C1498小鼠白血病细胞

小鼠白血病细胞 C1498

产品基本信息

细胞名称：小鼠白血病细胞 C1498

种属来源：小鼠

疾病特征: 白血病

组织来源：外周血

细胞形态：淋巴母细胞样

生长特性：悬浮生长

培养基:： RPMI-1640+10% FBS+PS

生长条件：气相：95%空气+5%二氧化碳；温度：37℃

传代方法：1:2 至 1:4，每周 2-3 次

冻存条件：无血清冻存液，液氮储存

支原体检测：无

细胞培养操作

1）复苏细胞：将含有 1 mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 4 mL 培养基混 合均匀。在 1000 rpm 条件下离心 3 min，弃去上清液，加 1-2 mL 培养基后轻轻吹匀。然后将 所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入 10 cm 皿中，加入约 8 mL 培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。 方法一：收集细胞，1000RPM 条件下离心 3-5min 分钟，弃去上清液，补加 1-2ml 培养液后吹 匀，将细胞悬液按 1:2 到 1:4 的比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按 1:2 到 1:3 的比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。 3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例； a、收集细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm 条件下离心 4 min，弃去上清液， 用 PBS 清洗一遍，弃尽 PBS，然后进行细胞计数。 b、根据细胞数量对应加入无血清细胞冻存液，使细胞密度 5×106~1×107/mL，轻轻混匀，每 支冻存管冻存 1mL 细胞悬液，注意冻存管做好标识。 c、将冻存管放入-80℃冰箱，24 h 后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取

培养注意事项

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发，细胞是否解冻，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。.观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置2-4h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的完全培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 说备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9. 注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。