质粒DNA转染试剂

质粒DNA转染试剂 Omifection

一、产品简介。

Omifection 是一款非脂质体类真核细胞 DNA 转染试剂，主要用于质粒 DNA 转染，在多种细胞中都具有较高的转染效率和超低的细胞毒性，广泛用于蛋白表达、文库筛选和慢病毒包装等实验。

二、运输与存储。

本产品常温运输，4 ℃保存，严禁冻存。

三、特点与优势。

1. 转染效率高。适用于多种类型细胞的转染实验。

2. 细胞毒性低。Omifection 对多种细胞没有细胞毒性。

3. 操作方便。本产品不受抗生素和血清的影响，转染前细胞不用换液。

四、使用说明。

1. 以 6 孔细胞培养板培养的贴壁细胞作为实验体系，细胞转染实验步骤如下：。

2. 细胞培养。胰酶消化法收集细胞，接种到 6 孔板中，24 h 后细胞密度达到 50%-80%。

3. 转染复合体制备。移取 200 μL OPTI-MEM 培养液 (Gibco）加入灭菌的 EP 管（1.5 mL)中，再依次加入 2 μg 质粒（体积依据质粒浓度计算）和 6 μL Omifection 转染试剂，混合 10-20 次，室温静置 15-30 min （30 min 转染效果会更好），形成转染复合体。

4. 细胞转染。将转染复合体加入细胞培养液中，轻摇混匀，转入 CO2培养箱中继续培养。

5. 转染 6-12 h 后换液，48 h 检测外源蛋白表达情况（如荧光显微镜下检测 GFP 荧光）。

五、注意事项。

1. 本产品严禁冻存，否则转染效率降低。

2. 质粒 DNA 与 Omifection 的比例（μg:μL）为 1:3 时能够在大部分细胞中取得转染效果。

3. Omifection 与质粒 DNA 加入 OPTI-MEM 培养液中后，剧烈混合，以便彻底混匀，并需要静置15-30 min，以便形成转染复合体。

4. 转染实验一般在细胞传代 24 h 后进行，保证细胞进入对数生长期，生长状态良好。

5. Omifection 对大部分细胞没有毒性，如果不考虑转染试剂对实验的影响，转染后可以不换液。

六、转染效果检测。

HEK293 细胞接种于 6 孔板，24 h 后利用 Omifection 和 Lipofectamine 2000（LIPO 2000）转染绿色荧光蛋白（GFP）编码质粒，48 h 后荧光显微镜下检测 GFP，并拍照。