RKO-AS45-1（人结肠癌转基因细胞）

1.细胞起源：

细胞简称 RKO-AS45-1

细胞别称 RKO-AS-45-1; RKOAS451; RKO_AS45

细胞背景描述 人的cDNA中编码GADD45的开放阅读框克隆到表达载体pCMV.3中，转染结肠癌细胞RKO，建立了RKO-AS45-1细胞株。RKO-AS45-1细胞含有稳定整合巨细胞病毒(CMV)启动子的表达载体，RKO-AS45-1细胞系和它的母系RKO一起可用于GADD45对DNA修复、凋亡和药物敏感性研究。

组织来源 结肠癌，整合起动GADD45a表达载体的CMV启动子

细胞形态 上皮细胞样

细胞类型 肿瘤细胞

肿瘤类型 肠癌细胞

生长特性 贴壁细胞

生物安全等级 2 [Cells Contain CMV viral sequences]

2.培养及保藏：

完全培养基 MEM（含NEAA）(PM150410)＋10% FBS(164210-50)＋1% P/S(PB180120)

培养环境 空气，95%；CO ₂，5%

37℃

冻存条件 55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO

液氮

3.传代方法：

传代步骤

1、吸出原培养液；

2、加入2ml左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃；

3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞；

4、放入培养箱消化，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止，全程不要拍打培养瓶；

5、加入3ml含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液；

6、收集细胞悬液离心，1200rpm/min 3分钟，离心完吸出上清丢弃；

7、加入新鲜培养基，吹打几下混匀细胞即可，按比例接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。

消化时间 2~3分钟

传代比例（密度） 1:3-1:4

换液频次 2~3次/周

本产品仅供科研使用。不能用于人和动物治疗等其它临床诊断使用！以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。