"NSC-34:鼠神经元复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气的,大家争取做到因材施教,比如试试下面的“四步消化法”。(以难消化细胞为例),具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍(目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉)。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况把握)。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
CEM-CCRF细胞类似产品::PLC-8024细胞、A7r5细胞、COLO 320HSR细胞
HEH2细胞类似产品::Walker/LLC-WRC256细胞、SNU119细胞、Huh-7.5细胞
CT26-clone 25细胞类似产品::MRCV细胞、Hce8693细胞、SF 539细胞
LNCaP.FGC细胞类似产品::NB-19细胞、B10BR细胞、SW-1417细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:神经元
NSC-34:鼠神经元复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
SW-1990细胞类似产品::H-2342细胞、NB19-RIKEN细胞、SKNEP细胞
H1299细胞类似产品::C-4-I细胞、Jurkat细胞、T8细胞
VMCUB-1细胞类似产品::Huh 7.5.1细胞、NB1RGB细胞、NOR10细胞
培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制HAO的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋HAO冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做HAO标记;6)冻存:在殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10/ml数量。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
NSC-34:鼠神经元复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
HS766T细胞类似产品::CTLL(2)细胞、HMO6细胞、PZ-HPV-7细胞
MCF 7B细胞类似产品::J-111细胞、CCD 1112SK细胞、Hep 2细胞
MDA 1386细胞类似产品::LC2/Ad细胞、Huh-7.5.1细胞、HCC2185细胞
NCI-H661细胞类似产品::MDA-MB-231细胞、NCI H295R细胞、RetroPack PT67细胞
HME1细胞类似产品::MC 116细胞、LNCaP clone FGC细胞、NCIH1666细胞
GES1细胞类似产品::HEK293FT细胞、Hs832.Tc细胞、MG-HU-3细胞
B78细胞类似产品::RPMI6666细胞、SW-1783细胞、ASH3细胞
OLN 93细胞类似产品::Co320细胞、NCI-H2452细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞
253JBV细胞类似产品::BT549细胞、Hs 578.T细胞、BJ [Human fibroblast]细胞
U118-MG细胞类似产品::SV-HUC细胞、brain-derived Endothelial cells.3细胞、GH 3细胞
Colo205细胞类似产品::KBM-7细胞、RAG细胞、MHCC 97细胞
526mel细胞类似产品::MC3T3-E1(C4)细胞、RPMI7951细胞、HD11细胞
ECV-304细胞类似产品::National Medical Center-Glioma 1细胞、F56 [Human neoplasm]细胞、SDBMSC细胞
KYSE-50细胞类似产品::Hs604T细胞、Calu 3细胞、SW 620细胞
SCaBER细胞类似产品::QGY7703细胞、RGC6细胞、L 428细胞
KRC Y细胞类似产品::L540细胞、B-95-8细胞、McG-1细胞
KRC Y细胞类似产品::L540细胞、B-95-8细胞、McG-1细胞
H-1672细胞类似产品::PC3M细胞、Calu-3细胞、SK MEL 28细胞
AC16 [Human hybrid]细胞类似产品::SU86.86细胞、L2细胞、L23/P细胞
Line 522细胞类似产品::H4IIEC3细胞、F442-A细胞、hMSC-BM细胞
HS940细胞类似产品::Panc_02_03细胞、Anip-973细胞、A-9细胞
Vero细胞类似产品::H3255细胞、A-375SM细胞、32D.3细胞
LY-R细胞类似产品::EJ1细胞、A498细胞、Colon-26细胞
SCL1细胞类似产品::NCTC clone 1469细胞、HTR-8细胞、RWPE1细胞
NSC-34:鼠神经元复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
SW1463细胞类似产品::H69细胞、SF539细胞、TE1细胞
GM01232细胞类似产品::Tu212细胞、32D.3细胞、J82 COT细胞
GM02132C细胞类似产品::HR-8348细胞、GLC82细胞、MC57G细胞
SUPB15细胞类似产品::SN12C-PM6细胞、HRPEpiC细胞、A 2058细胞
SV40-MES13细胞类似产品::KRC Y细胞、G519细胞、149 PT细胞
SHI1细胞类似产品::RAG细胞、U266 Bl细胞、LIM1215细胞
AHH-1细胞类似产品::Be Wo细胞、3T6-Swiss albino细胞、WEHI231细胞
HTori:3细胞类似产品::KBM-7/Hap8细胞、H4-II-E细胞、SCC7细胞
HepG2/C3A细胞类似产品::SUM-102PT细胞、HUCCT1细胞、LS411细胞
Tb 1-Lu细胞类似产品::BNL-HCC细胞、NCIH1688细胞、GM07404D细胞
TE-4细胞类似产品::GOS-3细胞、Hs 675.T细胞、SNT-8细胞
OVTOKO细胞类似产品::RL-65细胞、Tn 5B1-4细胞、ketr 3细胞
Mo 59J细胞类似产品::GA-10 clone 4细胞、HuTu 80细胞、Ca759细胞
LSC-1细胞类似产品::NCIH1703细胞、NIH 3T3细胞、CF-1 MEF细胞
Jurkat (clone E6-1)细胞类似产品::SW756细胞、CEM-CCRF (CAMR)细胞、MOLT-16细胞
GA10细胞类似产品::H-322细胞、HCT116/L细胞、TK+/- (clone 3.7.2C)细胞
MOLP-2细胞类似产品::NCI-H157细胞、H-510A细胞、HCC-2935细胞
DOK细胞类似产品::GM12878细胞、Nthy ori 3.1细胞、NB-19细胞
BCAP37细胞类似产品::HSCT6细胞、HSC-3细胞、GM00637细胞
Bx-PC3细胞类似产品::Hs832T细胞、HOMEC细胞、L78细胞
H660细胞类似产品::TE5细胞、MC3T3-E1(C4)细胞、UPCI-SCC-90细胞
H660细胞类似产品::TE5细胞、MC3T3-E1(C4)细胞、UPCI-SCC-90细胞
NCIH1650细胞类似产品::MUTZ1细胞、Anip973细胞、32Dc3细胞
RKO-E6细胞类似产品::RetroPack PT67细胞、HMEL细胞、SF126细胞
MDAPCa2b细胞类似产品::TE3细胞、JM1细胞、Lieming Xu-2细胞
PC-9细胞类似产品::CWR-22rv1细胞、V79-GalK1细胞、JJN3细胞
IEC18细胞类似产品::MB231细胞、SU-DHL1细胞、QBC-939细胞
XuanWei Lung Cancer-05细胞类似产品::GM 2132细胞、MFE 280细胞、R D细胞
OSK-1细胞类似产品::REC-1细胞、Pro-5 Lec1.3c细胞、A-549细胞
J774细胞类似产品::LuCL4细胞、SKM1细胞、H-2066细胞
PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞类似产品::SHSY5Y细胞、QBI-293A细胞、NCIH1623细胞
JEG-3细胞类似产品::H-295R细胞、GM02131A细胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77细胞
hTERT-HME1细胞类似产品::A-673细胞、COLO 320 HSR细胞、NL-20细胞
P-19细胞类似产品::HPAF/CD18细胞、184A1细胞、Spodoptera frugiperda clone 9细胞
GM05384细胞类似产品::RWPE1细胞、MCF10-A细胞、SW403细胞
SK-N-BE(2)-M17细胞类似产品::MAntle cell VERona-1细胞、SNU398细胞、YH细胞
OV90细胞类似产品::McG-1细胞、CHP 212细胞、rUCMSCs细胞
MDA 1386细胞类似产品::LC2/Ad细胞、Lewis lung carcinoma细胞、OVCAR-8/ADR细胞
OCLY8细胞类似产品::PF-382细胞、Hs940T细胞、U251MG细胞
H-2023细胞类似产品::Kelly细胞、NCI-H102细胞、Reh细胞
C3H10T1/2 clone8细胞类似产品::COS-1细胞、MCF10A细胞、NCIH322细胞
DoTc2-4510细胞类似产品::MS-751细胞、RPMI no. 8226细胞、SG231细胞
KG-1细胞类似产品::SPC-A1细胞、Hs 895.T细胞、AMJ2-C8细胞
Hs-578T细胞类似产品::MV411细胞、SGC-996细胞、H-2126细胞
ACHN细胞类似产品::HCV 29细胞、BrCL18细胞、MDA-MB-468细胞
QGY细胞类似产品::CCD-1112sk细胞、IPLB-SF-21细胞、HCC-4006细胞
UPCI-SCC090细胞类似产品::L M (TK-)细胞、Panc 1细胞、NCI.H460细胞
COLO-738细胞类似产品::Roswell Park Memorial Institute 1846细胞、M3 Clone M-3细胞、GM05862细胞
DAN-G细胞类似产品::aNK细胞、MC 3T3-E1细胞、Ramos-2G6-4C10细胞
MDCK Type II细胞类似产品::LMH细胞、Michigan Cancer Foundation-12F细胞、HEC-1A细胞
NCI522细胞类似产品::MDA-kb2细胞、Epithelioma Papulosum Cyprini细胞、OCI-LY-19细胞
H292细胞类似产品::SNU620细胞、BALB/3T3 clone A31细胞、NCI-H157细胞
C918细胞类似产品::BNL CL.2细胞、HCT-15细胞、MDA435细胞
WERI细胞类似产品::OV3121细胞、AHH1细胞、HAC-84细胞
MADB 106细胞类似产品::HCT FET细胞、KMS18细胞、KMS18细胞
Y1细胞类似产品::CaSki细胞、28SC细胞、LS-123细胞
Kuramochi细胞类似产品::OCI-AML-4细胞、OP9细胞、SNU-C1细胞
OCIAML2细胞类似产品::DF1细胞、Hk-2细胞、GM00637I细胞
OCIAML2细胞类似产品::DF1细胞、Hk-2细胞、GM00637I细胞
COV-362细胞类似产品::BAEC细胞、MKN45细胞、PLB 985细胞
GM03573A细胞类似产品::Panc 5.04细胞、NOMO1细胞、LLC-PK1细胞
NT2D1细胞类似产品::GAK细胞、NL20SV细胞、D10细胞
AHH1细胞类似产品::GOTO细胞、DKMG细胞、NCI-HUT-596细胞
C-28I2细胞类似产品::RPPVEC细胞、H-1650细胞、NCI-H1993细胞
Ca759细胞类似产品::130T细胞、C3H10T1/2CL8细胞、OAC-P4C细胞
H-889细胞类似产品::NCI-H1930细胞、NS-I/1细胞、SCL-1细胞
X63Ag8.653细胞类似产品::HT144mel细胞、Leydig细胞、SW-962细胞
SK-N-AS细胞类似产品::FDCP-1细胞、NCI N87细胞、CCRF细胞
CAL51细胞类似产品::MDA-MB231细胞、HEK/293细胞、HSC细胞
SNU251细胞类似产品::LS 513细胞、L-Wnt-3A细胞、AN3-CA细胞
Cor L51细胞类似产品::NU-GC-3细胞、8305C细胞、MeSoTheliOma-211H细胞
SKLMS-1细胞类似产品::NTERA2D1细胞、ASPC1细胞、16-HBE14o细胞
SVEC4-10细胞类似产品::Hx147细胞、CORL88细胞、Hs 729.T细胞
HCT-8/V细胞类似产品::DR2R 1610细胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞、TCCSUP细胞
NCIH460细胞类似产品::Panc02-H0细胞、COLO-357细胞、NCIH292细胞
FRTL 5细胞类似产品::RAW264细胞、OCI/AML-5细胞、NS1-Ag 4/1细胞
HRIF细胞类似产品::CV-1细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞、MCF-10A细胞
SW 403细胞类似产品::NBL_S细胞、4T1-LUC细胞、A375细胞
MAEC细胞类似产品::NCIH820细胞、TF1细胞、RBL细胞
Hut292细胞类似产品::H650细胞、GM3569细胞、H-841细胞
Mel-RM细胞类似产品::MDAMB436细胞、DR2R1610细胞、SCC 4细胞
HAVSMC细胞类似产品::HCC95细胞、P3/NS1/1-Ag4-1细胞、Colon-38细胞
NSC-34:鼠神经元复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
JVM-3细胞类似产品::KYSE180细胞、HEL92.1.7细胞、Tca8113细胞
293-GP细胞类似产品::SHG 44细胞、SKES1细胞、Panc2.03细胞
TE-85 clone 5细胞类似产品::TE6细胞、MRC-5细胞、FT-293细胞
CHL/IU细胞类似产品::NCI-747细胞、DoTc2细胞、MOLP8细胞
NCI-H125细胞类似产品::J82COT细胞、SKMEL28细胞、HT144-mel细胞
aTC1-6细胞类似产品::WM115mel细胞、P31FUJ细胞、RCC-4细胞
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