"MDA-MB-435:人乳腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长：贴壁
冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升GAO，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
HCC0070细胞类似产品：：NCIH1395细胞、TO 175.T细胞、DHL-16细胞
Lu-65细胞类似产品：：LO2细胞、NCIH661细胞、MDAMB175细胞
KYSE70细胞类似产品：：TF-1细胞、H-1838细胞、52PE细胞
GC-2spd(ts)细胞类似产品：：Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞、TMD8细胞、SKNBE-1细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
细胞背景资料：乳腺癌
MDA-MB-435:人乳腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态：上皮细胞样
SK MEL 5细胞类似产品：：OVCA 420细胞、AKR细胞、Case 3细胞
SCC25细胞类似产品：：Hs-940细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞、P3-Jiyoye细胞
CAKI.1细胞类似产品：：SK-ChA1细胞、NKM1细胞、HGMC细胞
细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以１：２或１：２以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液３７℃下预热；③超净台台面应整洁，用７５%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面２０min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用７５%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入１ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖HAO瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化HAO的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖HAO瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO２的进入，将培养瓶放回CO２培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤７-９不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
MDA-MB-435:人乳腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性：贴壁
贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。
HCC-2218细胞类似产品：：WRL 68细胞、SCC4细胞、RT-BM 1细胞
Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1细胞类似产品：：Hs600T细胞、NCI-SNU-182细胞、NRK clone 52E细胞
SKRC-52细胞类似产品：：VA-ES-BJ细胞、Ly19细胞、Sci-1细胞
Me Wo细胞类似产品：：MDAMB453细胞、SUM 159PT细胞、SW 1417细胞
SKOV3细胞类似产品：：MDA 1386细胞、3T3-L1细胞、SW-1088细胞
H-1793细胞类似产品：：ECC-10细胞、Swiss 3T6细胞、SCC-25细胞
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Mouse podocyte细胞类似产品：：PANC 813细胞、MEC-1细胞、L5178Y-R细胞
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MN 60细胞类似产品：：NCI-H719细胞、639-V细胞、MZCRC1细胞
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MDA-435细胞类似产品：：GA-10 (Clone 4)细胞、SK-RC-20细胞、F-36P细胞
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Jurkat clone A3细胞类似产品：：LL/2 (LLC1)细胞、RTMC细胞、RIN m5F细胞
L-M(TK-)细胞类似产品：：GB-1细胞、BALB/3T3细胞、KMM1细胞
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Turbot Embryonic Cell line细胞类似产品：：RAOEC细胞、SKNEP细胞、Caco-2/BBe细胞
Turbot Embryonic Cell line细胞类似产品：：RAOEC细胞、SKNEP细胞、Caco-2/BBe细胞
DHL8细胞类似产品：：Rat Chondrosarcoma Swarm细胞、Hu-P-T4细胞、SBC5细胞
NuTu 19细胞类似产品：：RGE细胞、PT-K75细胞、HB611细胞
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TN5B14细胞类似产品：：MV4;11细胞、SKES-1细胞、F56 [Human neoplasm]细胞
L929细胞类似产品：：NCI-H1792细胞、HuCC-T1细胞、293 EBNA细胞
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Nb 2细胞类似产品：：3T3F442A细胞、A-549细胞、G401细胞
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DMS-273细胞类似产品：：Hs840_T细胞、2780细胞、201T细胞
MDA-MB-157细胞类似产品：：A 172细胞、KGN细胞、LOUNH91细胞
alphaTC1 Clone 6细胞类似产品：：CCRF.CEM细胞、HBE135-E6E7细胞、ZR-75-1细胞
Anip[973]细胞类似产品：：B16BL6细胞、WTRL1细胞、293-EBNA细胞
Sarcoma OSteogenic-2细胞类似产品：：8305C_1细胞、MZ-CRC-1细胞、MC116细胞
MDA-MB-435:人乳腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
HEK293细胞类似产品：：U-343-MG细胞、HIMEC细胞、Murine Carcinoma-38细胞
KYSE70细胞类似产品：：TF-1细胞、H-1838细胞、52PE细胞
MAD109细胞类似产品：：Karpas422细胞、S16细胞、Hs-940细胞
LYR细胞类似产品：：SU-DHL6细胞、XuanWei Lung Cancer-05细胞、HSC6细胞
MPP 89细胞类似产品：：KY180细胞、Sp 2/0-Ag 14细胞、INS1细胞
ECC 12细胞类似产品：：GC-2细胞、J774细胞、3T3 J2细胞
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