"TGW:人神经母细胞瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37℃消化。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化HAO了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常HAO,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个性。如果和标准形态不一致,那可能是自己没消化HAO导致的,但如果消化方法正确,仍然成片分布,甚至完全吹打成单细胞悬液,贴壁后仍然成片分布,这是细胞的性,是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布,你的细胞之后会对你越来越不HAO。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
U 138 MG细胞类似产品::A375-MEL细胞、R-1059-D细胞、32D-Cl3细胞
MM.1S细胞类似产品::HCC-1419细胞、C-4I细胞、F36P细胞
NCI-H2171细胞类似产品::AN3细胞、Walker/LLC-WRC 256细胞、RCK8细胞
C-26细胞类似产品::NCI-SNU-878细胞、NS-1-Ag4-1细胞、J-774A.1细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:详见相关文献介绍
TGW:人神经母细胞瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
MC-116细胞类似产品::SBC3细胞、NPA87-1细胞、H-510细胞
GA-10(Clone 4)细胞类似产品::hTERTHME1细胞、UCH1细胞、MKN-45细胞
NCIH2196细胞类似产品::HCT/Taxo1细胞、CAOV4细胞、RKO_AS45细胞
培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制HAO的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋HAO冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做HAO标记;6)冻存:在殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10/ml数量。
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
TGW:人神经母细胞瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁生长
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
SW-1417细胞类似产品::Jurkat FHCRC细胞、NCI-H889细胞、JURKAT E-6.1细胞
KU1919细胞类似产品::MC9细胞、NMC-G1细胞、Panc 04.03细胞
P3X63Ag8细胞类似产品::HEK293A细胞、SCC-7细胞、SNU407细胞
NT-2细胞类似产品::CATH.a细胞、CT 26细胞、3T3-L1细胞
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞类似产品::ECC-12细胞、HCC2108细胞、CHP 100细胞
OVCAR 433细胞类似产品::COLO394细胞、SMMC7721细胞、RPMI 8226细胞
C1R细胞类似产品::HEK-293细胞、UMNSAH-DF1细胞、NOR 10细胞
EAC-E2G8细胞类似产品::OVCAR3细胞、TM-3细胞、A9 (Hamprecht)细胞
CNE-2Z细胞类似产品::Centre Antoine Lacassagne-27细胞、WM35细胞、Line 870 Emory University-4细胞
WPMY1细胞类似产品::TJ905细胞、SNU-C1细胞、KYSE 140细胞
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My-La 2059细胞类似产品::U-266 AR1细胞、H345细胞、MIMVEC细胞
IOSE80UBC细胞类似产品::HBL1细胞、SW 962细胞、NCIH2141细胞
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NCI-446细胞类似产品::RM1细胞、H1522细胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1细胞
HFLS细胞类似产品::MPC11细胞、HCC-9204细胞、HEM细胞
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TGW:人神经母细胞瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
SW 982细胞类似产品::Danio rerio Gill细胞、UWB1.289细胞、WERI-Rb 1细胞
High-5细胞类似产品::NCIH446细胞、CL-40细胞、HCC-1359细胞
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JROECL 19细胞类似产品::BI-Mel细胞、KRC Y细胞、HBSMC细胞
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Tca-83细胞类似产品::Centre Antoine Lacassagne-33细胞、NCI-H1648细胞、NCI-H1355细胞
COLO 201细胞类似产品::Madin Darby Canine Kidney细胞、IOSE80细胞、HLEC-SRA 01/04细胞
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NCI-H498细胞类似产品::RPE1-hTERT细胞、B16 subline B78细胞、22Rv-1细胞
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SEG-1细胞类似产品::H-1522细胞、CNLMG-B5537SKIN细胞、AR4-2J细胞
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MD Anderson-Metastatic Breast-361细胞类似产品::OCILY10细胞、RCC23细胞、CRFK细胞
EB-2细胞类似产品::Rainbow Trout Embryo细胞、U251n细胞、CHO-S细胞
Roswell Park Memorial Institute 7951细胞类似产品::NCI-ADR-RES细胞、SKN-AS细胞、A-375.S2细胞
LS411N细胞类似产品::H-510细胞、GM2219C细胞、MC-CAR细胞
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Hs 746T细胞类似产品::APRE-19细胞、KHYG1细胞、EnCa1细胞
NUGC2细胞类似产品::SuDHL 1细胞、GM05887A细胞、P3/X63/Ag8.653细胞
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OCI/AML3细胞类似产品::hRMECs细胞、Fetal Bovine Heart Endothelial细胞、PC.3细胞
Lu99A细胞类似产品::B16-F1细胞、Renal Carcinoma细胞、MBT2细胞
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OUMS-27细胞类似产品::KYSE270细胞、H774细胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞
TGW:人神经母细胞瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
RPE D407细胞类似产品::WM115F细胞、MGHU3细胞、SW-480细胞
SNU449细胞类似产品::BNL 1MEA.7R.1细胞、NCI-H1975细胞、HUC-1细胞
KB细胞类似产品::T-ALL1细胞、H-2171细胞、SUM-159PT细胞
HT1080细胞类似产品::PK-13细胞、PANC.1细胞、OS-732细胞
COLO 678细胞类似产品::OVCA-432细胞、NCIH295R细胞、Panc-1-P细胞
GM05372细胞类似产品::J 774A.1细胞、HF-91细胞、FaDu细胞
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