"RPMI-2650:人鼻腔上皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37℃消化。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化HAO了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常HAO,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个性。如果和标准形态不一致,那可能是自己没消化HAO导致的,但如果消化方法正确,仍然成片分布,甚至完全吹打成单细胞悬液,贴壁后仍然成片分布,这是细胞的性,是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布,你的细胞之后会对你越来越不HAO。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HeLa S 3细胞类似产品::YD-38细胞、C2BBe 1细胞、L-363细胞
Hs729细胞类似产品::Panc 08.13细胞、HONE1细胞、MC3T3-E细胞
Fao细胞类似产品::RPMI #8226细胞、Keio University-19-19细胞、BEL 7402细胞
HUT 125细胞类似产品::LTEP a2细胞、TPC1细胞、SW260细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:头颈鳞癌;胸腔积液转移;男性
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细胞形态:上皮细胞样
CEMC7细胞类似产品::HPDLF细胞、Jijoye细胞、H.Ep. #2细胞
Hepatoma 22细胞类似产品::GM03190A细胞、NCI-H1563细胞、OCILY-19细胞
766T细胞类似产品::EnCa1细胞、ABC-1细胞、RS4-11细胞
培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制HAO的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋HAO冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做HAO标记;6)冻存:在殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10/ml数量。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁
细胞培养技术也叫细胞克隆技术,在生物学中的正规名词为细胞培养技术。不论对于整个生物工程技术,还是其中之一的生物克隆技术来说,细胞培养都是一个必不可少的过程,细胞培养本身就是细胞的大规模克隆。细胞培养技术可以由一个细胞经过大量培养成为简单的单细胞或极少分化的多细胞,这是克隆技术必不可少的环节,而且细胞培养本身就是细胞的克隆。通过细胞培养得到大量的细胞或其代谢产物。因为生物产品都是从细胞得来,所以可以说细胞培养技术是生物技术中Zui核心、Zui基础的技术。公司是国内Zui大的细胞库之一,迄今为止,细胞收录背景资料清晰,活力状态良HAO的细胞系达1356株,其中大部分是1999年以来从美国ATCC、德国DSMZ和日本RIKEN等分批次引进的细胞系,是全国Zui权威的细胞库,为您实验提供Zui可信赖的细胞。公司立足上海,辐射全国,面向世界,为国内科研细胞实验做绵薄之力。
NCI-H209细胞类似产品::RA.1细胞、H1693细胞、KBM-7细胞
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RPMI-2650:人鼻腔上皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
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