"NCI-H187:人视网膜母细胞瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
冻存和复苏的原则:慢冻快融》当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升GAO,并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序:采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时,1~2℃/min;当温度达-25℃以下时,5~10℃/min;当温度达-100℃时,可迅速放入液氮中。2.简易程序:将冷冻管(管口要朝上)放入纱布袋内,纱布袋系以线绳,通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口,按每分钟温度下降1~2℃的速度,在40min内降至液氮表面过夜,次晨投人液氮中。3.传统程序:冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。细胞冻存方法:1.预先配制冻存液》(1)8%DMSO+细胞生长液(92%血清)2.取对数生长期细胞,经胰酶消化后,加入适量冻存液,用吸管吹打制成细胞悬液(1×10(6)~5×10(6)细胞/ml)。3.加入1ml细胞于冻存管中,密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法:1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,轻轻摇动冷冻管,使其在1分钟内全部融化(不要超过3分钟)。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养,24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液,以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂,然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
OCM1A细胞类似产品::686LN-M4e细胞、C-Lu-65细胞、HUT 226细胞
Calu 3细胞类似产品::MV-1-Lu细胞、SW780细胞、RT4-D6-P2T细胞
MES 13细胞类似产品::MCA38细胞、HLEB-3细胞、SUM 149PT细胞
Mono Mac 6细胞类似产品::CCD-841CoN细胞、Walker-Ca.256细胞、Hs 578Bst细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:经典小细胞肺癌;胸腔积液转移;男性
NCI-H187:人视网膜母细胞瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
SUM-52PE细胞类似产品::GM01232E细胞、LLC-PK1细胞、U-226AR1细胞
L(TK-)细胞类似产品::MC57G细胞、SUNE-1细胞、RKO-AS-45-1细胞
GM02219细胞类似产品::KMY1022细胞、KP-2细胞、MDA 231-LM2-4175细胞
购买细胞注意事项:1)收到细胞后首先观察细胞瓶是否完HAO,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系;2)仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等;3)用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次;4)建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。【细胞传代操作步骤】一、贴壁细胞传代:1)提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内;2)吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞;3)加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用;4)用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡;5)将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。二、悬浮细胞传代:1)将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min;2)弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液;3)将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
NCI-H187:人视网膜母细胞瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:悬浮
细胞传代后放入培养箱没有摇匀,或者放入时摇匀,但在细胞贴壁前,又移动了培养瓶,频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少,培养箱搁板表面不平整,这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象,大部分悬浮细胞在细胞密度很GAO的情况下,很可能会出现部分细胞抱团生长的现象,聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物,殃及周围的悬浮细胞,因此在培养悬浮细胞时需控制HAO细胞密度。如果出现了细胞团,可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团,也可以尝试一下方法:将细胞悬液收集到15ml离心管中,静置20min左右,小心取上层细胞上清培养(该方法只能去除部分较大的细胞团)。部分细胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐药株等),这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡,则很可能是细胞状态不佳,可以通过调整血清浓度,控制消化,控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态;如果大部分细胞出现空泡,且单个细胞内空泡数目偏多,则可能细胞代次较GAO,细胞老化所致,需更换代次较早的细胞。
Immortal Pig Intestinal-2I细胞类似产品::CHO Lec1细胞、LM TK negative细胞、Centre Antoine Lacassagne-27细胞
University of Arizona Cell Culture-893细胞类似产品::GM2132细胞、SKBr3细胞、Sp2/O细胞
COS1细胞类似产品::Pa14C细胞、H-1373细胞、YT细胞
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NCI-H508细胞类似产品::293-H细胞、NCI660细胞、JVM3细胞
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NCIH2009细胞类似产品::FD-LSC-1细胞、CCD1095Sk细胞、CT26.WT细胞
Hs839T细胞类似产品::U-87MG ATCC细胞、PANC0203细胞、SK-Hep1细胞
CCLP1细胞类似产品::HS0578T细胞、P3X63-Ag8.653细胞、F442-A细胞
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MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞类似产品::SHP-77细胞、JF305细胞、SKMEL28细胞
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OCI/AML-5细胞类似产品::EC-GI-10细胞、253J-Bladder-V细胞、MHCC97-H细胞
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Caco-2 BBe细胞类似产品::RPMI 6666细胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞、Colo-678细胞
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SUM52PE细胞类似产品::AtT-20细胞、451Lu细胞、JM1细胞
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L5178Y TK+/-3.7.2c细胞类似产品::293S细胞、A375mel细胞、H4IIEC3细胞
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NCI-SNU-1040细胞类似产品::DHL-2细胞、NIE 115细胞、H-1417细胞
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MOLP8细胞类似产品::D341MD细胞、LX-2细胞、McCoy B细胞
H-1954细胞类似产品::OV 1063细胞、ZR75_1细胞、C-Lu65细胞
H1573细胞类似产品::HUT 125细胞、OSK-1细胞、NK-10A细胞
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