"HeLa 229:人宫颈癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气的,大家争取做到因材施教,比如试试下面的“四步消化法”。(以难消化细胞为例),具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍(目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉)。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况把握)。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
Lewis Lung Cancer细胞类似产品::Embryonic Bovine Tracheal cells细胞、HEL-1细胞、Caki-1细胞
A-375细胞类似产品::H647ell细胞、A.704细胞、Hs683T细胞
HCC0202细胞类似产品::B-CPAP细胞、HT-29/CX-1细胞、OV-1063细胞
PT-67细胞类似产品::Sp 2/0-Ag 14细胞、C666-1细胞、NCI-SNU-620细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:宫颈癌;女性
HeLa 229:人宫颈癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
HOCF细胞类似产品::Psi2-DAP细胞、RPMI1788细胞、Clone Y1细胞
MDA2B细胞类似产品::WC00079细胞、LC1/Sq细胞、NCTC clone 1469细胞
Hs746T细胞类似产品::CEMC1细胞、TE-6细胞、U-87细胞
细胞培养无菌操作的演示:凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用75%酒精擦拭瓶子的外表面;靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌,继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在GAO处,使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯,动作要轻、准确,不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管,防止交叉污染。玻璃器械洗消:一、新的玻璃器皿的洗消:自来水刷洗,除去灰尘。烘干、泡:烤箱中烘干,然后再浸入5%稀中12小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干:12小时后立即用自来水冲洗,再用洗涤剂刷洗,自来水冲干净后用烤箱烘干;泡酸、清洗:用清洁液浸泡12小时,然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗15次,Zui后蒸馏水冲洗3-5次和用双蒸水过3次。烘干、包装:洗干净后先烘干,然后用牛皮纸(油光纸)包装。GAO压消毒:包装HAO的器皿装入GAO压锅内盖HAO盖子,打开开关和安全阀,当蒸气成直线上升时,关闭安全阀,当指针指向15磅时,维持20-30分钟。GAO压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消:刷洗、烘干:使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中,泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净,然后烘干。泡酸、清洗:烘干后泡入清洁液(酸液),12小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗),再用蒸馏水冲洗3次。烘干、包装:洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁
细胞传代后放入培养箱没有摇匀,或者放入时摇匀,但在细胞贴壁前,又移动了培养瓶,频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少,培养箱搁板表面不平整,这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象,大部分悬浮细胞在细胞密度很GAO的情况下,很可能会出现部分细胞抱团生长的现象,聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物,殃及周围的悬浮细胞,因此在培养悬浮细胞时需控制HAO细胞密度。如果出现了细胞团,可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团,也可以尝试一下方法:将细胞悬液收集到15ml离心管中,静置20min左右,小心取上层细胞上清培养(该方法只能去除部分较大的细胞团)。部分细胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐药株等),这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡,则很可能是细胞状态不佳,可以通过调整血清浓度,控制消化,控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态;如果大部分细胞出现空泡,且单个细胞内空泡数目偏多,则可能细胞代次较GAO,细胞老化所致,需更换代次较早的细胞。
RAW 264.7细胞类似产品::NCI-H2172细胞、MFM-223细胞、SK-GT-4细胞
Pro-Lec1.3C细胞类似产品::3T3 clone A31细胞、UACC 812细胞、NCI-H1770细胞
Hs-940细胞类似产品::UCLA RO-81-A-1细胞、SK-Hep1细胞、751-NA-15细胞
C8161细胞类似产品::H1238细胞、H196细胞、FO [Mouse myeloma]细胞
SU.86.86细胞类似产品::D6P2T细胞、U031细胞、IMR90细胞
RAW-264.7细胞类似产品::HCC1937细胞、G361细胞、NCIH2029细胞
Hs746T细胞类似产品::CEMC1细胞、TE-6细胞、U-87细胞
HTori3细胞类似产品::GM637A细胞、MDA330细胞、P30/Ohkubo细胞
HCC1569细胞类似产品::MC57细胞、UPCI-SCC-154细胞、SU86-86细胞
P3 NS1 Ag4细胞类似产品::Hs 706.T细胞、National Medical Center-Glioma 1细胞、RCC-10细胞
HF-91细胞类似产品::TE-7细胞、10T1/2细胞、Ramos-RA1细胞
BC-021细胞类似产品::Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞、BRL细胞、MDA-MB 453细胞
HCC-70细胞类似产品::Swiss/3T3细胞、HBL100细胞、C8D1A细胞
CNE-2Z细胞类似产品::Centre Antoine Lacassagne-27细胞、WM35细胞、Line 870 Emory University-4细胞
HNEpC细胞类似产品::Jurkat-77细胞、M-NFS-60细胞、C4-I细胞
HEL 92.1.7细胞类似产品::MA104细胞、MSTO-211 H细胞、T-24细胞
HEL 92.1.7细胞类似产品::MA104细胞、MSTO-211 H细胞、T-24细胞
CMT93细胞类似产品::SK-MEL-2细胞、HCS2/8细胞、SK.OV.3细胞
SCC25细胞类似产品::Hs-940细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞、P3-Jiyoye细胞
Jurkat, Clone E6-1细胞类似产品::H2452细胞、HEYA8细胞、MC3T3E1细胞
CAL78细胞类似产品::MFE-296细胞、Hs 737.T细胞、OEC19细胞
ARH 77细胞类似产品::UMUC-14细胞、MDA-453细胞、HET1A细胞
H2170细胞类似产品::MBdSMC细胞、IM95细胞、MADB 106细胞
U-251细胞类似产品::Hs 606细胞、293E细胞、CT26-clone 25细胞
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P3-X63-Ag8细胞类似产品::Colo-678细胞、Sp2/mIL-6细胞、HEY A8细胞
ATN1细胞类似产品::NOR 10细胞、GM-215细胞、H-727细胞
Mel RM细胞类似产品::MFC细胞、HEK-293-F细胞、H2135细胞
UMRC-2细胞类似产品::RBL细胞、NCI-H740细胞、CMT-93细胞
Becker细胞类似产品::WI38细胞、L cell line细胞、PCI:SG231细胞
Ha Fe细胞类似产品::HCC1008细胞、AN3CA细胞、OVCAR.8细胞
CV-1 in Origin Simian-7细胞类似产品::MCF-7/ADR细胞、U937细胞、Vero C1008细胞
U373MG细胞类似产品::TE85细胞、C127细胞、CHP126细胞
Mono Mac 6细胞类似产品::CCD-841CoN细胞、Walker-Ca.256细胞、Hs 578Bst细胞
PA-TU-8988S细胞类似产品::NCI-H2286细胞、OVCA 420细胞、MDA1386细胞
293E细胞类似产品::INS-1E细胞、LS 174 T细胞、SHP77细胞
HEK 293细胞类似产品::WM266细胞、PaTu8988s细胞、LN382细胞
EPC细胞类似产品::M059J细胞、SPCA1细胞、HCC1419细胞
AE 1201细胞类似产品::Ly10细胞、L-5178-Y细胞、SNU-1040细胞
Tn 5B1-4细胞类似产品::H2029细胞、OV1/P细胞、Centre Antoine Lacassagne-78细胞
MB157细胞类似产品::SNU-1细胞、18G3.cl 1细胞、SK-ChA-1细胞
HDSMC细胞类似产品::LTEPsm细胞、MHH-CALL-2细胞、Kit 225-K6细胞
KPL1细胞类似产品::HS-940-T细胞、C2BBe1细胞、MV 3细胞
B35细胞类似产品::HT-3细胞、NCI-H1688细胞、MeT-5A细胞
RC92A细胞类似产品::NCIH1648细胞、CCC-HEH-2细胞、HUT 125细胞
C57/B6-L细胞类似产品::Hs611T细胞、CCD-112CoN细胞、P3 88 D1细胞
SUM149-PT细胞类似产品::MHCC-LM3细胞、Vero E-6细胞、NOMO-1细胞
RGB细胞类似产品::RL细胞、LTEP a2细胞、SK-MES细胞
BEL 7405细胞类似产品::NCI-H128细胞、D-341细胞、IOSE80UBC细胞
U-251_MG细胞类似产品::SKGT4细胞、MDA-MB-134VI细胞、A673细胞
Hep-G2细胞类似产品::Emory University-2细胞、FK81细胞、CCC-HSF-1细胞
PAa细胞类似产品::ML2细胞、HCC2218细胞、C-8161细胞
SNU-475细胞类似产品::SuDHL 10细胞、TF-1a细胞、SuDHL 10细胞
H-2052细胞类似产品::SUM149-PT细胞、SCL II细胞、Hs 863.T细胞
hRPTC细胞类似产品::PANC0504细胞、Medical Research Council cell strain-9细胞、KCL-22细胞
SHSY5Y细胞类似产品::H1666细胞、MEF细胞、FL-83B细胞
8305C_1细胞类似产品::NCI-H2087细胞、P-815细胞、H345细胞
SF-126细胞类似产品::HGSMC细胞、OCIAML2细胞、Lu-99A细胞
ASH-3细胞类似产品::H-1703细胞、SW756细胞、NCI-H2342细胞
HCC1954BL细胞类似产品::HA1800细胞、S-16细胞、LOU-NH-91细胞
NCIH1963细胞类似产品::C1498细胞、WEHI-3B细胞、K7M2-WT细胞
Hs 940.T细胞类似产品::CoC1细胞、253J B-V细胞、SK-RC 52细胞
HS940细胞类似产品::Panc_02_03细胞、NEC细胞、NCIH727细胞
OsA-CL细胞类似产品::TE11细胞、TE6细胞、NRK 52E细胞
SN4741细胞类似产品::Tb1.Lu细胞、Tn-5细胞、Fetal Human Lens-124细胞
EU-3细胞类似产品::PANC0203细胞、Vero 76细胞、DHL-5细胞
SK-MEL-2-LUC细胞类似产品::VE细胞、CORL105细胞、B16-F10细胞
ABE8.1/2细胞类似产品::Bovine ENDometrial cells细胞、RC-K8细胞、FL 62891细胞
WSUDLCL2细胞类似产品::CCC-HPF-1细胞、TE 32细胞、LAN5细胞
MIHA细胞类似产品::HCS-2/8细胞、NPC-039细胞、PaTu8988s细胞
Detroit-562细胞类似产品::T98细胞、H-35 Reuber细胞、QGP-1细胞
4T1-A细胞类似产品::KU-812细胞、IMR 90细胞、OVCA5细胞
L-M[TK-]细胞类似产品::FRTL 5细胞、H2286细胞、C57 Mouse Tumor 93细胞
PANC403细胞类似产品::MFM223细胞、Hs294T细胞、H-929细胞
Jurkat clone A3细胞类似产品::LL/2 (LLC1)细胞、RTMC细胞、RIN m5F细胞
NCI-H102细胞类似产品::KHYG1细胞、B/C3T3细胞、WIL2 S细胞
SK-ML2细胞类似产品::COR L279细胞、Sp2/0-Ag14细胞、J 111细胞
HEK 293FT细胞类似产品::CBRH7919细胞、HBE细胞、IAR 20细胞
SC细胞类似产品::DU145细胞、HT 115细胞、H87细胞
NCIH2085细胞类似产品::Hs840T细胞、Mino细胞、IEC6细胞
3AA细胞类似产品::Centre Antoine Lacassagne-12T细胞、LN299细胞、F9细胞
RetroPack PT67细胞类似产品::MAD109细胞、CAL78细胞、T84细胞
Fu97细胞类似产品::KRC/Y细胞、T 84细胞、LN 229细胞
SCC-7细胞类似产品::NCIH2052细胞、COLO 320 DM细胞、SNG-M细胞
Meat Animal Research Center-145细胞类似产品::Hu-P-T3细胞、CWR22R细胞、CCD-841-CoN细胞
SUM-52PE细胞类似产品::GM01232E细胞、LLC-PK1细胞、U-226AR1细胞
CEM-C7细胞类似产品::CAL120细胞、NOMO-1细胞、Farage OL细胞
32D CL3细胞类似产品::NCI-H87细胞、Colo-201细胞、DAKIKI Clone 1细胞
3-LL细胞类似产品::CCD 966 SK细胞、SRS-82细胞、SW-954细胞
DMS-79细胞类似产品::U031细胞、AM38细胞、UMUC1细胞
GDM1细胞类似产品::Jurkat-FHCRC细胞、WPMY-1细胞、MKN-1细胞
NCI-H1693细胞类似产品::MARC 145细胞、RCK8细胞、Hs888Lu细胞
RKN细胞类似产品::Tu177细胞、OE33细胞、ECV304细胞
SW-1116细胞类似产品::CL1细胞、Transformed Human Liver Epithelial-3细胞、MODE-K细胞
IGROV 1细胞类似产品::HDF-a细胞、NCI-Hut 125细胞、OLN-93细胞
MCA 38细胞类似产品::MeSoTheliOma-211H细胞、NSI/1-Ag4-1细胞、GC-1spg细胞
HEP3B2细胞类似产品::Hos TE-85细胞、H647细胞、HMSC细胞
BE(2)C细胞类似产品::SUM 149PT细胞、NT2/D1细胞、BALB/c 3T3 clone A31细胞
Ca 9-22细胞类似产品::Caco-2 BBe细胞、CHL细胞、CHP212细胞
D407细胞类似产品::NIH:OVCAR-3细胞、IB-RS-2细胞、Panc5.04细胞
UCW 100细胞类似产品::RPTEC/TERT 1细胞、SW839细胞、TCam 2细胞
HCC1833细胞类似产品::HBL-100细胞、NGEC细胞、HUT-125细胞
Bovine ENDometrial cells细胞类似产品::N9细胞、MDA-MB-134-VI细胞、CF Pac1细胞
HT29细胞类似产品::SW 962细胞、OVCA-432细胞、HCT_116细胞
RMS13细胞类似产品::WM115-mel细胞、P3 NS1 Ag4细胞、SP2细胞
JC细胞类似产品::NCI H157细胞、THEECs细胞、MDCKII-WT细胞
Human Embryo Lung-1细胞类似产品::H-1437细胞、SKNBE(1)细胞、TKB-1细胞
HeLa 229:人宫颈癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
Hs578Bst细胞类似产品::RCC10 RGB细胞、A427细胞、EFM192C细胞
U20-S细胞类似产品::MCF-12F细胞、OPM-2细胞、HuT-102细胞
PC-9/GR细胞类似产品::PC 61-5-3细胞、NCI-H2172细胞、MDA MB 134VI细胞
MIN-6细胞类似产品::SCC090细胞、DCS细胞、Caov-4细胞
Emory University-2细胞类似产品::ME 180细胞、MDA-MB-157细胞、HIT clone T15细胞
JIII细胞类似产品::MDA-MB-468细胞、LS1034细胞、3D4/21细胞
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