"NUGC-3:人胃癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气的,大家争取做到因材施教,比如试试下面的“四步消化法”。(以难消化细胞为例),具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍(目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉)。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况把握)。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
F9细胞类似产品::Roswell Park Memorial Institute 8402细胞、NCI-H2052细胞、A-1847细胞
DU 4475细胞类似产品::WRL68细胞、32D.cl3细胞、K562/ADR细胞
SU-DHL-1细胞类似产品::DU-145细胞、H28细胞、A375-MEL细胞
BDCM细胞类似产品::OCI/AML2细胞、Plaepi 34细胞、SUIT-2细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:详见相关文献介绍
NUGC-3:人胃癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
ECC-10细胞类似产品::LICR-LON-HN6-R细胞、Z138细胞、MDA-MB436细胞
RKO细胞类似产品::WM451Lu细胞、SKML-28细胞、HSC(Human Schwann)细胞
Potorous tridactylus Kidney 1细胞类似产品::Caco-2BBe细胞、Eca-109细胞、H157细胞
细胞传代培养的胰酶消化法:传代培养:是指细胞从一个培养瓶以1:2或1:2以上的比例转移,接种到另一培养瓶的培养。传代细胞,可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代,部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代,或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤:①入无菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒双手;②倒置显微镜下观察细胞形态,确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液37℃下预热;③超净台台面应整洁,用75%酒精棉球擦拭清洁;④打开超净工作台的紫外灯照射台面20min左右,关闭紫外灯,打开风机清洁空气除去臭氧;⑤点燃酒精灯;取出无菌试管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内;⑥将培养用液瓶口用75%酒精消毒,过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上;⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去残留的就培养基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每个大培养瓶加入1ml胰酶,小培养瓶用量酌减,盖HAO瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶,使细胞脱离胰酶,然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鲜培养基,反复吹打消化HAO的细胞使其脱壁并分散,再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成细胞悬液,然后分装到新培养瓶中。盖HAO瓶盖,适度拧紧后稍回转,以利于CO2的进入,将培养瓶放回CO2培养箱;⑩对悬浮培养细胞,步骤7-9不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清,加入新鲜培养基,然后分装到各瓶中。
细胞传代方法:1:6传代
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
NUGC-3:人胃癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁生长
细胞传代后放入培养箱没有摇匀,或者放入时摇匀,但在细胞贴壁前,又移动了培养瓶,频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少,培养箱搁板表面不平整,这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象,大部分悬浮细胞在细胞密度很GAO的情况下,很可能会出现部分细胞抱团生长的现象,聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物,殃及周围的悬浮细胞,因此在培养悬浮细胞时需控制HAO细胞密度。如果出现了细胞团,可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团,也可以尝试一下方法:将细胞悬液收集到15ml离心管中,静置20min左右,小心取上层细胞上清培养(该方法只能去除部分较大的细胞团)。部分细胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐药株等),这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡,则很可能是细胞状态不佳,可以通过调整血清浓度,控制消化,控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态;如果大部分细胞出现空泡,且单个细胞内空泡数目偏多,则可能细胞代次较GAO,细胞老化所致,需更换代次较早的细胞。
MB39细胞类似产品::Mc Ardle 7777细胞、JROECL 19细胞、NIH-3T3-L1细胞
C32r细胞类似产品::NB19细胞、HEI193细胞、SF763细胞
NCM-460细胞类似产品::H-2227细胞、H-220细胞、Roswell Park Memorial Institute 8226细胞
Hmy.2 CIR细胞类似产品::Balb/c3T3细胞、NE1细胞、KYSE 450细胞
HN13细胞类似产品::16-HBEo细胞、B16 F10细胞、R 1610细胞
MOLT-16细胞类似产品::T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞、HT 144细胞、NCIH1437细胞
BRL-3A细胞类似产品::Calu-6细胞、Hi5细胞、KM.12细胞
CHO/dhFr-细胞类似产品::MDBK细胞、NOK细胞、HT 115细胞
SKRC-39细胞类似产品::H1155细胞、SPDC-CCL141细胞、MOLT-3细胞
PA1细胞类似产品::Nb2a细胞、EJ-1细胞、K-562细胞
BEL-7405细胞类似产品::H-1793细胞、OSKM-1细胞、Kit225/K6细胞
BCP1细胞类似产品::M4e细胞、SK-CO-1细胞、IOSE29细胞
AML12细胞类似产品::MC-3T3-E1细胞、PIG3细胞、Panc-08.13细胞
PC-14细胞类似产品::SW 982细胞、DV90细胞、C33A细胞
L615细胞类似产品::GM02132C细胞、KOSC-2细胞、Earles's cells细胞
C8161细胞类似产品::H1238细胞、H196细胞、FO [Mouse myeloma]细胞
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H-322细胞类似产品::LOU-NH91细胞、NCI-H125细胞、KLM1细胞
CCRF细胞类似产品::EC9706细胞、SP2/0 Ag-14细胞、EA hy 926细胞
MDAMB157细胞类似产品::MRC-V细胞、H-596细胞、no-11细胞
MIN6细胞类似产品::NCIH1568细胞、10RGB细胞、LS 123细胞
PT67细胞类似产品::CWR22Rv1细胞、OCILY3细胞、CCD841CoN细胞
BHP-10细胞类似产品::SK-Mel 2细胞、FCCH1018细胞、OE33细胞
LIXC-002细胞类似产品::B4G12细胞、MRC9细胞、M059J细胞
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COS-7细胞类似产品::U-87MG细胞、HS-695T细胞、TE-9细胞
COLO-679细胞类似产品::TE-6细胞、H283细胞、3T3-442A细胞
143B TK-细胞类似产品::GM03571细胞、MH-22a细胞、SK RC 52细胞
SAOS 2细胞类似产品::EO771细胞、SU.86细胞、Toledo细胞
JIMT-1细胞类似产品::TFK1细胞、H-1568细胞、BJA-B细胞
FO [Mouse myeloma]细胞类似产品::P31/Fujioka细胞、Colo16细胞、MHH-CALL-2细胞
alpha-TC1-6细胞类似产品::SW-527细胞、CTV-1细胞、SLK细胞
Potorous tridactylus Kidney 2细胞类似产品::KYSE30细胞、RCC 7860细胞、Farage细胞
WIL2 Secreting细胞类似产品::H-441细胞、SNU-1细胞、Human fetal lung fibroblast 1细胞
NIH:OVCAR-4细胞类似产品::HTori:3细胞、HLE-B3细胞、ECC-1细胞
SKBR-3细胞类似产品::RPMI 1846细胞、NCIH2085细胞、RT-BM-1细胞
NCIH209细胞类似产品::LA-N-5细胞、Capan 1细胞、VE细胞
PaCa2细胞类似产品::NTera-2D1细胞、118MG细胞、OCILY19细胞
Adult Retinal Pigment Epithelial cell line-19细胞类似产品::Mono Mac 6细胞、HOS-MNNG细胞、LN-229细胞
NK 10a细胞类似产品::NCIH1734细胞、alpha TC1.6细胞、MPP-89细胞
U266细胞类似产品::MV-4-11细胞、H1993细胞、AZ-521细胞
GM07404A细胞类似产品::SNU407细胞、HTori-3细胞、CTLL(2)细胞
SUPB-15细胞类似产品::CCD-841-CoN细胞、HCT-8细胞、NCI-H446细胞
H1373细胞类似产品::Opossum Kidney细胞、SUP-T1细胞、JEKO细胞
GMK,BSC-1细胞类似产品::TE 85 ClF-5细胞、HEK-AD293细胞、HARA-B细胞
159 PT细胞类似产品::T2细胞、H526细胞、HCC1937细胞
SW 1990细胞类似产品::MLE12细胞、NB19细胞、R2C细胞
SCC VII细胞类似产品::AN3-CA细胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2细胞、MFE296细胞
SkMel31细胞类似产品::CWR22R-V1细胞、LS-174细胞、32D:cl3细胞
VERO C 1008细胞类似产品::IMCD3细胞、FDCP-1细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞
SV40 MES 13细胞类似产品::DITNC1细胞、OCI-Ly 10细胞、HCC-95细胞
Hs-606-T细胞类似产品::SKES1细胞、NCIH1838细胞、LP-1细胞
CAL78细胞类似产品::MFE-296细胞、Hs 737.T细胞、OEC19细胞
SK-MES1细胞类似产品::G519细胞、MCF7-CTRL细胞、MB468细胞
526细胞类似产品::SK-RC-52细胞、LUDLU-1细胞、H548细胞
HT55细胞类似产品::SUM 159PT细胞、UM-UC-14细胞、ML-2细胞
MES-SA Dx5细胞类似产品::Hs294细胞、HSC6细胞、C-33 A细胞
P31 FUJ细胞类似产品::MDA-MB453细胞、PAMC82细胞、NT2/D1细胞
SKNSH细胞类似产品::OVCAR 432细胞、Pfeiffer细胞、AR41P细胞
CAL 148细胞类似产品::TPC-1细胞、SNK-1细胞、HRA-19细胞
Panc 8.13细胞类似产品::BC-3H-1细胞、Henrietta Lacks cells细胞、WERI Rb-1细胞
H209细胞类似产品::HN6细胞、Cates-1B细胞、NPC-TW039细胞
NCM-460细胞类似产品::H-2227细胞、CHP126细胞、EJ细胞
HuH-6细胞类似产品::CEM-C7细胞、4-1st细胞、M-1 myeloid leukemia细胞
HCM细胞类似产品::HEK-AD293细胞、AG 9细胞、WIL2-S细胞
OCI AML2细胞类似产品::MKN-45细胞、SUNE1细胞、GM00346B细胞
OVCAR10细胞类似产品::U 937细胞、LS-180细胞、SAOS 2细胞
FRhK-4细胞类似产品::IEC-18细胞、EA hy 926细胞、WEHI-164细胞
MES 23.5细胞类似产品::C2A细胞、Mono Mac6细胞、P3/ag细胞
NCI-SNU-C2A细胞类似产品::SU 86.86细胞、TE4细胞、TE4细胞
HCM细胞类似产品::HEK-AD293细胞、AG 9细胞、WIL2-S细胞
EOL1细胞类似产品::H-2126细胞、NCI-SNU-475细胞、CMT.64细胞
KOSC-2 cl3-43细胞类似产品::Calu6细胞、MDCC-MSB1细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞
CoC1细胞类似产品::D324细胞、L540细胞、74Int细胞
NCI-SNU-1040细胞类似产品::DHL-2细胞、NIE 115细胞、H-1417细胞
HOCF细胞类似产品::Psi2-DAP细胞、RPMI1788细胞、Clone Y1细胞
U-hth74细胞类似产品::MEL-526细胞、HuT-78细胞、P3HR1细胞
OCI Ly1细胞类似产品::NCIH1437细胞、P3X63 Ag8.653细胞、SUDHL-2细胞
MUGCHOR1细胞类似产品::no.11细胞、HCCC-9810细胞、WIL2S细胞
MES-SA/Dx-5细胞类似产品::RS1细胞、HEK 293T/17细胞、HSCT6细胞
OCI-Ly01细胞类似产品::Hs 578Bst细胞、COLO 699细胞、E6-1细胞
RPMI6666细胞类似产品::CCRF/CEM-C7细胞、MPP89细胞、DH 82细胞
HCC-366细胞类似产品::NCIH2591细胞、A 549细胞、LC-1细胞
HCC-366细胞类似产品::NCIH2591细胞、A 549细胞、LC-1细胞
GA-10(Clone 4)细胞类似产品::hTERTHME1细胞、UCH1细胞、MKN-45细胞
KP2细胞类似产品::Hs832.Tc细胞、PAa细胞、NRCC细胞
HO-8910PM细胞类似产品::3T6细胞、TYKnu细胞、T98G细胞
X63-Ag8-653细胞类似产品::CemT4细胞、C-4-I细胞、NCIH1155细胞
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32D clone 3细胞类似产品::A875细胞、MDA231-LM2细胞、N-9细胞
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HAEC细胞类似产品::Baby Hamster Kidney 21细胞、A-72细胞、DU4475细胞
BE2C细胞类似产品::H.Ep.-2细胞、DLD1细胞、LA4细胞
SUDHL1细胞类似产品::GC-1 spg细胞、ZR7530细胞、Huh 7.5.1细胞
NUGC-3:人胃癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
REC 1细胞类似产品::HCC-4006细胞、U266B1细胞、HOS (TE85, Clone F5)细胞
Sp2/mIL-6细胞类似产品::MDAPCa2b细胞、WM239A细胞、UCLA RO-81-A-1细胞
NCI-H838细胞类似产品::hTERT-RPE-1细胞、R1610细胞、Okayama University Medical School-23细胞
BSC-1细胞类似产品::COV 504细胞、Tn5B1-4细胞、RBMVEC细胞
JJN-3细胞类似产品::HOC1细胞、CW2细胞、UMUC14细胞
Cloudman M3细胞类似产品::Dami细胞、Hs600T细胞、H1650细胞
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