"Ect1/E6E7:人宫颈永生化鳞状复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
有一些细胞是数量多一点比较HAO生长,生长状态也比较HAO。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较HAO,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较HAO。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不HAO的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不HAO,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞建议只吹打,不消化)其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得HAO的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HEC1A细胞类似产品::NCIH2029细胞、GES1细胞、Bac12F5细胞
MARC145细胞类似产品::FRH-0201细胞、IPLB-SF-21-AE细胞、HCC2157细胞
JB6 clone 30, subclone 7b细胞类似产品::JB6 Cl 30细胞、RS4;11细胞、RC92A细胞
Hs27细胞类似产品::K299细胞、OS-732细胞、HCC-44细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:宫颈;女性;HPV-16转化
Ect1/E6E7:人宫颈永生化鳞状复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
PAEC细胞类似产品::HCT-8/V细胞、293/EBNA-1细胞、2B4-L细胞
P31/Fujioka细胞类似产品::B958细胞、SK BR 03细胞、D562细胞
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公司主营ATCC、DSMZ、RIKEN、ScienCell、INCELL、Promocell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学来源细胞系及原代细胞,全程提供细胞系背景、生长性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件、传代方法等复苏及冻存说明书信息,我们拥有丰富的细胞系培养经验,能提供细胞培养全方位的技术支持,让您实验再无烦扰!公司由在国外工作和学习多年的留学人员创办,由国内中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所,复旦大学,同济大学等多名工作在线的细胞培养专家,提供细胞培养技术支持。公司依靠自身一些的技术和理念,以世界YiLiu的技术支撑阵容,提供一系列细胞相关的技术服务。为中国的生命科学事业赶超欧美,提供了重要的基石;公司将依靠自主研究开发的GAO技术GAO质量和有绝对的价格竞争力的产品,立足国内,面向世界。力争打破国外大公司在细胞培养科学领域接近垄断的地位,为中国在生命科学的这一领域一席之地。公司筹划未来三年内,在沈阳、济南、北京、西安、宁夏、武汉、等国内代表城市建立细胞培养分实验室,以便更HAO的服务国内广大医院、大学、制药企业等,你们的每一份关心和支持,都是我们前进的动力!
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
Ect1/E6E7:人宫颈永生化鳞状复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁
传代24h-48h处于对数期的细胞,在冻存前24h换液;按照常规方法消化,离心,收集细胞沉淀;用血清重悬细胞沉淀,用血球计数板或者细胞计数仪进行细胞计数;配制细胞冻存液,将冻存液加到细胞液中,吹打混匀,控制细胞密度为2×10(6)-5×10(6)/ml;将细胞悬液按照1ml/支分装至已标记HAO的冻存管中,旋紧管盖;将冻存管放入程序冻存盒中,冻存盒立即移至-80°C冰箱中,过夜后将冻存细胞移至液氮中长期保存。冻存管内细胞数目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial,融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml/vial为宜。细胞冻存和复苏遵循“慢冻快溶”的原则。取出冷冻管后,须立即放入37°C水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化,并注意水面不可超过冷冻管盖沿,否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管之爆裂。细胞冻存时细胞状态不佳,会严重影响复苏时细胞的活率。一般选择处于对数生长期的细胞进行冻存,冻存前一天细胞ZuiHAO进行换液;消化过度也会严重影响细胞冻存后复苏的活率;冻存细胞时为按照温度梯度进行操作,会严重影响细胞活率。
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