BEL-7402（人肝癌细胞）

1.细胞起源：

细胞简称 BEL-7402

细胞别称 Bel-7402; BEL 7402; Bel 7402; BEL7402; Bel7402

细胞背景描述 BEL-7402细胞是于1974年从临床肝癌手术标本中建立的；BEL-7402细胞群体倍增时间为20小时，移植到处理过的Wistar大鼠中的能形成肿瘤结节，BEL-7402细胞形态呈上皮样细胞。在电子显微镜下，BEL-7402细胞亦显示上皮细胞所具有的桥粒和张力原纤维，与临床肝癌细胞相似。BEL-7402细胞分瓶培养第四天时，其有丝分裂指数约为7%。BEL-7402细胞的染色体数为不足三倍体，有一个异常的近端着丝点染色体。间接免疫荧光法测BEL-7402细胞内的AFP为阳性反应；LDH同工酶谱显示，BEL-7402细胞与成年人肝细胞不同，而与人胚肝及临床肝癌相近。(STR检测位点同HELA)

供体年龄 男

组织来源 肝癌

细胞形态 上皮细胞样

细胞类型 肿瘤细胞

肿瘤类型 肝胆癌细胞

生长特性 贴壁细胞

生物安全等级 1

2.培养及保藏：

完全培养基 RPMI-1640(PM150110)＋10% FBS(164210-50)＋1% P/S(PB180120)

培养环境 空气，95%；CO ₂，5% 37℃

冻存条件 55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 液氮

3.传代方法：

传代步骤 

1、吸出原培养液；

2、加入2ml左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢弃；

3、加入1ml左右0.25%胰蛋白酶溶液（含EDTA），轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞；

4、放入培养箱消化，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止，全程不要拍打培养瓶；

5、加入3ml含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液；

6、收集细胞悬液离心，1200rpm/min 3分钟，离心完吸出上清丢弃；

7、加入新鲜培养基，吹打几下混匀细胞即可，按比例接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。

传代比例（密度） 1:2-1:4

换液频次 2~3次/周

倍增时间 ~32-48 hours