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糖化酶(Glucoamylase)试剂盒

1500 1盒 起订
上海 更新日期:2025-01-21

上海雅吉生物科技有限公司

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产品详情:

中文名称:
糖化酶(Glucoamylase)试剂盒
保存条件:
2-8℃
产品类别:
试剂盒 生化试剂盒

糖化酶(Glucoamylase)试剂盒说明书

分光光度法50/24

 

    正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

糖化酶(Glucoamylase)试剂盒测定意义

糖化酶,即葡萄糖淀粉酶(EC3.2.1.3),又称γ-淀粉酶,是一种外切型糖苷酶,它从淀粉的非还原性末端水解α-1,4糖苷键和α-1,6糖苷键,将淀粉完全水解为葡萄糖,因此广泛的应用于酒精、白酒、抗生素、氨基酸、有机酸,甘油,淀粉糖等工业中,是我国重要的工业酶制剂之一


测定原理

糖化酶水解可溶性淀粉生成葡萄糖,与3,5-二硝基水杨酸生成红棕色化合物,在540nm处有光吸收,在一定范围内反应液颜色深浅与葡萄糖的量成正比,可测定计算得糖化酶的活力。


自备实验用品及仪器

天平、低温离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。


试剂组成和配制

提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存。

试剂一:液体25mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体25mL×1瓶,4℃避光保存。


糖化酶(Glucoamylase)试剂盒酶液提取

1. 组织:按照质量(g):提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于4℃,10000g离心10min,取上清置于冰上待测。

2. 细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~10001的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min然后4℃,10000g离心10min取上清置于冰上待测。

3. 培养液或其它液体:直接检测。


测定操作

 


对照管

测定管

样本(μL


50

灭活样本(μL

50


试剂一(μL

500

500

充分混匀,40℃反应20min

试剂二(μL

450

450

混匀,沸水浴5min,自来水冷却后,于1mL玻璃比色皿,蒸馏水调零,测定540nm处吸光值A,△A=A测定管-A对照管

 

 

 

 

 

酶活性计算公式

标准曲线:y = 0.2164x - 0.0182R2 = 0.9992 

1. 按照蛋白含量计算

酶活性定义:40℃,pH4.6条件下,每毫克蛋白每分钟分解可溶性淀粉产生1mg葡萄糖所需的酶量为一个酶活单位。

糖化酶活性(U/mg prot=(△A+0.0182÷ 0.2164×V反总÷V×Cpr÷T

                        = 2.54×(△A+0.0182÷ Cpr

2. 按照样本质量计算

酶活性定义:40℃,pH4.6条件下,每克组织每分钟分解可溶性淀粉产生1mg葡萄糖所需的酶量为一个酶活单位。

糖化酶活性(U/g 鲜重)=(△A+0.0182÷ 0.2164×V反总÷W×V÷V样总)÷T

= 2.54×(△A+0.0182÷ W

3.按照液体体积计算

酶活性定义:40℃,pH4.6条件下,每毫升培养液每分钟分解可溶性淀粉产生1mg葡萄糖所需的酶量为一个酶活单位。

糖化酶活性(U/mL=(△A+0.0182÷ 0.2164×V反总÷V÷T

                  = 2.54×(△A+0.0182

4. 按照细胞数量计算

酶活性定义:40℃,pH4.6条件下,每104个细胞每分钟分解可溶性淀粉产生1mg葡萄糖所需的酶量为一个酶活单位。

糖化酶活性(U/104cell=(△A+0.0182÷ 0.2164×V反总÷V×细胞数量(万个)÷V样总)÷T

                      = 2.54×(△A+0.0182÷ 细胞数量(万个)

V反总:反应总体积,0.55mLV样:反应体系中加入样本体积,0.05mLV样总:加入提取液体积,1mLCpr:样本蛋白浓度,mg/mLW:样本质量,gT:反应时间,30min

 

注意事项

1. 灭活样本的制备建议将样本放在沸水浴中煮沸10min,以将酶彻底灭活。

2. 测定之前进行预实验,若吸光值较高,请将样品用提取液进行适当的稀释再测定,并在计算公式中乘以稀释倍数。

 


糖化酶(Glucoamylase)试剂盒;糖化酶(Glucoamylase)试剂盒;

公司简介

上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月,是一家面向生命科学领域,提供科研类试剂、耗材、仪器、技术服务的生物企业。包括分子生物学、免疫学、微生物学、细胞学等 。旗下拥有 “雅吉生物”、“晶风生物”、“彩佑实业”、“GTX” 品牌。通过公司各部门员工的共同努力在行业内拥有较高知名度,深得新老客户厚爱,本着“优质、服务、信誉”的精神,坚持以优良的技术、优质的产品、良好的信誉为国内外广大用户提供优质生物产品和服务。 公司在重视产品质量的同时,也建立了一套集技术支持,物流售后服务等多部门联动服务体系,努力把我们方便、快捷、周到的服务提供给每一个客户,雅吉生物的试剂盒,在国内众多重点实验室广泛使用,深受广大科研人员好评,先后在权威杂志文章中被引用。 本公司郑重承诺:质量保证、供货及时、服务周到。

成立日期 (14年)
注册资本 50.000000万人民币
员工人数 50-100人
年营业额 ¥ 100万以内
经营模式 试剂,定制,试剂,定制
主营行业 抗体,抗体

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