"HMO6:人小胶质复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37℃消化。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化HAO了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常HAO,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个性。如果和标准形态不一致,那可能是自己没消化HAO导致的,但如果消化方法正确,仍然成片分布,甚至完全吹打成单细胞悬液,贴壁后仍然成片分布,这是细胞的性,是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布,你的细胞之后会对你越来越不HAO。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
H-322细胞类似产品::LOU-NH91细胞、NCI-H125细胞、KLM1细胞
SAS细胞类似产品::GA-10-Clone-4细胞、NPA细胞、H-650细胞
Alexander cells细胞类似产品::HEK 293 c18细胞、M2-10B4细胞、CAL 85-1细胞
Calu3细胞类似产品::PY8119细胞、CV1细胞、TM3细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:小胶质细胞
HMO6:人小胶质复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
SUM-159-PT细胞类似产品::Sp2/0-Ag-14细胞、SW1271细胞、OVCAR4细胞
HUT-28细胞类似产品::P-815细胞、Hut292细胞、NMCG1细胞
GC-1spg细胞类似产品::SK.MEL.2细胞、NCI-H1299细胞、YES 2细胞
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升GAO到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁
一般使用trypsin-EDTA 浓度为0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液浓度过GAO时,易造成培养基中细胞碎片增多,黑渣子增多,常规细胞传代时建议用0.05%的胰酶进行消化,对于难消化的细胞可采用0.25%胰酶进行消化,细胞密度过GAO超过80%时,采用分步消化法。胰酶储存在-20°C,解冻在4°C进行,次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于-20°C,避免反复冷冻解冻造成trypsin之活性降低,并可减少污染之机会。胰酶消化的程度是细胞培养中的一个关键步骤:消化过度细胞碎片增多,黑渣子增多,细胞会成片脱落,严重影响细胞活性,并有部分细胞漂浮,随弃去的胰酶流失;消化不足则细胞难于从瓶壁上吹下,反复吹打同样也会损伤细胞活性。不同细胞对消化液的敏感性不同,胰酶消化的时间也会有差异。胰酶消化时间与胰酶的浓度,是否含EDTA,胰酶的储存时间,胰酶的储存温度,是否反复冻融,消化加入的胰酶体积,消化温度及细胞的密度有关。对于新购买的细胞,建议客户先用低浓度的胰酶仔细去摸索一下消化时间,可每隔1分钟镜下观察细胞是否变圆,记录Zui佳消化时间,下一次操作参考之前的记录来控制时间即可。
NGEC细胞类似产品::Duke University 145细胞、TCam-2细胞、SF-763细胞
P3/X63/Ag8细胞类似产品::NCI-H1666细胞、HFSF细胞、CAL-62细胞
AAV293细胞类似产品::COS1细胞、MLE12细胞、NCIH2171细胞
MHCC97-H细胞类似产品::Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞、RIN m5F细胞、MC3T3-E1(C4)细胞
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EVSA/T细胞类似产品::OCI/AML-5细胞、NCI-H196细胞、A9细胞
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OSKM-1细胞类似产品::CMEC/D3细胞、Hs 839.T细胞、CCD-841-CoTr细胞
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Hs-746T细胞类似产品::NOZAWA细胞、CCRF/CEM-C7细胞、EAhy926细胞
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SCL-2细胞类似产品::BNCL-2细胞、LNCaP subline C4-2细胞、PIG3细胞
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AAV293细胞类似产品::COS1细胞、JIMT-1细胞、PASMCS细胞
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DF-1细胞类似产品::H1184细胞、UPCI:SCC090细胞、NCIH727细胞
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RAMOS2G64C10细胞类似产品::McCoy细胞、MADB106细胞、U-87MG细胞
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CL-34细胞类似产品::MDA134细胞、IOSE-29细胞、Hep 3B细胞
Ketr3细胞类似产品::HRA19细胞、VE细胞、RPMI7666细胞
MDCK Type II细胞类似产品::LMH细胞、Michigan Cancer Foundation-12F细胞、HEC-1A细胞
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HCEpiC细胞类似产品::C2BBe1细胞、Meat Animal Research Center-145细胞、RFL-6细胞
HMO6:人小胶质复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
SW-954细胞类似产品::HB 611细胞、KG1细胞、PC 12细胞
MGH-U1 (EJ)细胞类似产品::Lewis lung carcinoma line 1细胞、HBL-100细胞、H1436细胞
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OVTOKO细胞类似产品::RL-65细胞、Tn 5B1-4细胞、ketr 3细胞
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