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亮氨酸氨基肽酶(Leucine Aminopeptidase, LAP)试剂盒

Leucine Aminopeptidase
1500 1盒 起订
上海 更新日期:2024-12-24

上海雅吉生物科技有限公司

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产品详情:

中文名称:
亮氨酸氨基肽酶(Leucine Aminopeptidase, LAP)试剂盒
英文名称:
Leucine Aminopeptidase
保存条件:
2-8℃
产品类别:
试剂盒 生化试剂盒

亮氨酸氨基肽酶(Leucine Aminopeptidase, LAP)试剂盒说明书

           分光光度法 50/48

 

     正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:                           

LAP是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶,广泛存在于肝、肾、胰等组织中,尤其以肝脏中含量最为丰富。各类肝病患者因肝细胞损伤,血清LAP的活性均有不同程度的升高,因此,血清LAP活性的检测能从不同侧面反映各种肝病的发生和发展。

 

亮氨酸氨基肽酶(Leucine Aminopeptidase, LAP)试剂盒测定原理:

LAP分解L-亮氨酰对硝基苯胺生成对硝基苯胺,后者在405nm有吸收峰,通过测定吸光值升高速率来计算LAP活性。

 

自备用品:

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

提取液:液体50mL×1瓶,4保存; 

试剂一:液体40mL×1瓶,4保存;

试剂二:粉剂×1瓶,-20保存;

 

样本的前处理:

1、细菌、细胞或组织样品的制备:

细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为1000~50001的比例(建议2000万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4离心10min,取上清,置冰上待测。

组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4离心10min,取上清,置冰上待测。

2、血清(浆)样品:直接检测。

 

亮氨酸氨基肽酶(Leucine Aminopeptidase, LAP)试剂盒LAP测定步骤

1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至405nm,蒸馏水调零。

2、 将试剂二转移至试剂一中充分溶解(如较难溶解,可50℃水浴加热约30min促进溶解);在37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴10min以上;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

3、 在微量石英比色皿或96孔板中加入250μL样本和750μL试剂一,混匀后立即记录405nm处初始吸光值A1 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A2-A1

 

注意事项:若ΔA大于0.5,需将酶液用提取液稀释,计算公式中乘以相应稀释倍数。使A2-A1小于0.5,可提高检测灵敏度。

 

 

亮氨酸氨基肽酶(Leucine Aminopeptidase, LAP)试剂盒LAP活力单位的计算:

1、血清(浆)LAP活力的计算:

单位的定义:每mL血清(浆)每分钟生成1 nmol的对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAPnmol/min/mL)=[ΔA×V反总÷ε×d×109]÷V÷T=205.8×ΔA

 

2、组织、细菌或细胞中LAP活力的计算:

1按样本蛋白浓度计算:

单位的定义:每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAPnmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷ε×d×109]÷(V×Cpr) ÷T=205.8×ΔA÷Cpr

2按样本鲜重计算:

单位的定义:每g组织每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAPnmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷ε×d×109]÷(W× V÷V样总) ÷T=205.8×ΔA÷W

3按细菌或细胞密度计算:

单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟生成1 nmol 对硝基苯胺定义为一个酶活力单位。

LAPnmol/min /104 cell)=[ΔA×V反总÷ε×d×109]÷(2000×V÷V样总) ÷T=0.103×ΔA

V反总:反应体系总体积,1×10-3 Lε:对硝基苯胺摩尔消光系数,9.72×103 L / mol /cmd:比色皿光径,1cmV样:加入样本体积,0.25 mLV样总:加入提取液体积,1 mLT:反应时间,2 minCpr:样本蛋白质浓度,mg/mLW:样本质量,g2000:细菌或细胞总数,2000万。

 


亮氨酸氨基肽酶(Leucine Amin;亮氨酸氨基肽酶(Leucine Amin;

公司简介

上海雅吉生物科技有限公司成立于2011年3月,是一家面向生命科学领域,提供科研类试剂、耗材、仪器、技术服务的生物企业。包括分子生物学、免疫学、微生物学、细胞学等 。旗下拥有 “雅吉生物”、“晶风生物”、“彩佑实业”、“GTX” 品牌。通过公司各部门员工的共同努力在行业内拥有较高知名度,深得新老客户厚爱,本着“优质、服务、信誉”的精神,坚持以优良的技术、优质的产品、良好的信誉为国内外广大用户提供优质生物产品和服务。 公司在重视产品质量的同时,也建立了一套集技术支持,物流售后服务等多部门联动服务体系,努力把我们方便、快捷、周到的服务提供给每一个客户,雅吉生物的试剂盒,在国内众多重点实验室广泛使用,深受广大科研人员好评,先后在权威杂志文章中被引用。 本公司郑重承诺:质量保证、供货及时、服务周到。

成立日期 (14年)
注册资本 50.000000万人民币
员工人数 50-100人
年营业额 ¥ 100万以内
经营模式 试剂,定制,试剂,定制
主营行业 抗体,抗体

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