"TE-4:人食管癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
冻存和复苏的原则:慢冻快融》当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升GAO,并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序:采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时,1~2℃/min;当温度达-25℃以下时,5~10℃/min;当温度达-100℃时,可迅速放入液氮中。2.简易程序:将冷冻管(管口要朝上)放入纱布袋内,纱布袋系以线绳,通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口,按每分钟温度下降1~2℃的速度,在40min内降至液氮表面过夜,次晨投人液氮中。3.传统程序:冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。细胞冻存方法:1.预先配制冻存液》(1)8%DMSO+细胞生长液(92%血清)2.取对数生长期细胞,经胰酶消化后,加入适量冻存液,用吸管吹打制成细胞悬液(1×10(6)~5×10(6)细胞/ml)。3.加入1ml细胞于冻存管中,密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法:1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,轻轻摇动冷冻管,使其在1分钟内全部融化(不要超过3分钟)。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养,24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液,以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂,然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
JTC-39细胞类似产品::H460细胞、OS-RC-2细胞、MOLT-4细胞
3T3 Swiss Albino细胞类似产品::OVTOKO细胞、BNL CL2细胞、CCK81细胞
NCIH841细胞类似产品::C33-A细胞、HARAB细胞、NCI-SNU-761细胞
HS5细胞类似产品::huH 1细胞、PLB985细胞、COLO829细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:详见相关文献介绍
TE-4:人食管癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
TGW-nu细胞类似产品::SKNEP细胞、OCI Ly10细胞、TE-85细胞
NCI H345细胞类似产品::TOV112D细胞、Earles's cells细胞、PATU-S细胞
LS174细胞类似产品::HIBEC细胞、33604细胞、H1838细胞
细胞传代注意事项:①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次ZuiHAO只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材;②每天观察细胞形态,掌握HAO细胞是否健康的标准:健康细胞的形态饱满,折光性HAO,生长致密时即可传代;③如发现细胞有污染迹象,应立即采取措施,一般应弃置污染的细胞,如果必须挽救,可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗,随后培养基中加入较大量的抗生素,并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持:细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的点,要做HAO建系的维持必须记录HAO细胞档案,换液传代和做HAO细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
TE-4:人食管癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁生长
一般使用trypsin-EDTA 浓度为0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液浓度过GAO时,易造成培养基中细胞碎片增多,黑渣子增多,常规细胞传代时建议用0.05%的胰酶进行消化,对于难消化的细胞可采用0.25%胰酶进行消化,细胞密度过GAO超过80%时,采用分步消化法。胰酶储存在-20°C,解冻在4°C进行,次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于-20°C,避免反复冷冻解冻造成trypsin之活性降低,并可减少污染之机会。胰酶消化的程度是细胞培养中的一个关键步骤:消化过度细胞碎片增多,黑渣子增多,细胞会成片脱落,严重影响细胞活性,并有部分细胞漂浮,随弃去的胰酶流失;消化不足则细胞难于从瓶壁上吹下,反复吹打同样也会损伤细胞活性。不同细胞对消化液的敏感性不同,胰酶消化的时间也会有差异。胰酶消化时间与胰酶的浓度,是否含EDTA,胰酶的储存时间,胰酶的储存温度,是否反复冻融,消化加入的胰酶体积,消化温度及细胞的密度有关。对于新购买的细胞,建议客户先用低浓度的胰酶仔细去摸索一下消化时间,可每隔1分钟镜下观察细胞是否变圆,记录Zui佳消化时间,下一次操作参考之前的记录来控制时间即可。
WEHI-231细胞类似产品::NCI-H2170细胞、CCC-HPF-1细胞、SW-900细胞
MDA415细胞类似产品::H2135细胞、A 375细胞、HPDLF细胞
HEC-1B细胞类似产品::HPB/ALL细胞、SW-982细胞、H226细胞
Suzhou Human Glioma-44细胞类似产品::52PE细胞、H-157细胞、B16 melanoma F10细胞
MV-522细胞类似产品::SUM 102细胞、451-LU细胞、Caki2细胞
BHK细胞类似产品::TEC细胞、I90细胞、H2085细胞
G292细胞类似产品::Nb 2细胞、HS940细胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞
MDAPCa-2b细胞类似产品::TOV-112D细胞、U-373MG细胞、HS-683细胞
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PIG3细胞类似产品::HT 29细胞、786-O RCC细胞、JURKAT E-61细胞
TE-4:人食管癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
KBM-7细胞类似产品::KY-50细胞、GS-9L细胞、SK-N-MC细胞
FL83B细胞类似产品::H847细胞、SW 837细胞、WM266-4细胞
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H2107细胞类似产品::38C-13细胞、HIT T-15细胞、KB细胞
NCI H82细胞类似产品::SP2/0 Ag-14细胞、SNU668细胞、Clone Y-1细胞
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MPASMC细胞类似产品::Panc_03_27细胞、H-1672细胞、T-HSC细胞
TYK-nu细胞类似产品::SEG-1细胞、Mv 1 Lu (NBL-7)细胞、HTSMC细胞
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NIH3T3细胞类似产品::MGH-U1细胞、266 Bl细胞、TE-4细胞
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TE-4:人食管癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
PTK-1细胞类似产品::H2052细胞、CFPAC细胞、MuM-2B细胞
SUM-52PE细胞类似产品::GM01232E细胞、LLC-PK1细胞、U-226AR1细胞
RWPE-2细胞类似产品::C 643细胞、SF-539细胞、NT2D1细胞
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KATOIII细胞类似产品::NCI-841细胞、Z310细胞、NIH:OVCAR-4细胞
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