"SSP-25:人肝胆管癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
有一些细胞是数量多一点比较HAO生长,生长状态也比较HAO。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较HAO,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较HAO。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不HAO的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不HAO,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞建议只吹打,不消化)其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得HAO的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
Human Foreskin Fibroblast细胞类似产品::STC-1细胞、LoMeT-ccRcc细胞、H-1882细胞
H-1694细胞类似产品::HEL 92.1.7细胞、526-mel细胞、SKMEL-2细胞
H23细胞类似产品::EC-GI细胞、HUSMC细胞、2T细胞
Be-Wo细胞类似产品::BC-022细胞、SIRC细胞、3T3(A31)细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:肝内胆管癌;女性
SSP-25:人肝胆管癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
SK-N-BE-2c细胞类似产品::H-1915细胞、Human Foreskin Fibroblast细胞、ABC-1细胞
MCF7-GFP细胞类似产品::P3/NS-1细胞、SW 1353细胞、CCRF-CEM C1细胞
HME1细胞类似产品::MC 116细胞、LNCaP clone FGC细胞、NCIH1666细胞
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升GAO到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
H-1930细胞类似产品::PaCa2细胞、HS-294-T细胞、253J-BV细胞
PANC403细胞类似产品::MFM223细胞、Hs294T细胞、H-929细胞
LWnt-3A细胞类似产品::A549 ATCC细胞、Epstein-Barr-3细胞、DMS 114细胞
U-118 MG细胞类似产品::DH82细胞、NTHY-ORI3.1细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞
DoHH2细胞类似产品::VMRCRCZ细胞、KYSE 180细胞、H-2291细胞
SN12CPM6细胞类似产品::SV40-HCEC细胞、COLO 320HSR细胞、Hs-274-T细胞
NTERA2细胞类似产品::NBL-4细胞、NK-92 MI细胞、SW 1353细胞
Pa017C细胞类似产品::PLA802细胞、CWR22Rv1细胞、Li-7细胞
NuTu 19细胞类似产品::RGE细胞、PT-K75细胞、HB611细胞
VM-CUB-1细胞类似产品::BT-483细胞、SF-126细胞、AU565细胞
COLO 684细胞类似产品::NCI-SNU-620细胞、AtT-20细胞、SKMEL2细胞
A375-SM细胞类似产品::RT4-D6-P2T细胞、HepG2细胞、NCI-H165细胞
Fortner's melanotic melanoma #3细胞类似产品::C4I细胞、AR4-IP细胞、NCI-H2347细胞
CHG-5细胞类似产品::SW1573细胞、A375.S2细胞、CL 1-5细胞
MT-3 [Human leukocytes]细胞类似产品::PAMC82细胞、Hs 729T细胞、RPMI 8226/S细胞
LS-411细胞类似产品::H1693细胞、MC3T3-E1 Subclone 14细胞、OVCA433_Bast细胞
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SUM-190PT细胞类似产品::SK-N-F1细胞、Calu-1细胞、CWR22-R1细胞
G519细胞类似产品::NCI H747细胞、OVCAR-432细胞、GTL 16细胞
UPCI-SCC-90细胞类似产品::OCI AML4细胞、SU-DHL-10细胞、HCCC-9810细胞
M-NFS-60细胞类似产品::ACC-2细胞、EOL1细胞、Caco-2 BBe细胞
C3H/10T1/2细胞类似产品::JIMT-1细胞、SF763细胞、RTMC细胞
K1细胞类似产品::McCoy B细胞、PLA-802细胞、PNEC30细胞
Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞类似产品::THP 1细胞、IGR-OV1细胞、BHK-21细胞
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HPAF II细胞类似产品::MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞、Caki-1细胞、NUGC2细胞
NCI-SNU-668细胞类似产品::B16-BL6细胞、PATU-S细胞、L2细胞
NIH-3T3-L1细胞类似产品::Sup T-1细胞、B4G12细胞、RM1细胞
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Vero C1008细胞类似产品::COLO 206F细胞、SU 86.86细胞、TW01细胞
ACHN细胞类似产品::HCV 29细胞、BrCL18细胞、MDA-MB-468细胞
SW-756细胞类似产品::CD-18细胞、H250细胞、PTK2细胞
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HOC1细胞类似产品::LIXC-002细胞、H1092细胞、OVCA420细胞
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PL 5细胞类似产品::U 266细胞、HT144-mel细胞、D10.G4.1细胞
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1.1B4细胞类似产品::LN-18细胞、GM637A细胞、Human Kidney-2细胞
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NuTu 19细胞类似产品::RGE细胞、PT-K75细胞、HB611细胞
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MC3T3-E1(C4)细胞类似产品::FHCRC subclone 11细胞、MRC 5细胞、NRK 49F细胞
LWnt-3A细胞类似产品::A549 ATCC细胞、RGCs细胞、UWB1.289+BRCA1细胞
Scott and White No. 13细胞类似产品::NCI-H735细胞、MCF-7ADR细胞、NCIH740细胞
H-1672细胞类似产品::PC3M细胞、Calu-3细胞、SK MEL 28细胞
SGC996细胞类似产品::HEI-193细胞、HDF-a细胞、SNU-407细胞
T-47D细胞类似产品::149 PT细胞、HT115细胞、BCaP-37细胞
Hs 729.T细胞类似产品::H-820细胞、KYSE-50细胞、WM115mel细胞
OCI-LY-3细胞类似产品::MEC-1细胞、SKml2细胞、HIT细胞
LC-1Sq细胞类似产品::NCIH2172细胞、Hs 281.T细胞、Ramos G6.C10细胞
CBRH7919细胞类似产品::CHP100细胞、MDA-PCa-2b细胞、BT 325细胞
HK-2 [Human kidney]细胞类似产品::University of Arizona Cell Culture-812细胞、KBM-7/Hap8细胞、H-522细胞
L-5178-Y细胞类似产品::Clone 929细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、GM03569D细胞
RT4-D6-P2T细胞类似产品::CAKI.1细胞、H-2196细胞、AR-42J细胞
MC3T3-E1 Subclone 14细胞类似产品::P3/X63/Ag8.653细胞、FLS细胞、DMS 53细胞
Hs-600-T细胞类似产品::H-1781细胞、TMK1细胞、FM88细胞
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T HEECs细胞类似产品::N1E-115细胞、NALM 6细胞、SHG-44细胞
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huH 1细胞类似产品::Lewis lung carcinoma细胞、D283 Med细胞、343MG细胞
MAVER细胞类似产品::HuH 6细胞、FL-83B细胞、P3.NS-1/1.Ag4.1细胞
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VA-ES-BJ细胞类似产品::SK-Col-1细胞、SW480细胞、H.Ep. No. 2细胞
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MOLT 4细胞类似产品::NCI-H676B细胞、NBLAN5T细胞、TMK-1细胞
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WM 239A细胞类似产品::WEHI 164 TC细胞、NCI-H1672细胞、JHH-2细胞
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SSP-25:人肝胆管癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
Institute for Medical Research-32细胞类似产品::MDA-415细胞、HCC1187细胞、COLO357细胞
HIEC细胞类似产品::Hs 600.T细胞、DoHH-2细胞、CCRF.CEM细胞
Hs863T细胞类似产品::NCIH1836细胞、LC-1细胞、RDES-1细胞
OCI AML4细胞类似产品::CCRF细胞、H-1770细胞、T-HEECs细胞
EVSA/T细胞类似产品::OCI/AML-5细胞、NCI-H196细胞、A9细胞
H1341细胞类似产品::T47D:A细胞、TE354.T细胞、H-1666细胞
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