"TC-1 [Mouse lung]:小鼠肺上皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
有一些细胞是数量多一点比较HAO生长,生长状态也比较HAO。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较HAO,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较HAO。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不HAO的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不HAO,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞建议只吹打,不消化)其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得HAO的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
MB-49细胞类似产品::HT29细胞、KOPN-8细胞、UC-3细胞
H-727细胞类似产品::293A细胞、U251细胞、PK-13细胞
DMS-153细胞类似产品::H2052_MM细胞、OV 2008细胞、BJAB细胞
OCM-1A细胞类似产品::A.704细胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B细胞、OCILY3细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:详见相关文献介绍
TC-1 [Mouse lung]:小鼠肺上皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
K562细胞类似产品::SUM52细胞、LWnt-3A细胞、EO771细胞
Tca-8113细胞类似产品::KM12细胞、Hca-F细胞、NP-69细胞
MARC 145细胞类似产品::CoCL2细胞、CP70细胞、T-T细胞
培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制HAO的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋HAO冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做HAO标记;6)冻存:在殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10/ml数量。
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
TC-1 [Mouse lung]:小鼠肺上皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁生长
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
P3/NS1/1-Ag4.1细胞类似产品::H2444细胞、IR 983F细胞、LC1细胞
JHH-7细胞类似产品::GM03671细胞、Hs_578t细胞、HBE 135-E6E7细胞
SBC5细胞类似产品::NCI-SNU-C2A细胞、KLE细胞、RD细胞
EMT-6细胞类似产品::CTLL2细胞、MCM细胞、GA-10细胞
H-1092细胞类似产品::Hs 863.T细胞、MCF 10A细胞、H-1238细胞
CMT 167细胞类似产品::LLC-PK(1)细胞、VERO76细胞、RL95-2细胞
Rat 1细胞类似产品::HMrSV5细胞、NCI-H1792细胞、ACT-1细胞
Calf Pulmonary Artery 47细胞类似产品::SKRC-20细胞、MKN-74细胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z细胞
RetroPack PT67细胞类似产品::MAD109细胞、CAL78细胞、T84细胞
Michigan Cancer Foundation-7细胞类似产品::WM-239细胞、Hs 888Lu细胞、SW-13细胞
RAT2细胞类似产品::Rat 2细胞、Walker256细胞、P31 FUJ细胞
RA.1细胞类似产品::TT细胞、H-1092细胞、COLO 680N细胞
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SK-MEL2细胞类似产品::COLO824细胞、NCIH2286细胞、NBL-2细胞
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CCD-112 CoN细胞类似产品::266 Bl细胞、H211细胞、Panc-02细胞
HCC0095细胞类似产品::Ha Fe细胞、L-1210细胞、VMRCLCD细胞
NCI.H460细胞类似产品::THP-1(ATCC)细胞、P3J HR-1细胞、NS-I/1细胞
TC-1 [Mouse lung]:小鼠肺上皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
NCIH596细胞类似产品::Tu-212细胞、NCIH2066细胞、CL1细胞
NCIH2106细胞类似产品::GM03190细胞、RCF细胞、MN 60细胞
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L929细胞类似产品::NCI-H1792细胞、HuCC-T1细胞、293 EBNA细胞
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HEK;293细胞类似产品::HCC1954 BL细胞、B16/F1细胞、PaTu 8988 S细胞
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RPTEC/TERT1细胞类似产品::PTK-2细胞、H1819细胞、NT2细胞
MX1细胞类似产品::BXPC3细胞、ASH-3细胞、Lu-65细胞
16HBE140细胞类似产品::NCI-SNU-475细胞、LCLC-103H细胞、BTI-TN5B1-4细胞
NCIH2228细胞类似产品::KCL-22细胞、FHL-124细胞、ZYM-SVEC01细胞
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TC-1 [Mouse lung]:小鼠肺上皮复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
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GC-2spd(ts)细胞类似产品::Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞、TMD8细胞、SKNBE-1细胞
DMS-153细胞类似产品::H2052_MM细胞、OV 2008细胞、BJAB细胞
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