"OVCA420:人卵巢癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
有一些细胞是数量多一点比较HAO生长,生长状态也比较HAO。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较HAO,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较HAO。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不HAO的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不HAO,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞建议只吹打,不消化)其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得HAO的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SNU475细胞类似产品::NCIH661细胞、BEL7402细胞、SJRH30细胞
COLO-HSR细胞类似产品::H.Ep. #2细胞、HOC1细胞、rRTEC细胞
HFL细胞类似产品::HeLaS3细胞、hTERT RPE-1细胞、SKLU-1细胞
NCI-SNU-387细胞类似产品::Scott and White No. 13细胞、SK-BR-3细胞、Y1细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:卵巢癌;女性
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细胞形态:上皮细胞样
TE-7细胞类似产品::Human Intestinal Epithelial Cell-6细胞、MGH-UI细胞、H2291细胞
C4-1细胞类似产品::IOSE80UBC细胞、HeLa S 3细胞、COR-L88细胞
LN382细胞类似产品::526mel细胞、PL5细胞、GC1-SPG细胞
培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制HAO的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋HAO冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做HAO标记;6)冻存:在殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10/ml数量。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁
细胞传代后放入培养箱没有摇匀,或者放入时摇匀,但在细胞贴壁前,又移动了培养瓶,频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少,培养箱搁板表面不平整,这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象,大部分悬浮细胞在细胞密度很GAO的情况下,很可能会出现部分细胞抱团生长的现象,聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物,殃及周围的悬浮细胞,因此在培养悬浮细胞时需控制HAO细胞密度。如果出现了细胞团,可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团,也可以尝试一下方法:将细胞悬液收集到15ml离心管中,静置20min左右,小心取上层细胞上清培养(该方法只能去除部分较大的细胞团)。部分细胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐药株等),这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡,则很可能是细胞状态不佳,可以通过调整血清浓度,控制消化,控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态;如果大部分细胞出现空泡,且单个细胞内空泡数目偏多,则可能细胞代次较GAO,细胞老化所致,需更换代次较早的细胞。
HaCaT细胞类似产品::HO-1-N-1细胞、Be Wo细胞、MGSMC细胞
MDA-MB468细胞类似产品::MDA MB 453细胞、A375S2细胞、U-343MG细胞
RWPE2细胞类似产品::Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞、DMS 153细胞、SCLC21H细胞
J774A1细胞类似产品::H676细胞、OVCAR 432细胞、CaEs17细胞
LS 1034细胞类似产品::MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)细胞、LY细胞、OVCA 433细胞
A549细胞类似产品::D-341Med细胞、38C13细胞、CATHa细胞
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Hut292细胞类似产品::H650细胞、GM3569细胞、H-841细胞
HSC5细胞类似产品::SW 900细胞、AR42J细胞、H-510A细胞
MHCC-97细胞类似产品::U-343细胞、LL2细胞、PTK-1细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞类似产品::GLRK 13细胞、EJ1细胞、HTR-8/SVneo细胞
NCC-IT细胞类似产品::NCI-H2198细胞、MGHU1细胞、SUP-T1细胞
CCD-841CoTr细胞类似产品::Fao细胞、NuTu 19细胞、UPCI-SCC-090细胞
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HEP-3B2细胞类似产品::CNE-2Z细胞、OCLY8细胞、KMM-1细胞
Hs 839.T细胞类似产品::NCI-H661细胞、HEK 293细胞、HEK293-A细胞
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PANC-08-13细胞类似产品::SUM102细胞、JROECL21细胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
细胞
A-20细胞类似产品::EFM192A细胞、NPA 87细胞、SN4741细胞
LM TK negative细胞类似产品::SW1088细胞、P3J细胞、HR1K细胞
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NBLAN5T细胞类似产品::KFB细胞、HEL-299细胞、CEK细胞
NBL_S细胞类似产品::KCL22细胞、HEK.EBNA细胞、Ocular Choroidal Melanoma-1细胞
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Hep-G2/C3A细胞类似产品::alpha TC1-6细胞、BJA-B-1细胞、aTC1-6细胞
FHL-124细胞类似产品::SK-MEL3细胞、SkChA-1细胞、LUDLU1细胞
Bovine ENDometrial cells细胞类似产品::N9细胞、MDA-MB-134-VI细胞、CF Pac1细胞
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COLO680N细胞类似产品::CCC-HSF-1细胞、SNU182细胞、LS411N细胞
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TE-6细胞类似产品::SK MEL 28细胞、MFC细胞、REC-1细胞
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Hs 695T细胞类似产品::P3/NS1/1-Ag4-1细胞、BE(2)C细胞、OVCAR 8细胞
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E0771细胞类似产品::Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞、BC-3-H-I细胞、kms 11细胞
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COLO 357细胞类似产品::MB-49细胞、PC 61-5-3细胞、AR42J细胞
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McA-RH 7777细胞类似产品::H157细胞、Gerner 7666细胞、COR-L279细胞
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GTL 16细胞类似产品::FO [Mouse myeloma]细胞、UPCISCC154细胞、MDAMB436细胞
MOLM-13细胞类似产品::NCI N87细胞、Sol8细胞、WEHI3B细胞
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NCI-H1650细胞类似产品::P30/0HK细胞、Normal fibroblast-10细胞、SKRC-42细胞
CoC1细胞类似产品::D324细胞、L540细胞、74Int细胞
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RPTEC/TERT1细胞类似产品::PTK-2细胞、H1819细胞、NT2细胞
OVCA420:人卵巢癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
SNU368细胞类似产品::NB-4细胞、GM02219细胞、Detroit562细胞
GM16136细胞类似产品::RGM1细胞、MUS-M1细胞、C3H10T1-2细胞
T2 (174 x CEM.T2)细胞类似产品::Bowes melanoma cells细胞、NCIH2347细胞、GP2d细胞
SK-RC 42细胞类似产品::SW 13细胞、Hs 870.T细胞、USMC细胞
Adeno-293细胞类似产品::VMRC-LCD细胞、TSCC1细胞、8402细胞
KMB17细胞类似产品::Verda reno细胞、CNE-2Z细胞、801-D细胞
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