"McA-RH7777:大鼠肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气的,大家争取做到因材施教,比如试试下面的“四步消化法”。(以难消化细胞为例),具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍(目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉)。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况把握)。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
TE671细胞类似产品::AU-Mel细胞、SK.MEL.28细胞、Y3.AG.1.2.3细胞
RWPE1细胞类似产品::Walker-256细胞、mIMCD3细胞、P3-X63-Ag8.653细胞
C-Lu65细胞类似产品::MOLP-2细胞、RCC10细胞、NCIH2009细胞
YTMLC-90细胞类似产品::ONS76细胞、CEM.C1细胞、Transformed C3H Mouse Kidney-1细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:肝癌;雌性;Buffalo
McA-RH7777:大鼠肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
H-1930细胞类似产品::PaCa2细胞、HS-294-T细胞、253J-BV细胞
HCT-15细胞类似产品::HEK293E细胞、J-82细胞、U373 MG细胞
LUDLU1细胞类似产品::OCILY3细胞、CT-26 WT细胞、K562细胞
购买细胞注意事项:1)收到细胞后首先观察细胞瓶是否完HAO,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系;2)仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等;3)用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次;4)建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。【细胞传代操作步骤】一、贴壁细胞传代:1)提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内;2)吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞;3)加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用;4)用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡;5)将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。二、悬浮细胞传代:1)将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min;2)弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液;3)将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
McA-RH7777:大鼠肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
SNU601细胞类似产品::KYSE0030细胞、WiDr-TC细胞、KPNRTBM1细胞
DU 4475细胞类似产品::WRL68细胞、32D.cl3细胞、K562/ADR细胞
RAMSCs细胞类似产品::H920细胞、DHL-6细胞、A3细胞
H378细胞类似产品::McA-RH 8994细胞、H-929细胞、293H细胞
Sp 2/0-Ag 14细胞类似产品::SHP77细胞、MC3T3E1细胞、MX1细胞
NCI-H2286细胞类似产品::SBC-5细胞、OVCAR.4细胞、NTera2/D1细胞
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RMS13细胞类似产品::WM115-mel细胞、P3 NS1 Ag4细胞、SP2细胞
NCI-H2085细胞类似产品::L-6细胞、H-7721细胞、HT55细胞
Caco-2/BBe 1细胞类似产品::SW620细胞、RA-FLSs细胞、SK HEP-1细胞
SNU-520细胞类似产品::H-1648细胞、H-460细胞、TE-3A细胞
B16F10细胞类似产品::CFPAC细胞、SupB15WT细胞、NB1RGB细胞
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P3.NS-1/1.Ag4.1细胞类似产品::BJAB细胞、SKUT1细胞、B16F1细胞
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MLTC-1细胞类似产品::MV3细胞、HemECs细胞、SK N SH细胞
Hs 852.T细胞类似产品::IR 983F细胞、HS852.T细胞、NTC-200细胞
UMR106细胞类似产品::TGW-nu细胞、Panc203细胞、Mouse INsulinoma 6细胞
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TE-7细胞类似产品::Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞、MGH-UI细胞、H2291细胞
PK(15)细胞类似产品::SW403细胞、T/G HA-VSMC细胞、BGC823细胞
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AQ-Mel细胞类似产品::SUM149PT细胞、NCI522细胞、Jurkat E6.1细胞
NCIH1395细胞类似产品::C2-C12细胞、MH-S细胞、BJAB-1细胞
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GL-261细胞类似产品::Hs-746T细胞、NCI-H1623细胞、CCLP-1细胞
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NF639细胞类似产品::MKN74细胞、MDAPCa-2b细胞、SJRH 30细胞
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PANC 203细胞类似产品::TE4细胞、WEHI-3细胞、L-WRN细胞
CHO Lec1细胞类似产品::Caco-2/BBe细胞、Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞、A375S2细胞
SNU-387细胞类似产品::H-1395细胞、NCIH1105细胞、UMNSAH/DF#1细胞
MILE SVEN 1细胞类似产品::AN3 CA细胞、Ha Fe细胞、GM04154细胞
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H-87细胞类似产品::Panc813细胞、CCD33Co细胞、FHs74 Int细胞
Human ErythroLeukemia细胞类似产品::EBC-1细胞、293AD细胞、HMCB细胞
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HEP3B2细胞类似产品::Hos TE-85细胞、H647细胞、HMSC细胞
HCC-1359细胞类似产品::SUM-159PT细胞、NIH:OVCAR-4细胞、Karpas-299细胞
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Reh细胞类似产品::CA922细胞、BT-474细胞、FHs74 Int细胞
HRA19细胞类似产品::UMNSAH-DF1细胞、SW-1463细胞、IGROV1细胞
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Mouse podocyte细胞类似产品::PANC 813细胞、MEC-1细胞、L5178Y-R细胞
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RH8994细胞类似产品::SVGp12细胞、Opossum Kidney细胞、NCI-H3255细胞
HPDE细胞类似产品::PC2细胞、CTSC-3细胞、P3X63 AG 8.653细胞
RIN-14B细胞类似产品::Uhth-74细胞、TE11细胞、TE10细胞
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JB-6 Cl 30细胞类似产品::U-343 MG细胞、EC-109细胞、V79细胞
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C1498细胞类似产品::EB-3细胞、BJA-B1细胞、Mono Mac 1细胞
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HT-3细胞类似产品::TE353.SK细胞、SK-N-BE2细胞、WM-239细胞
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H-2347细胞类似产品::Anglne细胞、WM-239细胞、TCC Sup细胞
NCIH2066细胞类似产品::CAL-62细胞、hTERT-HME-1细胞、SUDHL10细胞
9L细胞类似产品::ZYM-DIEC02细胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells细胞、HCC1008细胞
343 MG细胞类似产品::SUD6细胞、alpha-TC1.6细胞、H-747细胞
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Hs 766细胞类似产品::SUM52PE细胞、A172细胞、HF-91细胞
NCIH1385细胞类似产品::P 815细胞、NCI H345细胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞
NCIH1385细胞类似产品::P 815细胞、NCI H345细胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞
KP-N-RT细胞类似产品::NCIH1563细胞、Ca-Ski细胞、HG2855细胞
CCRF/CEM/0细胞类似产品::H9c2(2-1)细胞、HCC-1419细胞、H661细胞
McA-RH7777:大鼠肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
Hs343T细胞类似产品::Colon 26细胞、HPDLF细胞、FAO-1细胞
HT clone H9细胞类似产品::AsPC-1细胞、KU-19-19细胞、NCI-H2081细胞
S.B.细胞类似产品::BEL7402细胞、HEK-293-EBNA细胞、DU 145细胞
BNL-CL.2细胞类似产品::NW-MEL-38细胞、HSF细胞、P31-FUJ细胞
VAESBJ细胞类似产品::ELD-1细胞、NCI-H322T细胞、MyLa2059细胞
SNU-475细胞类似产品::SuDHL 10细胞、TF-1a细胞、SuDHL 10细胞
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