"M2-10B4:小鼠骨髓纤维原复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37℃消化。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化HAO了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常HAO,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个性。如果和标准形态不一致,那可能是自己没消化HAO导致的,但如果消化方法正确,仍然成片分布,甚至完全吹打成单细胞悬液,贴壁后仍然成片分布,这是细胞的性,是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布,你的细胞之后会对你越来越不HAO。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HuH-28细胞类似产品::MCCAR细胞、Hs934T细胞、Jurkat, Clone E6-1细胞
hMSC-BM细胞类似产品::YT细胞、FAO-1细胞、NCIH1755细胞
SNU-C2A细胞类似产品::AAV293细胞、SNU-354细胞、SNU-5细胞
KMH2细胞类似产品::SKNBE(2)细胞、ARIP细胞、PG-4 (S+L-)细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:骨髓;纤维原细胞;C57BL/6J X C3H/HeJ
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细胞形态:上皮细胞样
Centre Antoine Lacassagne-78细胞类似产品::H-548细胞、LNT-229细胞、NTERA2-cloneD1细胞
Michigan Cancer Foundation-12F细胞类似产品::HBL 100细胞、HRCEC细胞、WM-2664细胞
NCIH2291细胞类似产品::Mouse Colon 38细胞、WB F344细胞、KE37细胞
购买细胞注意事项:1)收到细胞后首先观察细胞瓶是否完HAO,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系;2)仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等;3)用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次;4)建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。【细胞传代操作步骤】一、贴壁细胞传代:1)提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内;2)吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞;3)加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用;4)用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡;5)将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。二、悬浮细胞传代:1)将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min;2)弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液;3)将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁
传代24h-48h处于对数期的细胞,在冻存前24h换液;按照常规方法消化,离心,收集细胞沉淀;用血清重悬细胞沉淀,用血球计数板或者细胞计数仪进行细胞计数;配制细胞冻存液,将冻存液加到细胞液中,吹打混匀,控制细胞密度为2×10(6)-5×10(6)/ml;将细胞悬液按照1ml/支分装至已标记HAO的冻存管中,旋紧管盖;将冻存管放入程序冻存盒中,冻存盒立即移至-80°C冰箱中,过夜后将冻存细胞移至液氮中长期保存。冻存管内细胞数目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial,融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml/vial为宜。细胞冻存和复苏遵循“慢冻快溶”的原则。取出冷冻管后,须立即放入37°C水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化,并注意水面不可超过冷冻管盖沿,否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管之爆裂。细胞冻存时细胞状态不佳,会严重影响复苏时细胞的活率。一般选择处于对数生长期的细胞进行冻存,冻存前一天细胞ZuiHAO进行换液;消化过度也会严重影响细胞冻存后复苏的活率;冻存细胞时为按照温度梯度进行操作,会严重影响细胞活率。
ASH-3细胞类似产品::H-1703细胞、SW756细胞、NCI-H2342细胞
OVCA433细胞类似产品::EC-9706细胞、JCA-1细胞、NCI-H2029细胞
PC3细胞类似产品::MDCK-2细胞、NCI-H1770细胞、NUGC3细胞
T. T细胞类似产品::Experimental Mammary Tumour-6细胞、FDC-P1细胞、HSC-5 [Human skin squamous cell carcinoma]细胞
NCI-H498细胞类似产品::RPE1-hTERT细胞、B16 subline B78细胞、22Rv-1细胞
NCI H82细胞类似产品::SP2/0 Ag-14细胞、SNU668细胞、Clone Y-1细胞
SKMEL3细胞类似产品::H146细胞、NCI-ADR-RES细胞、COV434细胞
TE-13细胞类似产品::Jurkat clone A3细胞、HOS (TE85)细胞、NRK细胞
U-251-MG细胞类似产品::SW-962细胞、RPTEC TERT1细胞、Hs840T细胞
Natural Killer-92细胞类似产品::BrCL15细胞、BEL7405细胞、H-865细胞
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CALU 1细胞类似产品::GM00637I细胞、NCI H226细胞、Hs 695.T细胞
SN4741细胞类似产品::Tb1.Lu细胞、Tn-5细胞、Fetal Human Lens-124细胞
C666-1细胞类似产品::AM细胞、WI-38细胞、AU-Mel细胞
MDA-MB-231-GFP细胞类似产品::EJ细胞、LuCL4细胞、BTI-Tn-5B1-4细胞
GC-1 spg细胞类似产品::NCI-H3255细胞、CHL-CL-11细胞、NMC-G1细胞
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RMS1598细胞类似产品::NCIH1355细胞、T2细胞、Ramos 1细胞
Lewis-Lung细胞类似产品::NCIH187细胞、CCRF细胞、HCC-1954细胞
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CCC-HPF-1细胞类似产品::rHSC-99细胞、COLO-205细胞、U138-MG细胞
TE85细胞类似产品::tdott细胞、NCIH208细胞、Hs 840.T细胞
SK-MES-1细胞类似产品::NEC细胞、SU-86-86细胞、Simpson细胞
MCFs细胞类似产品::HEK (AD293)细胞、PG-4 S+L-细胞、Ramos.G6.C10细胞
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MDA-MB 361细胞类似产品::Roswell Park Memorial Institute 6666细胞、HUASMC细胞、SF-126细胞
NCIH244细胞类似产品::LIPF155C细胞、MF2059细胞、EJ细胞
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U-373-MG细胞类似产品::MC 3T3-E1细胞、WSU-DLCL-2细胞、PANC0327细胞
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HN6细胞类似产品::HPB-ALL细胞、NOZ细胞、MOPC细胞
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H322细胞类似产品::P3-x63-Ag8 653细胞、Jiyoye细胞、293F细胞
CV-1 in Origin Simian-7细胞类似产品::MCF-7/ADR细胞、U937细胞、Vero C1008细胞
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MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞类似产品::MDCKII细胞、NCI-HUT-596细胞、SK-ES细胞
OCM1细胞类似产品::CTV-1细胞、hTERTHME1细胞、CL-11细胞
Nb 2细胞类似产品::3T3F442A细胞、A-549细胞、G401细胞
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LS513细胞类似产品::OCI Ly1细胞、A-10细胞、NCI-H102细胞
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MLO-Y4细胞类似产品::HELF细胞、Hs 832(C).T细胞、Jiyoye (P-2003)细胞
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K299细胞类似产品::CL34细胞、H-2347细胞、NK-92细胞
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WI38细胞类似产品::NCIH748细胞、WC00059细胞、CCRF/CEM-C7细胞
WI38细胞类似产品::NCIH748细胞、WC00059细胞、CCRF/CEM-C7细胞
Hs606细胞类似产品::JHH7细胞、HDMEC细胞、Panc 8.13细胞
MDA-175细胞类似产品::Tn-5细胞、KY180细胞、M4e细胞
M2-10B4:小鼠骨髓纤维原复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
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R2C细胞类似产品::Y3-Ag1,2,3细胞、SW-620细胞、HOP-92细胞
BSC1细胞类似产品::Granta-519细胞、SNU-119细胞、H69/P细胞
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HOP92细胞类似产品::MCF.7细胞、OCI-Ly03细胞、KYSE-270细胞
H4细胞类似产品::M1细胞、RPMI-2650细胞、SNU761细胞
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