"MuM-2C:人眼脉络黑色素瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气的,大家争取做到因材施教,比如试试下面的“四步消化法”。(以难消化细胞为例),具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍(目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉)。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况把握)。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
Jurkat 77细胞类似产品::QBI-293A细胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b细胞、Kupffer细胞
Panc4.03细胞类似产品::RMG-1细胞、EB2细胞、Melanoma 14细胞
NCI-446细胞类似产品::RM1细胞、H1522细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1细胞
OCI-LY-8细胞类似产品::SKO007细胞、NCI-H2591细胞、HOP-62细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:脉络膜;黑色素瘤
MuM-2C:人眼脉络黑色素瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
NE-4C细胞类似产品::PK-136细胞、rRMECs细胞、NuTu-19细胞
tdott细胞类似产品::PANC0813细胞、PC-3M-2B4细胞、U-2932细胞
Human podocyte细胞类似产品::L(TK-)细胞、ECC12细胞、Daoy细胞
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升GAO到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
MuM-2C:人眼脉络黑色素瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
HTori3细胞类似产品::GM637A细胞、MDA330细胞、P30/Ohkubo细胞
CEF细胞类似产品::Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞、343 MG细胞、MALME 3M细胞
HCC-1171细胞类似产品::MCF-10A细胞、LNCaP.FGC细胞、FDC-P1细胞
HEMCSS细胞类似产品::STTG1细胞、SKCO 1细胞、RL95细胞
RH-30细胞类似产品::IAR-20细胞、SK-N-BE2C细胞、CMT 93细胞
HEY-A8细胞类似产品::H1395细胞、SNU520细胞、CHO cell clone K1细胞
Hs863T细胞类似产品::NCIH1836细胞、LC-1细胞、RDES-1细胞
Calu-3细胞类似产品::H-378细胞、OP-9细胞、Hs 611.T细胞
Walker256-TC细胞类似产品::WM239细胞、SW-954细胞、HN4细胞
H-2347细胞类似产品::Anglne细胞、WM-239细胞、TCC Sup细胞
RS411细胞类似产品::NT2-D1细胞、LAN-5细胞、HEK293-FT细胞
T98细胞类似产品::SUPB-15细胞、CF PAC-1细胞、MV-4-11细胞
MCF 10A细胞类似产品::OCI-Ly01细胞、HBdSMC细胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞类似产品::MDCKII细胞、NCI-HUT-596细胞、SK-ES细胞
F442A细胞类似产品::TO 175.T细胞、H23细胞、SN12-PM6细胞
SUP-T1细胞类似产品::N-2a细胞、A-431细胞、SN12C细胞
SUP-T1细胞类似产品::N-2a细胞、A-431细胞、SN12C细胞
L5178Y细胞类似产品::Transformed Human Liver Epithelial-3细胞、J774.A1细胞、PL-5细胞
KBM-7细胞类似产品::KY-50细胞、GS-9L细胞、SK-N-MC细胞
OSC-19细胞类似产品::BE2_C细胞、MDA 1386细胞、CL 1-0细胞
Tb 1 Lu (NBL-12)细胞类似产品::VMM-5A细胞、SU-DHL-2细胞、RASMCs细胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5细胞类似产品::H-676B细胞、Centre Antoine Lacassagne-148细胞、RIN-m 14B细胞
GalK1细胞类似产品::CaEs17细胞、T/G HA VSMC细胞、MB-49细胞
NCI-H2087细胞类似产品::SW962细胞、2B4细胞、KYSE30细胞
MuM-2C:人眼脉络黑色素瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
H-2291细胞类似产品::SuDHL 4细胞、BCaP-37细胞、HeLa/DDP细胞
IGROV 1细胞类似产品::HDF-a细胞、NCI-Hut 125细胞、OLN-93细胞
OC316细胞类似产品::COLO320HSR细胞、WEHI-279细胞、Human Embryo Kidney-2细胞
HET-1A细胞类似产品::GM3190细胞、Caco2-BBE细胞、LX-2细胞
OVCA-433细胞类似产品::HOS细胞、NCC-IT细胞、Bowes melanoma cells细胞
BNL CL.2细胞类似产品::TF1细胞、JURKAT E-6.1细胞、Colo-206F细胞
MGH-U3细胞类似产品::RC-K8细胞、AR4-2J细胞、PANC1005细胞
HKBML细胞类似产品::HL-1细胞、8226细胞、SW 962细胞
ARO 81-1细胞类似产品::FHCRC-11细胞、MV-3细胞、CNE-2Z细胞
N87细胞类似产品::HDSMC细胞、Th17细胞、L-M(TK-)细胞
CORL88细胞类似产品::H-1819细胞、Vx2细胞、MESSA/Dx5细胞
RetroPack PT67细胞类似产品::MAD109细胞、CAL78细胞、T84细胞
HT55细胞类似产品::SUM 159PT细胞、UM-UC-14细胞、ML-2细胞
WML2细胞类似产品::UMR-106细胞、BCP1细胞、K7M2细胞
PC-12细胞类似产品::SW-13细胞、P3X63NS1细胞、KM933细胞
H9c2 (2-1)细胞类似产品::HT clone H9细胞、SKRC-52细胞、LIPF155C细胞
T-47D细胞类似产品::149 PT细胞、HT115细胞、BCaP-37细胞
H-1395细胞类似产品::A549-Taxol细胞、NCI-322细胞、UO-31细胞
SVG p12细胞类似产品::NCI-H1688细胞、HEP3B2细胞、CAL78细胞
NCIH740细胞类似产品::95C细胞、NCI-H3255细胞、CCC-HHM-2细胞
MEC1细胞类似产品::J 111细胞、Rat Chondrosarcoma Swarm细胞、SK Col 1细胞
HTR8细胞类似产品::JHH2细胞、Farage OL细胞、HDQP1细胞
FRTL 5细胞类似产品::RAW264细胞、OCI/AML-5细胞、NS1-Ag 4/1细胞
CHP212细胞类似产品::CTV1细胞、T-98细胞、Farage Original Line细胞
MBdSMC细胞类似产品::NCIH810细胞、MC3T3-E细胞、HCT.116细胞
PE/CA-PJ34 (clone C12)细胞类似产品::MOLT 4细胞、Swiss-3T3细胞、H-2087细胞
BetaTC6细胞类似产品::NIH-OVCAR-3细胞、Hs895.T细胞、A-172细胞
SCC154细胞类似产品::Plaepi 34细胞、VM-CUB1细胞、BHT101细胞
ETCC-007细胞类似产品::HEL-92-1-7细胞、UT-7细胞、HCC1187细胞
NCIH1573细胞类似产品::CT26细胞、KYSE50细胞、MOVAS细胞
Chang Cells细胞类似产品::Z138细胞、G-361细胞、KYSE450细胞
CG4细胞类似产品::PaTu 8988s细胞、PLC/PRF/5细胞、HCC1954-BL细胞
MB231细胞类似产品::MKN 45细胞、KNS-81细胞、NRK 49F细胞
NCI-H441-4细胞类似产品::H1975细胞、BNL.1ME A.7R.1细胞、Human Corneal Endothelial Cells-12细胞
G-292 clone A141B1细胞类似产品::EB2细胞、NCIH244细胞、LLC1细胞
PE/CA-PJ-34细胞类似产品::SK-OV-433细胞、QG-56细胞、HCC-44细胞
SL-1细胞类似产品::C22 (Clara)细胞、Mouse INsulinoma 6细胞、CHP 100细胞
HCC-1143细胞类似产品::University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3细胞、RPMI #1846细胞、CoC1细胞
GS-9L细胞类似产品::BC-028细胞、Neukoplast细胞、OAW42细胞
HDSMC细胞类似产品::LTEPsm细胞、MHH-CALL-2细胞、Kit 225-K6细胞
HcaF细胞类似产品::H8细胞、YD-15细胞、RT-112细胞
JVM-3细胞类似产品::KYSE180细胞、HEL92.1.7细胞、Tca8113细胞
MDA330细胞类似产品::Pt K2细胞、PG [Human lung carcinoma]细胞、ROS-17/2.8细胞
SKRC-20细胞类似产品::NCI-H2342细胞、JOSK-M细胞、SUM 52细胞
GM346细胞类似产品::LN 229细胞、HS-766-T细胞、NCI-H2286细胞
BeWo细胞类似产品::SU-DHL-5细胞、TE-3A细胞、UM-UC-3细胞
COV 434细胞类似产品::HEK/EBNA细胞、SKNBE2C细胞、HT1197细胞
H4-II-E细胞类似产品::Hmy.2 CIR细胞、PANC 203细胞、624细胞
SW 962细胞类似产品::OCI-Ly07细胞、MMAc.SF细胞、SNU-119细胞
BJA-B细胞类似产品::Y3Ag1.2.3细胞、NE-1细胞、BC-020细胞
COLO679细胞类似产品::EPC细胞、Hs-940细胞、SCH细胞
H-929细胞类似产品::C3H/10T1/2 CL8细胞、ZR751细胞、NCI-H661细胞
mIMCD-3细胞类似产品::NIH:OVCAR4细胞、BJA-B细胞、H1882细胞
TW 01细胞类似产品::A20细胞、ECC-1细胞、SC细胞
MBMEC细胞类似产品::CNLMG-B5537SKIN细胞、alphaTC1 Clone 6细胞、UPCI:SCC90细胞
SCC090细胞类似产品::A673细胞、MOLM13细胞、Lewis Lung细胞
Ocular Choroidal Melanoma-1细胞类似产品::XuanWei Lung Cancer-05细胞、A375-SM细胞、CHP 212细胞
MOLM16细胞类似产品::16-HBE14o细胞、CEM-CCRF细胞、HSF细胞
MOLM16细胞类似产品::16-HBE14o细胞、CEM-CCRF细胞、HSF细胞
8402细胞类似产品::VMCUB1细胞、BMDC细胞、WM 2664细胞
BE(2)C细胞类似产品::SUM 149PT细胞、NT2/D1细胞、BALB/c 3T3 clone A31细胞
Daudi细胞类似产品::SW 837细胞、SK-Mel 1细胞、NKM1细胞
NPC-TW 01细胞类似产品::SK-OV-3细胞、V79-4细胞、BLO11细胞
786-O RCC细胞类似产品::SMA 560细胞、Murine Carcinoma-38细胞、VK2/E6E7细胞
EL 4细胞类似产品::L5178Y细胞、Hs 294T细胞、HuH-28细胞
Hs 695.T细胞类似产品::HSC6细胞、IBRS-2细胞、CHL-11细胞
HCe-8693细胞类似产品::MOLM-16细胞、UACC893细胞、OCIAML5细胞
Mink细胞类似产品::ROS 17/28细胞、SUIT2细胞、Human Microglia Clone 3细胞
HUT-125细胞类似产品::HEL-92_1_7细胞、hTERT-RPE-1细胞、VeroE6细胞
Mono-Mac-1细胞类似产品::ssMCF7细胞、ATC241细胞、Normal Rat Kidney细胞
HS-940-T细胞类似产品::Hs940-T细胞、WILL-2细胞、HSF2细胞
ML-2细胞类似产品::CAMA细胞、H2452细胞、NCIH508细胞
RSMC细胞类似产品::SU-DH-L5细胞、TKB1细胞、UWB1.289细胞
SNU-601细胞类似产品::NT2/D1细胞、PANC-03-27细胞、DSL-6A-C1细胞
DHL6细胞类似产品::KASUMI6细胞、C22细胞、LM(TK-)细胞
MDA134细胞类似产品::RBL 1细胞、H-1993细胞、MDCK细胞
U343MG细胞类似产品::JM-Jurkat细胞、RPMI 1788细胞、U87-MG细胞
CNE2Z细胞类似产品::LOU-NH-91细胞、COS-1细胞、CNE细胞
RPMI #8226细胞类似产品::He La细胞、LICR-LON-HN6-R细胞、SKNBE-2细胞
NCIH1155细胞类似产品::LS 1034细胞、IEC18细胞、Opossum Kidney细胞
Mink细胞类似产品::ROS 17/28细胞、SUIT2细胞、Human Microglia Clone 3细胞
BT20细胞类似产品::OV-90细胞、MDAMB361细胞、PANC-04-03细胞
MuM-2C:人眼脉络黑色素瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
NALM6细胞类似产品::Ramos (RA)细胞、IPEC-J2细胞、CTV1细胞
TOV21G细胞类似产品::Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞、PANC-1细胞、SNU398细胞
AAV293细胞类似产品::COS1细胞、MLE12细胞、NCIH2171细胞
WM-2664细胞类似产品::Mahlavu细胞、SNUC2B细胞、MDCK supertube细胞
COLO-320-DM细胞类似产品::GEO细胞、KYSE-520细胞、SW1353细胞
M059J细胞类似产品::Reuber-H-35 hepatoma细胞、RPE D407细胞、CFSC-8B细胞
"