"EAC-E2G8:小鼠腹水瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气的,大家争取做到因材施教,比如试试下面的“四步消化法”。(以难消化细胞为例),具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍(目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉)。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况把握)。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
RLE-6TN细胞类似产品::C3H10T1/2CL8细胞、U-251MG细胞、RWPE-1细胞
CFSC-2G细胞类似产品::H2405细胞、CCD-18Co细胞、NK 10a细胞
H-1651细胞类似产品::A431/P细胞、SC1细胞、LTEP-sm细胞
Ect1/E6E7细胞类似产品::NIH-3T3-L1细胞、H-676B细胞、End1/E6E7细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:腹水瘤
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细胞形态:上皮细胞样
H-661细胞类似产品::PCI-4M细胞、MKN7细胞、HCC1359细胞
NCI-H920细胞类似产品::HLEC-B3细胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis细胞、CORL279细胞
OK-WT细胞类似产品::BBE细胞、AML-193细胞、PLA-801C细胞
细胞传代注意事项:①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次ZuiHAO只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材;②每天观察细胞形态,掌握HAO细胞是否健康的标准:健康细胞的形态饱满,折光性HAO,生长致密时即可传代;③如发现细胞有污染迹象,应立即采取措施,一般应弃置污染的细胞,如果必须挽救,可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗,随后培养基中加入较大量的抗生素,并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持:细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的点,要做HAO建系的维持必须记录HAO细胞档案,换液传代和做HAO细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:半贴壁
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
WM-266-4细胞类似产品::CCD-966SK细胞、T-HSC细胞、MCF-7/ADR-RES细胞
RKO-AS45-1细胞类似产品::HCC0827细胞、MDA-MB-468-RED细胞、OCI Ly19细胞
HT115细胞类似产品::OCI-AML-5细胞、SNU5细胞、SKMEL3细胞
High5细胞类似产品::C2BBe 1细胞、Kit225 K6细胞、BrCL15细胞
HCC1171细胞类似产品::Wistar Institute-38细胞、MiaPaCa-2细胞、DSL-6A/C1细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞类似产品::AGS细胞、P388.D1细胞、P3X63 AG8-653细胞
MODE-K细胞类似产品::RC-4B细胞、GM03190A细胞、H-69细胞
Sc-1细胞类似产品::RS 4;11细胞、SCI1细胞、D283MED细胞
A375mel细胞类似产品::SKLMS-1细胞、SGC-7901细胞、JHH2细胞
HUV-EC-C细胞类似产品::B16/F0细胞、H1184细胞、H2444细胞
OCI-Ly 7细胞类似产品::H220细胞、253J-BV细胞、Tsup-1细胞
HLF细胞类似产品::HSC-T6细胞、NCI-H774细胞、SW-1222细胞
KGN细胞类似产品::SO-RB50细胞、HS688AT细胞、SKCO1细胞
Toledo细胞类似产品::G-361细胞、H-295细胞、KP4细胞
KOSC-2细胞类似产品::OAW42细胞、Mel-MeWo细胞、T-ALL-1细胞
FLS细胞类似产品::Hs68细胞、PC10细胞、SNU484细胞
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PANC 813细胞类似产品::HCT GEO细胞、MESSADX5细胞、PM6细胞
F-36P细胞类似产品::Hepa 1-6细胞、NB9细胞、PLMVEC细胞
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HTori:3细胞类似产品::KBM-7/Hap8细胞、H4-II-E细胞、SCC7细胞
DHL5细胞类似产品::B16 BL6细胞、HCC-366细胞、PL-12细胞
NCIH510细胞类似产品::N-9细胞、HCT GEO细胞、SNU-886细胞
LN229细胞类似产品::Hs 870.T细胞、H647ell细胞、Swiss3T3细胞
T2(174 x CEM.T2)细胞类似产品::PANC.1细胞、H295R细胞、CNE2Z细胞
SK-ML2细胞类似产品::COR L279细胞、Sp2/0-Ag14细胞、J 111细胞
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EMT-6细胞类似产品::CTLL2细胞、MCM细胞、GA-10细胞
Tca-8113细胞类似产品::KM12细胞、Hca-F细胞、NP-69细胞
NCI-UMC-11细胞类似产品::WM-115细胞、H1623细胞、NK-92 MI细胞
KATO 3细胞类似产品::WTRL1细胞、L929细胞、HCC1438细胞
TGW-nu细胞类似产品::SKNEP细胞、OCI Ly10细胞、TE-85细胞
H-847细胞类似产品::Li-7细胞、ATDC-5细胞、CMECs细胞
ASH-3细胞类似产品::H-1703细胞、SW756细胞、NCI-H2342细胞
Hep-G2细胞类似产品::Emory University-2细胞、FK81细胞、CCC-HSF-1细胞
A-375细胞类似产品::H647ell细胞、A.704细胞、Hs683T细胞
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PL11细胞类似产品::BHK细胞、Madin Darby Canine Kidney细胞、PF-382细胞
PLB985细胞类似产品::Pro-5WgaRI3C细胞、P30-OHKUBO细胞、Panc-05.04细胞
Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞类似产品::NCIH2107细胞、NCI-H1581细胞、NFS-60细胞
Lec1细胞类似产品::ChaGo-K-1细胞、Caco-2/BBe 1细胞、EOMA细胞
NG 108-15细胞类似产品::GM03569B细胞、MDA-MB-436细胞、A431细胞
NCIADR.RES细胞类似产品::SUNE 1细胞、SU-DHL-5细胞、3LL细胞
CEM-0细胞类似产品::33604细胞、NCIH1341细胞、NB1-RGB细胞
IAR20细胞类似产品::SW 1222细胞、WIL2-S细胞、NCIH1573细胞
KATOIII细胞类似产品::NCI-841细胞、Z310细胞、NIH:OVCAR-4细胞
OCI-AML3细胞类似产品::HCC0078细胞、UPCI:SCC90细胞、P3X63Ag8.653细胞
NIH:OVCAR4细胞类似产品::Ly8细胞、CHL-1细胞、DK-MG细胞
H-1882细胞类似产品::IPECJ2细胞、K7M2细胞、MIA PaCa-2细胞
H1623细胞类似产品::OCILY7细胞、HO-8910PM细胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞
AC29细胞类似产品::HEC-1-B细胞、H8细胞、GM3190细胞
LLC-PK1细胞类似产品::TR146细胞、RBE4细胞、A549/ATCC细胞
RS4-11细胞类似产品::H1688细胞、H-292细胞、C-643细胞
RAW2647细胞类似产品::P30/OHK细胞、0V-1063细胞、SNU520细胞
P31/Fujioka细胞类似产品::B958细胞、SK BR 03细胞、D562细胞
NCIH250细胞类似产品::NCIH322细胞、NCIH2009细胞、MDA-MB-175VII细胞
BC-028细胞类似产品::FHC细胞、NALM-6细胞、CL-34细胞
HT-115细胞类似产品::32D.3细胞、A-375SM细胞、NCI-H1355细胞
P30/Ohkubo细胞类似产品::OVCAR 433细胞、SUM 149细胞、CEM T4细胞
Jurkat77细胞类似产品::HCEC细胞、P3.times.63 Ag8.653细胞、H766T细胞
HCE-2 [50.B1]细胞类似产品::G-401细胞、HRA-19细胞、NCIH378细胞
LTEP-a2细胞类似产品::S37细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1细胞、WRL68细胞
NTERA-2 clone D1细胞类似产品::NCI-H226细胞、H-226细胞、C81-61细胞
WSU-DLCL(2)细胞类似产品::MDCK细胞、V 79-4细胞、HCV 29细胞
MNNG/HOS Clone F-5细胞类似产品::SJSA1细胞、DHL-16细胞、GM02131A细胞
Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞类似产品::H128细胞、HASMC细胞、NCI-H1299细胞
ACT-1细胞类似产品::LC-2-Ad细胞、SW1990细胞、H1688细胞
CCRF细胞类似产品::EC9706细胞、SP2/0 Ag-14细胞、EA hy 926细胞
H1693细胞类似产品::PC-14细胞、QGY7703细胞、NE1-E6E7细胞
IPAM-WT细胞类似产品::Mink细胞、Hs 822.T细胞、BEND细胞
FL62891细胞类似产品::PCI-SG231细胞、SNU-601细胞、SNU-668细胞
P3/NS1/Ag4-1细胞类似产品::2008细胞、AA-Mel细胞、SMMC-7721细胞
Huh-7.5.1细胞类似产品::L-cells细胞、NPA87细胞、SMA-560细胞
MES23.5细胞类似产品::NCI-SNU-1040细胞、L Wnt-3A细胞、SN12CPM6细胞
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PJ34细胞类似产品::P3HRI细胞、SNU-878细胞、HOP 62细胞
C33-A细胞类似产品::OCI-Ly03细胞、A-498细胞、NGP细胞
DMS 79细胞类似产品::SH-SY5Y Parental细胞、Cates-1B细胞、HN6细胞
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CV-1 in Origin Simian-1细胞类似产品::H-1993细胞、PG-4 (S+L-)细胞、TF-1a细胞
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MEG01细胞类似产品::OVCAR4细胞、Hs706T细胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞
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EFM192B细胞类似产品::COLO-394细胞、NCI-H2227细胞、Helacyton gartleri细胞
EAC-E2G8:小鼠腹水瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
COLO 679细胞类似产品::CAOV4细胞、BHK 21细胞、NCIH2066细胞
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Mv 1 Lu (NBL-7)细胞类似产品::BCaP 37细胞、H-1944细胞、NCI-UMC-11细胞
MC26细胞类似产品::Hs-274-T细胞、TW 01细胞、HC-11细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞类似产品::HIBEpiC细胞、HRA19细胞、P3 NS1 Ag4/1细胞
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