化学发光液（ECL）试剂盒

化学发光液（ECL）试剂盒

一、产品简介。

增强型化学发光试剂（Enhanced Chemiluminescence，ECL）由 A 液和 B 液组成，二者混合后氧化生成辣根过氧化物酶底物，在辣根过氧化物酶的催化作用下产生荧光，且荧光强度与辣根过氧化物酶的含量成正比，常用于 western blot 等实验。

二、运输与存储条件。

本产品低温运输，4 ℃避光保存，有效期 12 个月。

三、特点与优势。

1. 本试剂可以检测到皮克级浓度的蛋白，且背景清晰。

2. 本试剂主要用于中高表达丰度的蛋白检测，经济实惠。

四、使用说明（western blot 显影）。

1. Western blot 实验中孵育完一抗和二抗的 PVDF 膜用 TBST 洗涤 3 次，备用。

2. ECL 工作液配制：根据 PVDF 膜的大小，估算需要的 ECL 工作液体积，将试剂盒中的 A 液与B 液等体积混合，制备 ECL 工作液。

3. ECL 工作液孵育。将 PVDF 膜自 TBST 溶液中取出，用吸水纸吸去过多的液体，置于化学发光仪的底板上，滴加 ECL 工作液，使其覆盖均匀，室温孵育 1-2 min。

4. 显影。将载有 PVDF 膜的底板放入化学发光仪，开启化学发光检测程序，检测不同时间点的荧光强度。

5. 若利用 X 感光片显影，则将孵育完 ECL 的 PVDF 膜置于新的保鲜膜上，包裹妥当，置于暗盒内，压上 X 感光片，曝光一段时间后取出 X 光片，依次放入显影液和定影液，显影。

五、注意事项。

1. 过度曝光会导致蛋白间差异消失，请选择合适的曝光时间。

2. 吸取 A 液和 B 液的过程中必须更换枪头，否则导致二者相互污染，检测效果减弱，最终失效。

3. 请盖紧 A 液与 B 液的瓶盖，特别是 B 液，含有氧化剂，易被还原而失效。

4. ECL 孵育 2 min 后即可检，并尽量在 30 min 内检测完毕，以免荧光衰减导致实验失败。

5. NaN3（叠氮化钠）能抑制辣根过氧化物酶的活性，二抗孵育过程中应避免使用 NaN3。

6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。