"SIRC:兔角膜上皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37℃消化。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化HAO了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常HAO,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个性。如果和标准形态不一致,那可能是自己没消化HAO导致的,但如果消化方法正确,仍然成片分布,甚至完全吹打成单细胞悬液,贴壁后仍然成片分布,这是细胞的性,是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布,你的细胞之后会对你越来越不HAO。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
F-36P细胞类似产品::Hepa 1-6细胞、NB9细胞、PLMVEC细胞
EBC-1细胞类似产品::HCMEC细胞、Institute for Medical Research-32细胞、NCI-H650细胞
IOSE-80细胞类似产品::mouse Inner Medullary Collecting Duct-3细胞、LO2细胞、H1781细胞
DMS 153细胞类似产品::Hs852T细胞、CHO细胞、T/G HA VSMC细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:角膜;上皮细胞
SIRC:兔角膜上皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
CCD18Co细胞类似产品::HLE B-3细胞、NCI-H1385细胞、HBL 100细胞
HCC1569细胞类似产品::MC57细胞、UPCI-SCC-154细胞、SU86-86细胞
BE(2)-C细胞类似产品::NCI-H209细胞、MESSA/Dx5细胞、COLO679细胞
细胞传代培养的胰酶消化法:传代培养:是指细胞从一个培养瓶以1:2或1:2以上的比例转移,接种到另一培养瓶的培养。传代细胞,可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代,部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代,或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤:①入无菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒双手;②倒置显微镜下观察细胞形态,确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液37℃下预热;③超净台台面应整洁,用75%酒精棉球擦拭清洁;④打开超净工作台的紫外灯照射台面20min左右,关闭紫外灯,打开风机清洁空气除去臭氧;⑤点燃酒精灯;取出无菌试管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内;⑥将培养用液瓶口用75%酒精消毒,过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上;⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去残留的就培养基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每个大培养瓶加入1ml胰酶,小培养瓶用量酌减,盖HAO瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶,使细胞脱离胰酶,然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鲜培养基,反复吹打消化HAO的细胞使其脱壁并分散,再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成细胞悬液,然后分装到新培养瓶中。盖HAO瓶盖,适度拧紧后稍回转,以利于CO2的进入,将培养瓶放回CO2培养箱;⑩对悬浮培养细胞,步骤7-9不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清,加入新鲜培养基,然后分装到各瓶中。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
SIRC:兔角膜上皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
JROECL 21细胞类似产品::KATOIII细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231细胞、MeT5A细胞
HCC1954-BL细胞类似产品::HEK-A细胞、SK-MEL-3细胞、MyLa 2059细胞
NG108-15细胞类似产品::MRAEC细胞、Centre Antoine Lacassagne-78细胞、AA-Mel细胞
Hs832T细胞类似产品::PA I细胞、SCL I细胞、mIMCD-3细胞
MHCC97L细胞类似产品::MESSADX5细胞、COLO 741细胞、CEM-C7细胞
McCoy B细胞类似产品::SNU16细胞、NCIH1373细胞、BEL-7405细胞
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DU 4475细胞类似产品::WRL68细胞、32D.cl3细胞、K562/ADR细胞
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Danio rerio Gill细胞类似产品::SKG-3a细胞、343MG细胞、FHs74Int细胞
HO-8910 PM细胞类似产品::CL-40细胞、H-2227细胞、NCI-H345细胞
SKNBE(2)细胞类似产品::786-0WT细胞、HEL细胞、MDCK-2细胞
87MG细胞类似产品::BJA-B-1细胞、SK-RC 42细胞、GA10细胞
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ASH3细胞类似产品::University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞、MM1细胞、NCTC-929细胞
HCT/FU细胞类似产品::Hs 27细胞、Panc-1-P细胞、HUVSMC细胞
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U-87 MG细胞类似产品::LAC细胞、L-6TG细胞、ST 486细胞
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KMS-11细胞类似产品::NOR10细胞、NCIH2106细胞、BT细胞
SIRC:兔角膜上皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞类似产品::MDCKII细胞、NCI-HUT-596细胞、SK-ES细胞
HFLS-RA细胞类似产品::Evsa-T细胞、J774 A.1细胞、RAW 264.7细胞
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C28/I2细胞类似产品::CHO/dhFr-细胞、Hos TE-85细胞、526 mel细胞
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MDA-MB231细胞类似产品::SF-126细胞、NCI-H1184细胞、TW-039细胞
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JROECL 21细胞类似产品::KATOIII细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231细胞、MeT5A细胞
MC-3T3细胞类似产品::CESS细胞、A-172MG细胞、RFL 6细胞
NCIH889细胞类似产品::LS180细胞、SK-HEP-1细胞、FHL 124细胞
Mesothelial cells transfected with pRSV-T 5A细胞类似产品::H128细胞、HASMC细胞、NCI-H1299细胞
FL-83B细胞类似产品::SW954细胞、Hi-5细胞、MDA175细胞
Hmy.2 CIR细胞类似产品::Balb/c3T3细胞、NE1细胞、KYSE 450细胞
HTR8/SVneo细胞类似产品::COS7细胞、P19细胞、Hela-Ap-1细胞
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NCIH2342细胞类似产品::RTMC细胞、ssMCF-7细胞、CAL148细胞
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ATC241细胞类似产品::HT 1080.T细胞、CA922细胞、MDBK细胞
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Hs832T细胞类似产品::PA I细胞、SCL I细胞、mIMCD-3细胞
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NG108-15细胞类似产品::MRAEC细胞、B16-F10-BL6细胞、NCIH1651细胞
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LNCaP-C4-2细胞类似产品::C6细胞、QGY细胞、HT29细胞
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C-Lu-65细胞类似产品::CMT-167细胞、AU565细胞、RH7777细胞
LM6细胞类似产品::NFS 60细胞、NCI-H735细胞、P30-OHKUBO细胞
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HP615细胞类似产品::Panc 8.13细胞、HPASMC细胞、PIG1细胞
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DHL10细胞类似产品::H1793细胞、TB-1 Lu细胞、32D CL3细胞
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RT 112细胞类似产品::PLC/PRF5细胞、H-2291细胞、KYSE0520细胞
SIRC:兔角膜上皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
SHP77细胞类似产品::HS-683细胞、PFSK细胞、TE-10细胞
293细胞类似产品::NPA87细胞、HT-144细胞、A875细胞
TE-4细胞类似产品::GOS-3细胞、Hs 675.T细胞、SNT-8细胞
L615细胞类似产品::GM02132C细胞、KOSC-2细胞、Earles's cells细胞
HUCEC细胞类似产品::RKO细胞、SUD-4细胞、HT-29/CX-1细胞
MBVP细胞类似产品::COLO-16细胞、Human Corneal Endothelial Cells-12细胞、SK-N-DZ细胞
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