BHK-21 [C-13]（仓鼠肾成纤维细胞）

1.细胞起源：

细胞简称 BHK-21 [C-13]

细胞别称 BHK 21; BHK21; Baby Hamster Kidney-21; Baby Hamster Kidney 21; Baby

Hamster Kidney from litter No. 21; BHK

细胞背景描述 BHK-21 [C-13]的亲本细胞株是由I·A·Macpherson和M·G·P·Stoker于1961年3月从1日龄的仓鼠建立的。随后84天连续培养，仅中断8天进行冻存，通过单细胞分离建立了13号克隆，即BHK-21 [C-13]。BHK-21 [C-13]细胞可用作转染宿主，用于表达包含选择及扩增标记的DNA的载体。

供体年龄 1日龄

组织来源 正常肾

细胞形态 成纤维细胞样

细胞类型 自发永生化细胞

生长特性 贴壁细胞

生物安全等级 1

2.培养及保藏：

完全培养基 RPMI-1640(PM150110)＋10% FBS(164210-50)＋1% P/S(PB180120)

培养环境 空气，95%；CO ₂，5% 37℃

冻存条件 55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 液氮

3.传代方法：

传代步骤 

1、吸出原培养液；

2、加入2ml左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃；

3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞；

4、放入培养箱消化，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止，全程不要拍打培养瓶；

5、加入3ml含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液；

6、收集细胞悬液离心，1200rpm/min 3分钟，离心完吸出上清丢弃；

7、加入新鲜培养基，吹打几下混匀细胞即可，按比例接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。

消化时间 1~2分钟

传代比例（密度） 1:3-1:4

换液频次 2~3次/周

倍增时间 ~12 hours