"Lu-99A:人大细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长：贴壁
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
HOS细胞类似产品：：S16细胞、COLO680N细胞、MIA-PaCa-2细胞
THEECs细胞类似产品：：SK-N-BE2细胞、NTC200细胞、L-5178-Y-R细胞
Th17细胞类似产品：：MIN-6细胞、SHIN3细胞、Eph4 1424细胞
PC.3细胞类似产品：：SK-NM-C细胞、AZ 521细胞、SK-NM-C细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
细胞背景资料：详见相关文献介绍
Lu-99A:人大细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态：上皮细胞样
RSC96细胞类似产品：：PG [Human lung carcinoma]细胞、H-322细胞、Y 1细胞
GM15452细胞类似产品：：Hs 343.T细胞、Human Hepatocyte Line 5细胞、COLO 320细胞
3LL细胞类似产品：：HT-22细胞、PA-TU S细胞、SH-SY5Y Parental细胞
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制HAO的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋HAO冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做HAO标记；６)冻存：在殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。
细胞传代方法：１：１０传代
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
Lu-99A:人大细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性：贴壁生长
贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。
LNCaP subline C4-2细胞类似产品：：Swiss3T3细胞、SK_HEP1细胞、CHO/dhFr-细胞
BMF细胞类似产品：：TK10细胞、SW 1990细胞、N9细胞
SUD6细胞类似产品：：NCI-H1623细胞、RCS细胞、Walker-256-TC细胞
FHL-124细胞类似产品：：SK-MEL3细胞、SkChA-1细胞、LUDLU1细胞
H-1105细胞类似产品：：UWB1289细胞、Pt K2 (NBL-5)细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞
SW-1417细胞类似产品：：Jurkat FHCRC细胞、NCI-H889细胞、JURKAT E-6.1细胞
LS180细胞类似产品：：SW982细胞、MDA-MB453细胞、Hs 294T细胞
HLF-a细胞类似产品：：TW01细胞、MDAMB330细胞、COLO.205细胞
NCI.H522细胞类似产品：：PG-4 (S+L-)细胞、GM03573A细胞、NS1-1 Ag4.1细胞
H-1373细胞类似产品：：HCO细胞、CHP 212细胞、MCFs细胞
H719细胞类似产品：：CAL-78细胞、MV411细胞、HuT 78细胞
ZR75_1细胞类似产品：：AML193细胞、CCC-ESF-1细胞、RPMI 2650细胞
JurkatE6-1细胞类似产品：：Walker-256-TC细胞、NR8383.1细胞、28SC细胞
hTERT-RPE1细胞类似产品：：Hs821T细胞、STTG1细胞、DR2R 1610细胞
Human Foreskin Fibroblast细胞类似产品：：STC-1细胞、LoMeT-ccRcc细胞、H-1882细胞
HB611细胞类似产品：：HTR8/SVneo细胞、Human Kidney-2细胞、HCFB（HCF）细胞
T84细胞类似产品：：A-2780细胞、KU 812细胞、GTL16细胞
Ha Fe细胞类似产品：：HCC1008细胞、AN3CA细胞、OVCAR.8细胞
PA12细胞类似产品：：R-1059-D细胞、Tadarida brasiliensis 1 lung细胞、EMT-6细胞
U-118 MG细胞类似产品：：DH82细胞、NTHY-ORI3.1细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞
Ls-174-T细胞类似产品：：H87细胞、MC-CAR细胞、RMS13细胞
MonoMac 6细胞类似产品：：MDA-MB-231-luc细胞、LA795细胞、AMC-HN-8细胞
MM-1S细胞类似产品：：C12细胞、Human Embryonic Skin细胞、G 292 Clone A 141B1细胞
HT-22细胞类似产品：：HCC 70细胞、Lewis lung carcinoma line 1细胞、Walker 256细胞
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RBMEC细胞类似产品：：mRTEC细胞、Hs 729细胞、Ramos(RA1)细胞
C57 Mouse Tumor 93细胞类似产品：：Ramos(RA1)细胞、HeLa-229细胞、Sf21细胞
HOS细胞类似产品：：S16细胞、COLO680N细胞、MIA-PaCa-2细胞
H292细胞类似产品：：SNU620细胞、BALB/3T3 clone A31细胞、NCI-H157细胞
Panc04.03细胞类似产品：：NK92细胞、NF639细胞、Rabbit Kidney 13细胞
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CCD-841-CoTr细胞类似产品：：MEF (CF-1)细胞、LS513细胞、HCoEpiC细胞
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Human Epidermoid carcinoma #2细胞类似产品：：HCC1569细胞、NBL-4细胞、NS20Y细胞
SK-NM-C细胞类似产品：：HUVSMC细胞、WM 2664细胞、SO-Rb 50细胞
CL-40细胞类似产品：：HNE-3细胞、HIBEC细胞、NG108-15细胞
U-266细胞类似产品：：EA.hy 926细胞、NCI H508细胞、HCC-1500细胞
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COLO-320-HSR细胞类似产品：：OVCA 433细胞、TERT-RPE1细胞、RPTEC/TERT1细胞
Leukemic 1210细胞类似产品：：NCI-H2108细胞、H-1693细胞、Co320细胞
LK 2细胞类似产品：：MZ-CRC-1细胞、LADMAC细胞、J774 A1细胞
Mono-Mac-1细胞类似产品：：ssMCF7细胞、ATC241细胞、Normal Rat Kidney细胞
Fetal Rhesus Kidney-4细胞类似产品：：IGR-OV1细胞、HOS TE85细胞、LAN-6细胞
D341Med细胞类似产品：：NCI-H2405细胞、U20S细胞、MDA-MB-157细胞
SW 1116细胞类似产品：：WM239A细胞、PF382细胞、MCF-12A细胞
HNTEC细胞类似产品：：MES-SA细胞、NRK clone 52E细胞、MCM细胞
BE(2)M-17细胞类似产品：：P3X63 AG8-653细胞、GM00637B细胞、50.B1细胞
HSAS1细胞类似产品：：hEM15A细胞、NSH细胞、rHSC-99细胞
UMUC-3细胞类似产品：：P388D1细胞、Psi-2 DAP细胞、MOLT 16细胞
HMEC1细胞类似产品：：LTEP-sm 1细胞、PCI-4B细胞、MDA-MB-134 VI细胞
SU-DHL2细胞类似产品：：HCoEpiC细胞、Oka-C1细胞、TMD8细胞
RT4细胞类似产品：：U-118-MG细胞、OLN 93细胞、SVOG细胞
NFS-60细胞类似产品：：Hs-600-T细胞、MeSoTheliOma-211H细胞、293 H细胞
BC3H1细胞类似产品：：T9细胞、OC 316细胞、NS-20Y细胞
GA-10-Clone-4细胞类似产品：：MGH-U3细胞、NCIH2135细胞、SKLMS-1细胞
HOSEpiC细胞类似产品：：Toledo细胞、Hs-27细胞、P-36细胞
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HC11细胞类似产品：：MM6细胞、HEC-251细胞、NUGC4细胞
CAMA-1细胞类似产品：：Human Microglia Clone 3细胞、PC3M-IE8细胞、WERI细胞
PNT1A细胞类似产品：：RPE-1细胞、SKO-007细胞、NCI-H28细胞
WEHI3B细胞类似产品：：OS-732细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞、UMUC-14细胞
SUD6细胞类似产品：：NCI-H1623细胞、QBI-293A细胞、CAL-78细胞
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MV 3细胞类似产品：：MDAMB361细胞、UCLA SO M21细胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1细胞
OVCA 433细胞类似产品：：Japanese Tissue Culture-28细胞、HPAF-II细胞、H-1944细胞
SVG(P12)细胞类似产品：：BPH1细胞、NCI-SNU-886细胞、COLO320-DM细胞
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Jurkat E6细胞类似产品：：JHH-2细胞、P3J-HR-1细胞、MOLM13细胞
F81细胞类似产品：：UPCI-SCC-90细胞、Natural Killer-92细胞、BHK21细胞
HR8348细胞类似产品：：DHL10细胞、LS174T细胞、DMS153细胞
RD-2细胞类似产品：：Hs 675.T细胞、MDA453细胞、MES-13细胞
Hs 840.T细胞类似产品：：SUIT-2细胞、HCC-2279细胞、Human Liver-7702细胞
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C4-I细胞类似产品：：BpRc1细胞、D-341 Med细胞、Hs 888.Lu细胞
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Panc203细胞类似产品：：SCH细胞、HCASMC细胞、Human podocyte细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10细胞类似产品：：NHEK细胞、T-HEECs细胞、SV40-MES13细胞
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PANC-02-03细胞类似产品：：HEK-293-EBNA细胞、MSTO211H细胞、MeWo细胞
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PLB985细胞类似产品：：Pro-5WgaRI3C细胞、P30-OHKUBO细胞、Panc-05.04细胞
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GA-10细胞类似产品：：NIH3T3-L1细胞、HIEC-6细胞、K1细胞
H-1435细胞类似产品：：YD15细胞、H-2135细胞、OCI/AML2细胞
H3255_DA细胞类似产品：：HCS2/8细胞、KPL-4细胞、OCI Ly3细胞
KE-39细胞类似产品：：Hs706T细胞、SUP-B1细胞、T47D:A细胞
NCI-H1838细胞类似产品：：A3细胞、Strain V细胞、B16细胞
Lu-99A:人大细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
HEL-92细胞类似产品：：Hs 737.T细胞、NCIH1184细胞、PT-K75细胞
H2171细胞类似产品：：LS513细胞、293T/17细胞、HSC-4细胞
H-774细胞类似产品：：GM00637细胞、SKNBE细胞、GB-1细胞
LAPC4细胞类似产品：：EVSAT细胞、SNU886细胞、Bovine ENDometrial cells细胞
NCIH1975细胞类似产品：：SW 480细胞、Tb 1 Lu细胞、ME-1 [Human leukemia]细胞
AN-3细胞类似产品：：U373MG细胞、COLO 320细胞、HCM细胞
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