)试剂盒 Rat 8-Hydroxy-desoxyguanosine,8-OHdG ELISA Kit

利卡灵-B(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品(-)-Licarin B  小鼠DNA甲基转移酶1(DNMT1)ELISA试剂盒 ，英文名： DNMT1 ELISA Kit  CLIAKitforsCD30(Mousesolubleclusterofdiffereiation30)ElisaKit小鼠可溶性CD30规格：48T/96T

利血平(标准品)质量规格：HPLC≥98%，标准品Reserpine  人葡萄糖激酶(GCK)ELISA检测试剂盒Humanglucokinase,GCKELISAKit 96T/48T  石蜡切片核酸氧化8-羟基鸟苷(8-OHG)荧光染色测定试剂盒10

酪氨酰氨质量规格：>98%,sigma进分L-Tyrosine amide  大鼠高密度脂蛋白胆(HDL-C)试剂盒 Rat High density lipoprotein cholesterol,HDL-C ELISA kit  ELISAKitMSTN人肌抑素规格：48T/96T