"HPC-Y5:人胰腺导管癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
冻存和复苏的原则:慢冻快融》当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升GAO,并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序:采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时,1~2℃/min;当温度达-25℃以下时,5~10℃/min;当温度达-100℃时,可迅速放入液氮中。2.简易程序:将冷冻管(管口要朝上)放入纱布袋内,纱布袋系以线绳,通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口,按每分钟温度下降1~2℃的速度,在40min内降至液氮表面过夜,次晨投人液氮中。3.传统程序:冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。细胞冻存方法:1.预先配制冻存液》(1)8%DMSO+细胞生长液(92%血清)2.取对数生长期细胞,经胰酶消化后,加入适量冻存液,用吸管吹打制成细胞悬液(1×10(6)~5×10(6)细胞/ml)。3.加入1ml细胞于冻存管中,密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法:1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,轻轻摇动冷冻管,使其在1分钟内全部融化(不要超过3分钟)。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养,24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液,以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂,然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
X63Ag8-653细胞类似产品::HCMEC(BL12-H)细胞、HCCLM3细胞、GNM细胞
NCI-H1618细胞类似产品::3396细胞、H-1417细胞、SNU-1细胞
HPDE6c7细胞类似产品::B16F1细胞、BCPAP细胞、RCC 786-O细胞
HLF-a细胞类似产品::TW01细胞、MDAMB330细胞、COLO.205细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:胰腺管癌;淋巴结转移
HPC-Y5:人胰腺导管癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
K562/ADR细胞类似产品::LCMS细胞、PG-4细胞、HSC-I细胞
TE4细胞类似产品::RKO_AS45细胞、SNB-19细胞、BrCL18细胞
TW 01细胞类似产品::A20细胞、ECC-1细胞、SC细胞
培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制HAO的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋HAO冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做HAO标记;6)冻存:在殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10/ml数量。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
HPC-Y5:人胰腺导管癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁
细胞传代后放入培养箱没有摇匀,或者放入时摇匀,但在细胞贴壁前,又移动了培养瓶,频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少,培养箱搁板表面不平整,这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象,大部分悬浮细胞在细胞密度很GAO的情况下,很可能会出现部分细胞抱团生长的现象,聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物,殃及周围的悬浮细胞,因此在培养悬浮细胞时需控制HAO细胞密度。如果出现了细胞团,可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团,也可以尝试一下方法:将细胞悬液收集到15ml离心管中,静置20min左右,小心取上层细胞上清培养(该方法只能去除部分较大的细胞团)。部分细胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐药株等),这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡,则很可能是细胞状态不佳,可以通过调整血清浓度,控制消化,控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态;如果大部分细胞出现空泡,且单个细胞内空泡数目偏多,则可能细胞代次较GAO,细胞老化所致,需更换代次较早的细胞。
Hs578Bst细胞类似产品::RCC10 RGB细胞、A427细胞、EFM192C细胞
P31/Fujioka细胞类似产品::B958细胞、SK BR 03细胞、D562细胞
HT-115细胞类似产品::32D.3细胞、HSMC细胞、A-172 MG细胞
Tu686细胞类似产品::UCLA-RO 81细胞、SUM102细胞、RPMI8402细胞
HS688AT细胞类似产品::OPM2细胞、COV 504细胞、Adeno 293细胞
H1105细胞类似产品::CHP 126细胞、SW579细胞、D-324MED细胞
Sup T-1细胞类似产品::NTERA-2 cl.D1细胞、MC116细胞、SK-MEL-MeWo细胞
OVCA420细胞类似产品::H 9细胞、MGH-U1细胞、CEM-CCRF细胞
SU.86.86细胞类似产品::D6P2T细胞、U031细胞、IMR90细胞
NBL_S细胞类似产品::KCL22细胞、HEK.EBNA细胞、Ocular Choroidal Melanoma-1细胞
Y1细胞类似产品::CaSki细胞、28SC细胞、LS-123细胞
C3H10T1/2CL8细胞类似产品::SKNFI细胞、TE-15细胞、H-2073细胞
SGC996细胞类似产品::HEI-193细胞、HDF-a细胞、SNU-407细胞
NCI-H498细胞类似产品::RPE1-hTERT细胞、B16 subline B78细胞、22Rv-1细胞
MCF7ADR细胞类似产品::SNU-5细胞、A549ATCC细胞、BrCL12细胞
Wistar Institute-38细胞类似产品::PK(15)细胞、WM115细胞、PC 61-5-3细胞
Wistar Institute-38细胞类似产品::PK(15)细胞、WM115细胞、PC 61-5-3细胞
A375-MEL细胞类似产品::Hs 746.T细胞、SKLU-1细胞、Porcine Kidney-15细胞
HSC6细胞类似产品::HOP 92细胞、Dami细胞、SNU620细胞
UWB1289细胞类似产品::A 2780 CP细胞、Panc_05_04细胞、NCIH2081细胞
Ketr-3细胞类似产品::C42细胞、CCD 966SK细胞、MES-SA/Dx5细胞
LY细胞类似产品::H7721细胞、H35 Reuber细胞、Karpas-422细胞
769P细胞类似产品::AHH1细胞、AU-565细胞、H-1770细胞
LTEPa2细胞类似产品::SNU-484细胞、PTK-1细胞、MADB106细胞
HPC-Y5:人胰腺导管癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
COR-L23/P细胞类似产品::RKO-E6细胞、AtT 20细胞、NALM-6细胞
Namalwa细胞类似产品::A 253细胞、CV-1 in Origin Simian-7细胞、Mc Ardle 7777细胞
CF-PAC1细胞类似产品::NCIH2452细胞、P30/Ohkubo细胞、NCC-IT细胞
HCV-29细胞类似产品::E.L.4细胞、NCI-H-295细胞、Hmy.2 CIR细胞
CAL27细胞类似产品::MDA MB 231细胞、R.K.13细胞、TO175T细胞
NCI-H2135细胞类似产品::DV90细胞、TGBC11T细胞、ISHI细胞
HUVEC-C[HUVEC]细胞类似产品::N1S1细胞、M-07e细胞、Virginia Mason Research Center-Lung Cancer D细胞
MDA-MB-175-VII细胞类似产品::SW-1463细胞、KOSC2细胞、NB.4细胞
MGHU3细胞类似产品::MOLT.4细胞、WM-115细胞、NCIH1963细胞
H-226细胞类似产品::RSC96细胞、CAL 62细胞、NCI-H28细胞
SNU-387细胞类似产品::H-1395细胞、NCIH1105细胞、UMNSAH/DF#1细胞
BNL.1ME A.7R.1细胞类似产品::NCI-H740细胞、NCI-SNU-C1细胞、3T3-Swiss albino细胞
Hs 636.T细胞类似产品::EFO-27细胞、HCC1428细胞、PAa细胞
NCI H23细胞类似产品::H-747细胞、C4-2B细胞、SCCVII细胞
NCI-H1838细胞类似产品::A3细胞、Strain V细胞、B16细胞
NCI H23细胞类似产品::H-747细胞、C4-2B细胞、SCCVII细胞
HET1A细胞类似产品::COR-L279细胞、Mv 1 Lu细胞、HAVSMC细胞
SW 13细胞类似产品::CCD18Co细胞、UMUC-14细胞、CAOV4细胞
CaES-17细胞类似产品::MDA453细胞、MNNGHOS细胞、H211细胞
FDCP1细胞类似产品::RT4P细胞、CCRF/CEM细胞、COR-L23细胞
SNU739细胞类似产品::CF-PAC1细胞、149 PT细胞、SNU-484细胞
SNU739细胞类似产品::CF-PAC1细胞、149 PT细胞、SNU-484细胞
SK-N-BE(2)-M17细胞类似产品::MAntle cell VERona-1细胞、Mono-Mac-1细胞、J111细胞
BTI-Tn-5B1-4细胞类似产品::RMC细胞、H1581细胞、OKT 3细胞
SW260细胞类似产品::OVCAR-10细胞、PLMVEC细胞、PG-4(S+L-)细胞
SU-DHL6细胞类似产品::HuT78细胞、NCI-H661细胞、IOSE-29细胞
CA-OV-3细胞类似产品::HIT T15细胞、VK2 (E6/E7)细胞、L6565细胞
Jiyoye(P-2003)细胞类似产品::Cloudman S91 melanoma clone M-3细胞、ECC1细胞、Tb 1 Lu (NBL-12)细胞
SW 1783细胞类似产品::BEL7404细胞、P-388细胞、LTPA细胞
IM9细胞类似产品::Chang Cells细胞、W256细胞、FTC133细胞
HPB/ALL细胞类似产品::SP-2/0-AG14细胞、H-1299细胞、HGBEC细胞
MDA-MB436细胞类似产品::LA-795细胞、X63Ag8.653细胞、Colon 38细胞
Kit 225 K6细胞类似产品::H-1385细胞、251 MG细胞、VMM5细胞
MUTZ-1细胞类似产品::SKM1细胞、HEK293-EBNA细胞、HIT-T15细胞
NCI-H82细胞类似产品::VSC4.1细胞、PT67细胞、H2108细胞
H-508细胞类似产品::LLCPK1细胞、Human Embryo Lung-1细胞、3T6 Swiss Albino细胞
DH82细胞类似产品::IM-95细胞、SUDHL16细胞、CCRF/CEM细胞
HT1080细胞类似产品::PK-13细胞、NT2-D1细胞、HT-1197细胞
BC-3H-1细胞类似产品::H766T细胞、BALB/3T3 (clone A31)细胞、MCA 205细胞
KYSE510细胞类似产品::Eph4 1424细胞、AE1201细胞、Ramos 2G6.4C10细胞
RKO-AS45-1细胞类似产品::HCC0827细胞、MDA-MB-468-RED细胞、OCI Ly19细胞
MRMT-1细胞类似产品::HOEC细胞、SNU-638细胞、CORL88细胞
HuCC-T1细胞类似产品::HOP 62细胞、P3HR1-BL细胞、H-209细胞
Madin Darby Canine Kidney细胞类似产品::M20 [Human melanoma]细胞、SK-MEL5细胞、TM-4细胞
SK-N-BE-2细胞类似产品::ID8/MOSEC细胞、BpRc1细胞、SK-CO-1细胞
Normal Rat Kidney-49F细胞类似产品::A-172MG细胞、Tu177细胞、HCC-1419细胞
KMH-2细胞类似产品::OCI-Ly1细胞、SJRH-30细胞、aTC1 Clone 6细胞
M21细胞类似产品::NCIH1385细胞、RKO细胞、SKCO 1细胞
MDA 435细胞类似产品::SP2细胞、A-375.S2细胞、T47D细胞
RH-35细胞类似产品::H-2452细胞、Psi2-DAP细胞、H498细胞
RCSMC细胞类似产品::OVCAR.8细胞、H-2073细胞、LAN-5细胞
H1954细胞类似产品::Eca109细胞、HEK-293-FT细胞、EAC细胞
H.Ep.-2细胞类似产品::SNU-886细胞、PLA802细胞、BT-B细胞
Panc-05.04细胞类似产品::SW 1353细胞、WEHI164细胞、EVSA/T细胞
hEEC细胞类似产品::Pa017C细胞、A-2780细胞、MM.1S细胞
Granta 519细胞类似产品::HET-1A细胞、J 774A.1细胞、Central Adrenergic TH-expressing a细胞
SKBR-3细胞类似产品::RPMI 1846细胞、NCIH2085细胞、RT-BM-1细胞
H64细胞类似产品::EC109细胞、NCI H82细胞、PLC PRF 5细胞
H64细胞类似产品::EC109细胞、NCI H82细胞、PLC PRF 5细胞
TCMK1细胞类似产品::CMT.64细胞、OCI Ly1细胞、H-23细胞
NCI-H1781细胞类似产品::253JBV细胞、NHEK细胞、ESC-410细胞
Karpas-299细胞类似产品::HCM细胞、SHIN-3细胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞
CCRF-CEM/S细胞类似产品::Panc05.04细胞、PANC0403细胞、MLOY4细胞
293E细胞类似产品::INS-1E细胞、LS 174 T细胞、SHP77细胞
T98细胞类似产品::SUPB-15细胞、CF PAC-1细胞、MV-4-11细胞
COLO 320DM细胞类似产品::4T1.2细胞、R2C细胞、C3H/10T1/2 CL8细胞
HEL 299细胞类似产品::H2085细胞、MM.1S细胞、L-5178-Y细胞
NCI-H2452细胞类似产品::SKMEL28细胞、L1210细胞、SCC-4细胞
NIH:OVCAR3细胞类似产品::NRK 52E细胞、Epstein-Barr-2细胞、SR细胞
PLMVEC细胞类似产品::JB6 clone 30, subclone 7b细胞、HTh-74细胞、L(TK-)细胞
OVCAR 432细胞类似产品::ME16C细胞、Sarcoma OSteogenic-2细胞、HEI193细胞
Michigan Cancer Foundation-10A细胞类似产品::ST486细胞、VP303细胞、3T3-J2细胞
NCIH1563细胞类似产品::GM03570E细胞、COLO-738细胞、TOV112D细胞
DK-MG细胞类似产品::CAL-12T细胞、NRCC细胞、OCI-LY-18细胞
GM04680细胞类似产品::PL11细胞、KYSE270细胞、WSU-HN13细胞
MDA231-LM2细胞类似产品::NCI H716细胞、MA-782细胞、Reuber H-35细胞
PANC1005细胞类似产品::H-2198细胞、N-87细胞、MOLM-16细胞
MNNG/HOS Clone F-5细胞类似产品::SJSA1细胞、DHL-16细胞、GM02131A细胞
Embryonic Bovine Tracheal cells细胞类似产品::NCM460细胞、HNE2细胞、DMS 153细胞
EM3细胞类似产品::WISH细胞、BRL3A细胞、Mino细胞
HO1N1细胞类似产品::Case 3细胞、Clone M-3细胞、VMM5A细胞
PSN-1细胞类似产品::BJ1细胞、NB-19细胞、293E细胞
HPC-Y5:人胰腺导管癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
HCT 15细胞类似产品::COV 434细胞、NCIH2170细胞、MSTO211H细胞
8305C细胞类似产品::MKN28细胞、NCI-H719细胞、SK-MEL2细胞
HMCB细胞类似产品::Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MDCKII-WT细胞、NPC-TW 01细胞
HR8348细胞类似产品::DHL10细胞、LS174T细胞、DMS153细胞
OCI/AML5细胞类似产品::ACC3细胞、Panc 8.13细胞、B16 F10细胞
HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞类似产品::QSG7701细胞、HOP62细胞、THPI细胞
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