细胞计数试剂盒

细胞计数试剂盒

一、产品简介。

Cell Counting Kit-8，简称 CCK-8，主要成份是四唑盐 WST-8，可以被线粒体内的脱氢酶还原生成水溶性的 formazan，其颜色深浅程度与细胞数量呈正比。因此，CCK-8 试剂常用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等实验。

二、运输与存储条件。

本产品低温运输，-20 ℃保存，有效期 12 个月，使用时存放在 4 ℃，1 个月内用完。

三、特点与优势。

1. 本试剂为即用型试剂，直接加入细胞培养液中即可使用。

2. 本试剂经脱氢酶作用产生水溶性的 formazan，使培养液变成橙黄色，可以直接测定其 OD 值。

3. CCK-8 细胞毒性低，加入细胞培养液后可在不同时间点连续测定培养液的 OD 值。

四、使用说明。

1. 细胞培养。胰酶消化法收集细胞，计数后接种于 96 孔板，培养液体积为 100 μL/孔。

2. CCK-8 孵育。在细胞培养液中加入 CCK-8 试剂，10 μL/孔，轻轻震荡，混匀，继续培养。

3. 吸光度值检测。CCK-8 加入后不同时间点（1h，2h，4h），利用酶标仪检测 450 nm 处吸光度值（OD 值）。

4. 细胞存活率计算：

细胞存活率 (%)=[A(加药)-A(空白)]/A(对照)-A(空白)]×100

A(加药)：药物处理细胞的吸光度值

A(空白)：利用培养液作为空白对照孔的吸光度值。

A(对照)：正常生长细胞的吸光度值

五、注意事项。

1. 如果吸光度值偏低则适当延长 CCK-8 孵育时间。

2. 测定吸光度值前应确保孔内没有气泡，否则吸光度值会异常。

3. 若无 450 nm 滤光片，可以使用 420-480 nm 的滤光片。