"C127:小鼠乳腺肿瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37℃消化。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化HAO了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常HAO,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个性。如果和标准形态不一致,那可能是自己没消化HAO导致的,但如果消化方法正确,仍然成片分布,甚至完全吹打成单细胞悬液,贴壁后仍然成片分布,这是细胞的性,是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布,你的细胞之后会对你越来越不HAO。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SUPT-1细胞类似产品::RIN14B细胞、Hs852T细胞、Cates 1B细胞
SW-527细胞类似产品::293E细胞、Capan-1细胞、PASMCS细胞
Hs 870.T细胞类似产品::RPVSMC细胞、MRC5细胞、KYSE510细胞
HCC1569细胞类似产品::MC57细胞、UPCI-SCC-154细胞、SU86-86细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:详见相关文献介绍
C127:小鼠乳腺肿瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
8226/S细胞类似产品::LCD细胞、HCC-4006细胞、293细胞
MeT-5A细胞类似产品::A-549细胞、SK-ES1细胞、PANC 327细胞
HEK-EBNA细胞类似产品::SK-ES细胞、Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升GAO到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
C127:小鼠乳腺肿瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
传代24h-48h处于对数期的细胞,在冻存前24h换液;按照常规方法消化,离心,收集细胞沉淀;用血清重悬细胞沉淀,用血球计数板或者细胞计数仪进行细胞计数;配制细胞冻存液,将冻存液加到细胞液中,吹打混匀,控制细胞密度为2×10(6)-5×10(6)/ml;将细胞悬液按照1ml/支分装至已标记HAO的冻存管中,旋紧管盖;将冻存管放入程序冻存盒中,冻存盒立即移至-80°C冰箱中,过夜后将冻存细胞移至液氮中长期保存。冻存管内细胞数目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial,融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml/vial为宜。细胞冻存和复苏遵循“慢冻快溶”的原则。取出冷冻管后,须立即放入37°C水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化,并注意水面不可超过冷冻管盖沿,否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管之爆裂。细胞冻存时细胞状态不佳,会严重影响复苏时细胞的活率。一般选择处于对数生长期的细胞进行冻存,冻存前一天细胞ZuiHAO进行换液;消化过度也会严重影响细胞冻存后复苏的活率;冻存细胞时为按照温度梯度进行操作,会严重影响细胞活率。
MKN-74细胞类似产品::RMS 1598细胞、IHHA-1细胞、alpha-TC1-6细胞
L929细胞类似产品::NCI-H1792细胞、HuCC-T1细胞、293 EBNA细胞
GC-2细胞类似产品::OVCAR 4细胞、C57/B6-L细胞、TSCC1细胞
NTERA-2细胞类似产品::TCMK1细胞、FD-LSC-1细胞、NCI-H378细胞
NCI-H520细胞类似产品::Hs888T细胞、DC2.4细胞、HIEC-6细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞类似产品::HIBEpiC细胞、HRA19细胞、P3 NS1 Ag4/1细胞
VB细胞类似产品::NCI-H526细胞、H-2452细胞、CCC-HEH-2细胞
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MRC5细胞类似产品::SKNBE-1细胞、DSL6A/C1细胞、PCI-4B细胞
ML-2细胞类似产品::CAMA细胞、H2452细胞、NCIH508细胞
PK15细胞类似产品::WM 2664细胞、HEC151细胞、Mel RM细胞
GalK 1细胞类似产品::Homo sapiens No. 578, breast cells细胞、HEB细胞、WiDr细胞
RPMI-2650细胞类似产品::BC-021细胞、NHLF细胞、H-1648细胞
T98G细胞类似产品::RS4:11细胞、130T细胞、NSI/1-Ag4-1细胞
SJ-Rh 30细胞类似产品::LLC PK1细胞、H716细胞、RKN细胞
V79-GalK1细胞类似产品::GM05372E细胞、NCIH322细胞、NCIH2196细胞
MHCC97-L细胞类似产品::SKCO1细胞、SACC83细胞、NCI-H2126细胞
P36细胞类似产品::MGSMC细胞、NCIH2227细胞、NHDF细胞
SCC 15细胞类似产品::VeroC1008细胞、NCI-H522细胞、MV4-11细胞
MPP 89细胞类似产品::KY180细胞、Sp 2/0-Ag 14细胞、INS1细胞
SUDHL4细胞类似产品::3T3-Swiss albino细胞、MPC-11细胞、GM0637细胞
MCF-7细胞类似产品::MONO-MAC 6细胞、NCIH1436细胞、LS 513细胞
BCAP37细胞类似产品::HSCT6细胞、HSC-3细胞、GM00637细胞
TGW-nu细胞类似产品::SKNEP细胞、OCI Ly10细胞、TE-85细胞
C127:小鼠乳腺肿瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
COV-362细胞类似产品::BAEC细胞、MKN45细胞、PLB 985细胞
Pa16C细胞类似产品::F9细胞、Panc02-H0细胞、HO-8910 PM细胞
FCCH1024细胞类似产品::751-NA细胞、KBM-7细胞、Emory University-3细胞
SLMT-1细胞类似产品::L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞、SNU1细胞、BV173细胞
COLO 206细胞类似产品::H-1650细胞、MC-3T3-E1细胞、HEC-1-A细胞
H22-H8D8细胞类似产品::CHL1细胞、NCI-H69C细胞、HS-294-T细胞
SF-763细胞类似产品::CCRF SB细胞、RH8994细胞、L cell line细胞
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U-343细胞类似产品::P3HR1-BL细胞、HCCC9810细胞、786-0细胞
DHL-2细胞类似产品::Normal Rat Kidney细胞、PL11细胞、Fu97细胞
2B4-L细胞类似产品::SKNF1细胞、Hs 343.T细胞、GM04680细胞
Capan 2细胞类似产品::CHO-K1细胞、NCI-H128细胞、ACC-3细胞
U373MG细胞类似产品::TE85细胞、C127细胞、CHP126细胞
SUM 149细胞类似产品::Detroit-562细胞、CHL1细胞、HT(H9)细胞
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Roswell Park Memorial Institute 6666细胞类似产品::BC-019细胞、UM2细胞、LU-65M细胞
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2780CP细胞类似产品::KOPN8细胞、TFH细胞、CHP-100细胞
LC1/Sq细胞类似产品::Hs 822.T细胞、Be-Wo细胞、HCC-1806细胞
CAMA-1细胞类似产品::Human Microglia Clone 3细胞、PC3M-IE8细胞、WERI细胞
Madison 109细胞类似产品::NCI-BL2141细胞、SK RC 52细胞、H510细胞
MDA MB 134VI细胞类似产品::KYSE410细胞、DHL-4细胞、PK-136细胞
SNU-886细胞类似产品::SuDHL 2细胞、RBL 1细胞、MIN-6细胞
P3-X63-Ag 8.653细胞类似产品::NCIH1618细胞、NBLS细胞、TGW细胞
IEC6细胞类似产品::HEK 293-EBNA细胞、COR-L23细胞、ME-180细胞
H661细胞类似产品::ABC1细胞、BHK21细胞、TSUpr1细胞
KU 19-19细胞类似产品::Bovine Turbinate细胞、NCIH2141细胞、Caco-2BBe细胞
Panc-10.05细胞类似产品::OVCA432_Bast细胞、GP2-293细胞、Rat1细胞
J774 A1细胞类似产品::Hs 895.T细胞、C-26细胞、OCIAML3细胞
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HEI-193细胞类似产品::HNSC细胞、NIH:OVCAR-5细胞、NCI-H1819细胞
SNU-C2A细胞类似产品::AAV293细胞、SNU-354细胞、SNU-5细胞
SL-29细胞类似产品::MB39细胞、Namalwa细胞、HCC95细胞
MDA-MB231细胞类似产品::SF-126细胞、HMEL细胞、AN-3细胞
GC-2细胞类似产品::OVCAR 4细胞、HUT-125细胞、526mel细胞
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RPMI-6666细胞类似产品::SKG3A细胞、MC-116细胞、Madin-Darby Bovine Kidney细胞
Panc_08_13细胞类似产品::CCD-112CoN细胞、Jurkat 77细胞、PCI-4M细胞
769P细胞类似产品::AHH1细胞、AU-565细胞、H-1770细胞
SUM-149细胞类似产品::RAMOS2G64C10细胞、HMEC-1细胞、KYSE-150细胞
CD-18细胞类似产品::B16 melanoma F10细胞、NCIH1573细胞、RAEC细胞
MPC-83细胞类似产品::PL9细胞、MC 116细胞、H1355细胞
HR-1细胞类似产品::HEK293F细胞、Walker-256-TC细胞、SNU638细胞
PANC-03-27细胞类似产品::hTERT-HME-1细胞、G 401细胞、HEK.EBNA细胞
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H1666_DA细胞类似产品::RK13细胞、NCI-SNU-387细胞、ARO细胞
Centre Antoine Lacassagne-12T细胞类似产品::MDA MB 134VI细胞、HOS细胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞
LN382细胞类似产品::526mel细胞、PL5细胞、GC1-SPG细胞
JROECL 33细胞类似产品::HOCF细胞、BHK细胞、C3H10T1/2CL8细胞
NCIH2081细胞类似产品::74Int细胞、HPAFII细胞、Homo sapiens No. 578, breast cells细胞
KOSC-2 cl3-43细胞类似产品::Calu6细胞、MDCC-MSB1细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞
STTG1细胞类似产品::QGY 7701细胞、LNCaP-Clone-FGC细胞、SKRC20细胞
SW 1463细胞类似产品::HCC202细胞、H-345细胞、GT38细胞
Hs852T细胞类似产品::UCLA NPA871细胞、NCI-H1573细胞、KTA-7细胞
RPE1-hTERT细胞类似产品::H1993细胞、FRTL 5细胞、A2780S细胞
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L 363细胞类似产品::WEHI 3B细胞、MDCK.2细胞、LU451细胞
NIHOVCAR3细胞类似产品::FL62891细胞、H2052细胞、MC-116细胞
ZR-75-30细胞类似产品::EBC-1/original细胞、SiHa细胞、EAC-E2G8细胞
TGW-nu细胞类似产品::SKNEP细胞、OCI Ly10细胞、TE-85细胞
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Jurkat, Clone E6-1细胞类似产品::H2452细胞、HEYA8细胞、MC3T3E1细胞
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NCI-H711细胞类似产品::P3/X63/Ag8细胞、BEL-7405细胞、EoL-1-cell细胞
SW-626细胞类似产品::Malme-3 M细胞、TALL 1细胞、SK-N-BE(2)细胞
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NCI-H2126细胞类似产品::NCIH1651细胞、BNL-HCC细胞、H-441细胞
F-36P细胞类似产品::Hepa 1-6细胞、NB9细胞、PLMVEC细胞
OACP4 C细胞类似产品::H1581细胞、LLCPK1细胞、MOLT4细胞
CCD-19Lu细胞类似产品::HTh74细胞、Pt K1 (NBL-3)细胞、H358细胞
C127:小鼠乳腺肿瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
TCC Sup细胞类似产品::Hs 695.T细胞、OCI-Ly01细胞、OCILY10细胞
EC-109细胞类似产品::HRIF细胞、P3-X63Ag8.653细胞、SUDHL-1细胞
SW 1271细胞类似产品::J774 A1细胞、T-T细胞、COLO-699细胞
NCI-H1105细胞类似产品::NCI-H1694细胞、RKO-E6细胞、Sup T-1细胞
HES [Human embryonic skin fibroblast]细胞类似产品::QSG7701细胞、HOP62细胞、THPI细胞
NCIH1944细胞类似产品::KMM1细胞、H295R-S1细胞、HCC9204细胞
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