单细胞到cDNA一步法试剂盒

一、 试剂盒简介

本试剂盒是简单快速从单细胞到cDNA的一步法试剂盒，无需复杂的RNA提取步骤，就可以从1-1000个细胞中获得cDNA。因为细胞数少，RNA比较少，所以本试剂盒是将逆转录和预扩增同时进行。只需预先设计预扩增引物，就可以获得高质量的cDNA。

二、 产品组分

三、 保存条件

此试剂盒建议置于-20℃冰箱中保存。

四、试剂盒特点

1、简单、快速：仅需2步即可得到高质量的cDNA。

2、所需样品少：最低可提取单个细胞。

3、安全无毒：不使用苯酚、氯仿、异丙醇、DEPC水等对身体有害的物质。

四、 预扩增引物设计

1、 建议qPCR引物和预扩增引物在设计时靠近mRNA的3^，端，以便确保被充分扩增。

2、 预扩增引物和qPCR引物进行跨内含子设计：即其扩增产物跨1个内含子。

3、 需要将qPCR扩增产物所在的序列包含在内（即预扩增引物需要在qPCR引物的外侧，上游更偏5^，端，下游更偏3^，端）。

五、 注意事项

1、本试剂盒是专为qPCR设计的，尽量不要用于基因克隆。

2、细胞从培养箱中取出后建议放在室温，切勿放在冰上，以免影响细胞状态。

3、Cell Lysis Buffer解冻后，需颠倒几次使之充分混匀，再放在冰上以备使用，请勿涡旋振荡。

4、如果qPCR结果内参Ct值明显偏大，则预扩增循环数可以由14个Cycle增加3个Cycle到17个Cycle。