"BEL-7405:人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长：贴壁
冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升GAO，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
G519细胞类似产品：：NCI H747细胞、OVCAR-432细胞、GTL 16细胞
LS-180细胞类似产品：：COLO678细胞、ABC1细胞、K1735细胞
G-402细胞类似产品：：FU-MMT-1细胞、NCI-H2141细胞、MGH-U1 (EJ)细胞
NCI-H1993细胞类似产品：：PTK 1细胞、HuH-6细胞、P3/NS1/Ag4-1细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
细胞背景资料：详见相关文献介绍
BEL-7405:人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态：上皮细胞样
GM346细胞类似产品：：LN 229细胞、HS-766-T细胞、NCI-H2286细胞
Fu97细胞类似产品：：KRC/Y细胞、T 84细胞、LN 229细胞
AgC11x3A细胞类似产品：：Cloudman M3细胞、SUM 102细胞、NTera 2/cl.D1细胞
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升GAO到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
BEL-7405:人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性：贴壁
贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。
PT-K75细胞类似产品：：KBM5细胞、NCIH548细胞、HMVEC细胞
hADSCs细胞类似产品：：CLONE M3细胞、MESSA Dx5细胞、J82COT细胞
SN12C-PM6细胞类似产品：：NBL-5细胞、SK-N-FI细胞、Strain KB细胞
P3X63细胞类似产品：：GM3570细胞、L6565细胞、TE 354.T细胞
Jurkat E6-1细胞类似产品：：CLL-CII细胞、Colon-26细胞、HB 611细胞
P3 88 D1细胞类似产品：：UM-UC-14细胞、SF-539 BT细胞、MES13细胞
NCI-H711细胞类似产品：：P3/X63/Ag8细胞、BEL-7405细胞、EoL-1-cell细胞
D341MD细胞类似产品：：SHI-1细胞、Verda reno细胞、COLO-320-HSR细胞
C-28/I2细胞类似产品：：C-32细胞、L-5178-Y-R细胞、BNCL-2细胞
STTG1细胞类似产品：：QGY 7701细胞、LNCaP-Clone-FGC细胞、SKRC20细胞
T-T细胞类似产品：：CWR22-Rv1细胞、32D clone3细胞、SBC-5细胞
NCTC 929细胞类似产品：：Panc02.03细胞、HPMEC细胞、S3 HeLa细胞
KRC Y细胞类似产品：：L540细胞、B-95-8细胞、McG-1细胞
MM-1S细胞类似产品：：C12细胞、Human Embryonic Skin细胞、G 292 Clone A 141B1细胞
H2196细胞类似产品：：LA-N-6(OAN)细胞、MC/CAR细胞、IGR-OV1细胞
EoL-1细胞类似产品：：MEG-01细胞、U-138-MG细胞、C-Li-7细胞
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DHL-6细胞类似产品：：MLMA细胞、H719细胞、A549/DDP细胞
JEKO细胞类似产品：：H-520细胞、NCIH1975细胞、33604细胞
Huh7.5.1细胞类似产品：：H716细胞、MM96L细胞、LoMeT-ccRcc细胞
HT-144细胞类似产品：：RMC-1细胞、SU-DH-L5细胞、Line 522细胞
NCI-H2452细胞类似产品：：SKMEL28细胞、L1210细胞、SCC-4细胞
LTEP-sm 1细胞类似产品：：Mono-Mac-6细胞、UPCI-SCC-090细胞、SNU-475细胞
HARAB细胞类似产品：：EA. hy 926细胞、Jurkat FHCRC细胞、FUOV1细胞
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SW 13细胞类似产品：：CCD18Co细胞、UMUC-14细胞、CAOV4细胞
BEL 7404细胞类似产品：：Colo205细胞、JiyoyeP-2003细胞、HIMEC细胞
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MX-1细胞类似产品：：HFE-145细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8细胞、N-2a细胞
CALU1细胞类似产品：：LUDLU1细胞、NCI-HUT-69细胞、H1770细胞
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Wayne State University-Head and Neck 13细胞类似产品：：NU-GC-4细胞、ND7/23细胞、H1792细胞
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H841细胞类似产品：：B16 F1细胞、MonoMac1细胞、TE-671细胞
H841细胞类似产品：：B16 F1细胞、MonoMac1细胞、TE-671细胞
MDA-kb2细胞类似产品：：COLO-699细胞、ketr 3细胞、P3/NS1/1-Ag4-1细胞
Pa16C细胞类似产品：：F9细胞、Panc02-H0细胞、HO-8910 PM细胞
HeLa S 3细胞类似产品：：YD-38细胞、C2BBe 1细胞、L-363细胞
M059J细胞类似产品：：Reuber-H-35 hepatoma细胞、RPE D407细胞、CFSC-8B细胞
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NEC-8细胞类似产品：：TE-10细胞、Panc2_03细胞、KTA7细胞
Tu-686细胞类似产品：：HEK-AD 293细胞、Tohoku Hospital Pediatrics-1细胞、ROS 17/2.8细胞
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TE12细胞类似产品：：UMNSAH/DF#1细胞、Rat podocyte细胞、OCI-Ly 1细胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial细胞类似产品：：GTL16细胞、T47-D细胞、MDA-468细胞
L-540细胞类似产品：：FRO 81-2细胞、NCI-H2405细胞、RL-95-2细胞
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3T3-J2细胞类似产品：：Potorous tridactylus Kidney 1细胞、C-127细胞、VK2细胞
BE(2)M17细胞类似产品：：Mhh-Call 2细胞、MPP-89细胞、Normal Rat, August 3, 1983细胞
MDA-MB-157细胞类似产品：：A 172细胞、KGN细胞、LOUNH91细胞
Sp2/0细胞类似产品：：H1623细胞、LS180细胞、NCIH187细胞
EO771细胞类似产品：：NCIH841细胞、BALB/3T3 cl. A31细胞、Hs 852.T细胞
G292细胞类似产品：：Nb 2细胞、HS940细胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞
MIO-M1细胞类似产品：：PL12细胞、OCI/AML2细胞、ZR7530细胞
NT2细胞类似产品：：T1-73细胞、C 643细胞、NFHIOSE-80细胞
NIH 3T3细胞类似产品：：AR42J细胞、KYSE-150细胞、RPMI-2650细胞
Jurkat E6.1细胞类似产品：：H-1869细胞、H2291细胞、NCI522细胞
Statens Seruminstitut Rabbit Cornea细胞类似产品：：SUDHL4细胞、HT细胞、HCEC-B4G12细胞
BEL-7405:人肝癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
MM1S细胞类似产品：：L-1210细胞、FAT细胞、B5537SKIN细胞
NCIH69细胞类似产品：：RD 2细胞、H-1963细胞、ASPC1细胞
CCD 19Lu细胞类似产品：：TE 671细胞、HCC1569细胞、H2198细胞
Reuber H35细胞类似产品：：TC-1[JHU-1]细胞、M-1 myeloid leukemia细胞、JM细胞
SKNBE2细胞类似产品：：PGBE1细胞、C26细胞、DHL-2细胞
Nb2细胞类似产品：：C-4I细胞、C32-mel细胞、U-251MG细胞
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