"C8161:人黑色素瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
有一些细胞是数量多一点比较HAO生长,生长状态也比较HAO。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较HAO,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较HAO。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不HAO的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不HAO,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞建议只吹打,不消化)其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得HAO的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
Lewis lung carcinoma细胞类似产品::Duck embryo细胞、293H细胞、WERI-Rb1细胞
YD-38细胞类似产品::H64细胞、293-FT细胞、MS 751细胞
NCIH1755细胞类似产品::FET细胞、RGM-1细胞、MILE SVEN1细胞
KLN-205细胞类似产品::RCS细胞、H1437细胞、Centre Antoine Lacassagne-51细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:皮肤黑色素瘤;腹壁转移;女性
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细胞形态:上皮细胞样
RFL-6细胞类似产品::SNUC2B细胞、PG13细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞
BC-025细胞类似产品::Ramos G6.C10细胞、Human Microglia Clone 3细胞、NCI-H748细胞
H-1666细胞类似产品::OCI-AML-2细胞、BE(2)M-17细胞、HCC1428细胞
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升GAO到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁
细胞传代后放入培养箱没有摇匀,或者放入时摇匀,但在细胞贴壁前,又移动了培养瓶,频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少,培养箱搁板表面不平整,这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象,大部分悬浮细胞在细胞密度很GAO的情况下,很可能会出现部分细胞抱团生长的现象,聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物,殃及周围的悬浮细胞,因此在培养悬浮细胞时需控制HAO细胞密度。如果出现了细胞团,可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团,也可以尝试一下方法:将细胞悬液收集到15ml离心管中,静置20min左右,小心取上层细胞上清培养(该方法只能去除部分较大的细胞团)。部分细胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐药株等),这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡,则很可能是细胞状态不佳,可以通过调整血清浓度,控制消化,控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态;如果大部分细胞出现空泡,且单个细胞内空泡数目偏多,则可能细胞代次较GAO,细胞老化所致,需更换代次较早的细胞。
CCRF-CEM C1细胞类似产品::HIMEC细胞、FaDu细胞、HCT-GEO细胞
OCI Ly19细胞类似产品::H-3255细胞、M-20细胞、HCC70细胞
NCI-H2228细胞类似产品::HEM细胞、CaES-17细胞、Jiyoye(P-2003)细胞
NIT-1细胞类似产品::NPA 87细胞、Co-115细胞、HCC202细胞
Hs819.T细胞类似产品::SKO-007细胞、H-524细胞、NCIH2073细胞
NCI-SNU-398细胞类似产品::SCC-9细胞、MDA 231-LM2-4175细胞、SNU423细胞
Porcine Kidney-15细胞类似产品::PLA801C细胞、LS-1034细胞、8305C_1细胞
SUM-52细胞类似产品::AG 9细胞、B16/F0细胞、HCC 2185细胞
Madison lung细胞类似产品::WEHI-279细胞、CFPAC-1细胞、K 562细胞
HPAF细胞类似产品::Hs 729细胞、SKMEL-24细胞、SNK1细胞
H1155细胞类似产品::HM细胞、C32 [Human melanoma]细胞、NCIH526细胞
JJN-3细胞类似产品::HOC1细胞、CW2细胞、UMUC14细胞
Daoy细胞类似产品::KMB-17细胞、UMRC-2细胞、Rat-2细胞
Pro-5 Lec1.3c细胞类似产品::HuH28细胞、VM Cub 1细胞、HS-294T细胞
C8D1A细胞类似产品::NCIH1930细胞、HELA-GFP细胞、Dunn LM8细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞类似产品::MDA-MB361细胞、SW-837细胞、Cloudman M3细胞
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A2780CP70细胞类似产品::P3 NS1 Ag4/1细胞、THLE2细胞、B16 melanoma细胞
SUPT-1细胞类似产品::RIN14B细胞、Hs852T细胞、Cates 1B细胞
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SNU16细胞类似产品::CAL39细胞、FL 62891细胞、RIN14B细胞
PLCPRF5细胞类似产品::SCL-II细胞、QBC939细胞、L929(NCTC)细胞
IOSE-Van细胞类似产品::VM Cub 1细胞、Potorous tridactylus Kidney 1细胞、HMO6细胞
7404细胞类似产品::4-1st细胞、Hs 706.T细胞、Hs 821.T细胞
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GM3570细胞类似产品::HS-729细胞、OCILY10细胞、GM02132细胞
HM06.A1细胞类似产品::NCI-H847细胞、H2029细胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial细胞
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TK+/- (clone 3.7.2C)细胞类似产品::NCI-H2106细胞、130 T细胞、PLC-8024细胞
TMK-1细胞类似产品::MGHU3细胞、SF 295细胞、BOWES细胞
SKHEP-1细胞类似产品::SNT-8细胞、NCI-H1436细胞、Human Microvascular Endothelial Cell line-1细胞
MALME 3M细胞类似产品::A204细胞、HaCaT细胞、MDCK II细胞
NCI-H1688细胞类似产品::MOLT3细胞、P 3 HR 1细胞、CCD 1112SK细胞
PC.3细胞类似产品::SK-NM-C细胞、AZ 521细胞、SK-NM-C细胞
Hs 737.T细胞类似产品::293 F细胞、BT细胞、Merwin Plasma Cell tumor-11细胞
LA-N-6(OAN)细胞类似产品::Mel RM细胞、MHCC97H细胞、NG 108-15细胞
BCP1细胞类似产品::M4e细胞、SK-CO-1细胞、IOSE29细胞
LAN-1细胞类似产品::NCIH460细胞、KMM1细胞、BTI-Tn5B14细胞
Hs 281.T细胞类似产品::COLO-320-DM细胞、NCM460细胞、ARH-77细胞
Hs-729-T细胞类似产品::RPMI8226细胞、OCILY-10细胞、MM96L细胞
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HSC-1细胞类似产品::293 H细胞、HOP 62细胞、WI-38细胞
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BALB/c 3T3 clone A31细胞类似产品::SVHUC细胞、SUM-159细胞、H-1573细胞
MJ细胞类似产品::RN细胞、NCI-SNU-119细胞、Jurkat-FHCRC细胞
MB231细胞类似产品::MKN 45细胞、KNS-81细胞、NRK 49F细胞
ECC-10细胞类似产品::LICR-LON-HN6-R细胞、Z138细胞、MDA-MB436细胞
6-T CEM细胞类似产品::1.1B4细胞、TR146细胞、Walker256细胞
YD38细胞类似产品::AG06814-J细胞、OVCAR-8/ADR细胞、143B细胞
RPMI 8226细胞类似产品::LLC1细胞、A204细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18细胞
WM266-4细胞类似产品::MeT 5A细胞、OUMS23细胞、SGC7901细胞
EBC1细胞类似产品::Panc 04.03细胞、NK 10a细胞、KNS-62细胞
NCIH358细胞类似产品::NOMO-1细胞、Giant Cell Tumor细胞、COS-1细胞
UCLA-SO-14细胞类似产品::NCI-H650细胞、HDSMC细胞、H-711细胞
SuDHL 8细胞类似产品::ACC-M细胞、Duck embryo细胞、SK-MEL-28细胞
MPP 89细胞类似产品::KY180细胞、Sp 2/0-Ag 14细胞、INS1细胞
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]细胞类似产品::HPDE细胞、TOV-21G细胞、H-2107细胞
SK-ES细胞类似产品::LK 2细胞、Emory University-3细胞、U-138 MG细胞
3AO细胞类似产品::TH1细胞、H711细胞、RN细胞
T-84细胞类似产品::SK-RC 39细胞、FRhK-4细胞、IM-9细胞
Farage Original Line细胞类似产品::IOSE-Van细胞、LMH细胞、Hs606T细胞
NCI-H2228细胞类似产品::HEM细胞、HCC-9204细胞、Panc-8_13细胞
Opossum Kidney细胞类似产品::SK RC 52细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞、NHA细胞
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NCIH358细胞类似产品::NOMO-1细胞、Giant Cell Tumor细胞、COS-1细胞
HUSMC细胞类似产品::H-847细胞、Hep G2细胞、COLO 320F细胞
HEL-92-1-7细胞类似产品::HCC-70细胞、Panc-3_27细胞、BNL.1ME A.7R.1细胞
Panc8.13细胞类似产品::GM04680细胞、Nb2a细胞、NCIH660细胞
COLO-320-HSR细胞类似产品::OVCA 433细胞、TERT-RPE1细胞、RPTEC/TERT1细胞
MADB106细胞类似产品::JEG3细胞、SUM159PT细胞、Hs604T细胞
MN-9D细胞类似产品::Mono Mac6细胞、BT549细胞、H-2405细胞
IBRS2细胞类似产品::DoTc2-4510细胞、NCI-H1092细胞、SW780细胞
KMB17细胞类似产品::Verda reno细胞、CNE-2Z细胞、801-D细胞
ID8细胞类似产品::IPI-2I细胞、RA 1细胞、FHs 74 Int细胞
NBL-4细胞类似产品::UMRC-2细胞、Simpson细胞、NCI-H498细胞
RIN14B细胞类似产品::CFSC-8B细胞、SCC-15细胞、LC-1-sq细胞
UMUC-14细胞类似产品::HCAEC细胞、NS-20Y细胞、CTLL2细胞
3T3 J2细胞类似产品::Henrietta Lacks cells细胞、RPMI 8402细胞、G-401细胞
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K562/ADP细胞类似产品::SJRH-30细胞、TE-85 clone 5细胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞
K562/ADP细胞类似产品::SJRH-30细胞、TE-85 clone 5细胞、Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1细胞
Hs 27细胞类似产品::TE-13细胞、A101D细胞、HEP-3B2细胞
A9细胞类似产品::NCIH1688细胞、H-1573细胞、A-10细胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞类似产品::Hs600T细胞、NCI-SNU-182细胞、NRK clone 52E细胞
BJA-B-1细胞类似产品::GES1细胞、OVCAR-10细胞、SLMT-1细胞
H522细胞类似产品::HUASMC细胞、JHH-2细胞、Daudi细胞
SK-N-BE细胞类似产品::ROS 17/2.8细胞、CCD841CoN细胞、KYSE-410细胞
McA-RH 8994细胞类似产品::A-375细胞、Baby Hamster Kidney-21细胞、SCL II细胞
High5细胞类似产品::C2BBe 1细胞、Kit225 K6细胞、BrCL15细胞
Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞类似产品::HS852.T细胞、NCI-H146细胞、Giant Cell Tumor细胞
NCTC-3960细胞类似产品::JVM-2细胞、HuT102细胞、TPC-1细胞
GalK 1细胞类似产品::Homo sapiens No. 578, breast cells细胞、HEB细胞、WiDr细胞
H647ell细胞类似产品::SMMC-7721细胞、C3H10T1/2细胞、OCIAML4细胞
DHL-2细胞类似产品::Normal Rat Kidney细胞、PL11细胞、Fu97细胞
BALB/c 3T3 clone A31细胞类似产品::SVHUC细胞、SUM-159细胞、H-1573细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞类似产品::OCILY10细胞、RCC23细胞、CRFK细胞
NCIH1437细胞类似产品::H1385细胞、Madison lung细胞、PL11细胞
H-2107细胞类似产品::rUCMSCs细胞、HDQP1细胞、H-1688细胞
BC-019细胞类似产品::OVCAR 8细胞、VMRC-RCZ细胞、Jurkat细胞
BI-Mel细胞类似产品::KHYG-1细胞、SkChA1细胞、SW.620细胞
MC3T3E1细胞类似产品::Panc10.05细胞、RH7777细胞、UT7细胞
NCI-H1915细胞类似产品::NCIADRRES细胞、NCI-H2195细胞、SK-N-BE-2c细胞
RCC-JF细胞类似产品::HUVEC-C[HUVEC]细胞、T47D细胞、EFM19细胞
Hs940T细胞类似产品::A549/ATCC细胞、OCI AML5细胞、SGC-996细胞
C8161:人黑色素瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
HDQ-P1细胞类似产品::HCT.116细胞、A-673细胞、HIEC细胞
H1417细胞类似产品::Jiyoye细胞、GM03671C细胞、GM2131细胞
PL-9细胞类似产品::IOSE-29细胞、NCIH508细胞、NPC-039细胞
RCSMC细胞类似产品::OVCAR.8细胞、H-2073细胞、LAN-5细胞
COLO-394细胞类似产品::H810细胞、T2 (174 x CEM.T2)细胞、NBL-12细胞
H-522细胞类似产品::HEK-293-F细胞、HTR8/SVneo细胞、H-1703细胞
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