"SW1783:人脑星形胶质瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气的,大家争取做到因材施教,比如试试下面的“四步消化法”。(以难消化细胞为例),具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍(目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉)。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况把握)。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HCA7细胞类似产品::CAKI1细胞、H128细胞、Hs-606-T细胞
Hamster Islet Transformed-Tioguanine resistant clone 15细胞类似产品::Hs729T细胞、BMU-S1细胞、Rca-B细胞
MDA231细胞类似产品::JURKAT E-61细胞、Panc813细胞、KU-812细胞
MEG01细胞类似产品::OVCAR4细胞、Hs706T细胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:间变性星形细胞瘤;男性
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细胞形态:上皮细胞样
SNUC2B细胞类似产品::PaTu 8988 S细胞、H-727细胞、C-28/I2细胞
UPCI:SCC090细胞类似产品::alpha-TC1.6细胞、HP615细胞、EFM-19细胞
SU-86-86细胞类似产品::HCA 7细胞、NCIH820细胞、OVCA8细胞
细胞传代培养的胰酶消化法:传代培养:是指细胞从一个培养瓶以1:2或1:2以上的比例转移,接种到另一培养瓶的培养。传代细胞,可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代,部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代,或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤:①入无菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒双手;②倒置显微镜下观察细胞形态,确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液37℃下预热;③超净台台面应整洁,用75%酒精棉球擦拭清洁;④打开超净工作台的紫外灯照射台面20min左右,关闭紫外灯,打开风机清洁空气除去臭氧;⑤点燃酒精灯;取出无菌试管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内;⑥将培养用液瓶口用75%酒精消毒,过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上;⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去残留的就培养基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每个大培养瓶加入1ml胰酶,小培养瓶用量酌减,盖HAO瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶,使细胞脱离胰酶,然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鲜培养基,反复吹打消化HAO的细胞使其脱壁并分散,再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成细胞悬液,然后分装到新培养瓶中。盖HAO瓶盖,适度拧紧后稍回转,以利于CO2的进入,将培养瓶放回CO2培养箱;⑩对悬浮培养细胞,步骤7-9不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清,加入新鲜培养基,然后分装到各瓶中。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁
细胞培养技术也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生物克隆技术来说,细胞培养都是一个必不可少的过程,细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞,这是克隆技术必不可少的环节,而且细胞培养本身就是细胞的克隆。通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。因为生物产品都是从细胞得来,所以可以说细胞培养技术是生物技术中Zui核心、Zui基础的技术。公司是国内Zui大的细胞库之一,迄今为止,细胞收录背景资料清晰,活力状态良HAO的细胞系达1356株,其中大部分是1999年以来从美国ATCC、德国DSMZ和日本RIKEN等分批次引进的细胞系,是全国Zui权威的细胞库,为您实验提供Zui可信赖的细胞。公司立足上海,辐射全国,面向世界,为国内科研细胞实验做绵薄之力。
CAL-62细胞类似产品::mRMEC细胞、KYSE180细胞、HS766T细胞
HOP62细胞类似产品::UM-RC-2细胞、SK-OV-3细胞、Ku812F细胞
MDA-MB-435S细胞类似产品::Hs_578t细胞、EoL-1 cell细胞、G402细胞
HNSC细胞类似产品::HCASMC细胞、MDAMB435S细胞、HEL细胞
U-373 MG细胞类似产品::L-132细胞、Huh7.5.1细胞、GS9L细胞
BEL7405细胞类似产品::GDM1细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞、CAL33细胞
HCO细胞类似产品::SNU368细胞、Wien 133细胞、SJSA-1细胞
RMS1598细胞类似产品::NCIH1355细胞、T2细胞、Ramos 1细胞
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B16BL-6细胞类似产品::MMQ细胞、Ca 9-22细胞、H1755细胞
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H87细胞类似产品::LNCaP-ATCC细胞、HEK293F细胞、RC-2细胞
SW 780细胞类似产品::Hs-695-T细胞、H82sclc细胞、H-1734细胞
H-2110细胞类似产品::RCC 786-O细胞、Hs-729-T细胞、WC00079细胞
NCIH128细胞类似产品::MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞、EBTr (NBL-4)细胞、G361mel细胞
NCI-H295细胞类似产品::NCIH2141细胞、HUC-1细胞、Keio University-19-19细胞
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SKRC-52细胞类似产品::VA-ES-BJ细胞、Ly19细胞、Sci-1细胞
Huh7.5.1细胞类似产品::H716细胞、MM96L细胞、LoMeT-ccRcc细胞
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CPA 47细胞类似产品::HCC1954-BL细胞、CEM T4细胞、FHL-124细胞
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OCI-Ly3细胞类似产品::C8166细胞、WERI-Rb-1细胞、PLA801D细胞
TE-7细胞类似产品::Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞、MGH-UI细胞、H2291细胞
H295细胞类似产品::T173细胞、CMK细胞、KRCY细胞
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NCI-H196细胞类似产品::NIE-115细胞、Centre Antoine Lacassagne-12T细胞、L615细胞
HCT/Taxo1细胞类似产品::NTERA2-D1细胞、RKN细胞、NW-MEL-38细胞
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NCI-H1092细胞类似产品::RPMI 2650细胞、COR-L105细胞、KOSC-2细胞
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Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞类似产品::HeLa S-3细胞、RPMI-8402细胞、G-Olig2细胞
P3X63-Ag8.653细胞类似产品::8226/S细胞、PC14细胞、OV3121细胞
H1672细胞类似产品::MIHA细胞、H-1437细胞、HS-695T细胞
A375-SM细胞类似产品::RT4-D6-P2T细胞、HepG2细胞、NCI-H165细胞
Colon-26细胞类似产品::LN 382细胞、PM6细胞、COLO 357细胞
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Malme3M细胞类似产品::NCIH1993细胞、MDCK2细胞、HEP3B2细胞
HBL-100细胞类似产品::NS-I/1细胞、SKMel-28细胞、Hs27细胞
DoTc2 4510细胞类似产品::COLO201细胞、SACC-83细胞、T-47-D细胞
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ACT-1细胞类似产品::LC-2-Ad细胞、SW1990细胞、H1688细胞
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H2347细胞类似产品::ChaGo-K1细胞、P388细胞、Centre Antoine Lacassagne-148细胞
SV-HUC-1细胞类似产品::Neuro 2a细胞、NCI-UMC-11细胞、NCI-SNU-475细胞
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RS4:11细胞类似产品::PC-3/M细胞、Ramos (RA 1)细胞、COLO-394细胞
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L929(NCTC)细胞类似产品::C-26细胞、GP-293细胞、AHH1细胞
SW1783:人脑星形胶质瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
Hs606T细胞类似产品::FL-83B细胞、H322细胞、HCC2935细胞
Capan 2细胞类似产品::CHO-K1细胞、NCI-H128细胞、ACC-3细胞
786-0细胞类似产品::NCIH716细胞、TOG细胞、NCIH2291细胞
A-375.S2细胞类似产品::LN-229细胞、H35细胞、HCT 15细胞
KE37细胞类似产品::H2107细胞、J111细胞、M14细胞
X63.Ag8.653细胞类似产品::NCIH211细胞、GC9811-P细胞、NCI-BL1339细胞
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