"COLO 741:人直肠癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37℃消化。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化HAO了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常HAO,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个性。如果和标准形态不一致,那可能是自己没消化HAO导致的,但如果消化方法正确,仍然成片分布,甚至完全吹打成单细胞悬液,贴壁后仍然成片分布,这是细胞的性,是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布,你的细胞之后会对你越来越不HAO。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
SW480细胞类似产品::HPAEpiC细胞、SK-LMS-1细胞、TK-1细胞
87 MG细胞类似产品::Hs888 Lu细胞、KU.812细胞、HSC-T6细胞
SK N SH细胞类似产品::MDCC MSB1细胞、Hopkins-92细胞、H-1341细胞
H1882细胞类似产品::HONE1细胞、L cell细胞、LY细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:详见相关文献介绍
COLO 741:人直肠癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
HMy2.CIR细胞类似产品::P3X63 Ag8.653细胞、OCI/AML3细胞、MC-38细胞
SW-1271细胞类似产品::HeLa/S3细胞、HEK293T/17细胞、DLD 1细胞
COLO 320F细胞类似产品::G-402细胞、IAR-20细胞、Immortalized Human Hepatocytes细胞
细胞传代培养的胰酶消化法:传代培养:是指细胞从一个培养瓶以1:2或1:2以上的比例转移,接种到另一培养瓶的培养。传代细胞,可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代,部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代,或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤:①入无菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒双手;②倒置显微镜下观察细胞形态,确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液37℃下预热;③超净台台面应整洁,用75%酒精棉球擦拭清洁;④打开超净工作台的紫外灯照射台面20min左右,关闭紫外灯,打开风机清洁空气除去臭氧;⑤点燃酒精灯;取出无菌试管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内;⑥将培养用液瓶口用75%酒精消毒,过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上;⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去残留的就培养基,或用少量胰酶涮洗一下;⑧每个大培养瓶加入1ml胰酶,小培养瓶用量酌减,盖HAO瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶,使细胞脱离胰酶,然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中;⑨加入少量的含血清的新鲜培养基,反复吹打消化HAO的细胞使其脱壁并分散,再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成细胞悬液,然后分装到新培养瓶中。盖HAO瓶盖,适度拧紧后稍回转,以利于CO2的进入,将培养瓶放回CO2培养箱;⑩对悬浮培养细胞,步骤7-9不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清,加入新鲜培养基,然后分装到各瓶中。
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
COLO 741:人直肠癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁生长
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
DMS 79细胞类似产品::SH-SY5Y Parental细胞、Cates-1B细胞、HN6细胞
OCI/AML5细胞类似产品::ACC3细胞、Panc 8.13细胞、B16 F10细胞
PL 45细胞类似产品::RK 13细胞、HC-11细胞、Human Embryo Lung-1细胞
OCI-Ly 8细胞类似产品::K562/ADP细胞、MOLT3细胞、MDA-MB-436细胞
McA-RH7777细胞类似产品::H-1373细胞、SUM-149细胞、SMC-1细胞
RWPE1细胞类似产品::Walker-256细胞、mIMCD3细胞、P3-X63-Ag8.653细胞
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P3-X63-Ag8.653细胞类似产品::IMR 32细胞、SMMC 7721细胞、HCC-15细胞
Sf-21细胞类似产品::KAT5细胞、MiaPaca.2细胞、PC10细胞
SW.620细胞类似产品::GM-215细胞、MCCAR细胞、SK-NMC细胞
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NKL细胞类似产品::Kobe university Oral Squamous Cell culture-2细胞、C4-2 B细胞、SW 1222细胞
EHEB细胞类似产品::KYSE-270细胞、SK-N-DZ细胞、Rh30细胞
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TE11细胞类似产品::Lung cancer-1/squamous细胞、OUMS-27细胞、U2OS细胞
Mino细胞类似产品::EoL-1-cell细胞、LM6细胞、RPMI.8226细胞
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H1299细胞类似产品::C-4-I细胞、Jurkat细胞、T8细胞
MALME.3M细胞类似产品::P3J细胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]细胞、SP-2细胞
JKT-1细胞类似产品::HEYA8细胞、NCI-SNU-449细胞、HCC0366细胞
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CORL51细胞类似产品::H1299细胞、CF Pac1细胞、Hs746-T细胞
RPMI-7951细胞类似产品::HDQP1细胞、SBC-3细胞、TC-1 [Mouse lung]细胞
NeHepLxHT细胞类似产品::SNU-C2A细胞、SLMT1细胞、SNU449细胞
Sup T-1细胞类似产品::NTERA-2 cl.D1细胞、MC116细胞、SK-MEL-MeWo细胞
CHP 100细胞类似产品::PANC3.27细胞、RWPE-1细胞、Hs-611-T细胞
LAD 2细胞类似产品::GC-1细胞、SN4741细胞、Hs 746T细胞
Oregon J-111细胞类似产品::RGC6细胞、hTERT-HME1细胞、ARIP细胞
SK-N-FI细胞类似产品::Tb 1 Lu细胞、P3/X63/Ag8细胞、MCF 10A细胞
V79-4细胞类似产品::LAN5细胞、Tissue Culture-1细胞、HPAFII细胞
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NCI-H3255细胞类似产品::CATH-a细胞、SUM-159PT细胞、NCIH661细胞
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PL 45细胞类似产品::RK 13细胞、D-324MED细胞、HPAF-II/CD18细胞
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NCI-H1155细胞类似产品::H-146细胞、MDCK-II细胞、RSMC细胞
PF-382细胞类似产品::HuT-102细胞、Hs888 Lu细胞、SNU-398细胞
Medical University of Graz-Chordoma 1细胞类似产品::HEH2细胞、CA46细胞、B95-8细胞
Swiss-3T3细胞类似产品::H-1688细胞、Capan2细胞、HCC1395细胞
NRK 49F细胞类似产品::MCA205细胞、YAC-1细胞、T-CAM2细胞
CTLL(2)细胞类似产品::KU-19-19细胞、SLMT-1细胞、MC9细胞
TE 85 ClF-5细胞类似产品::IGROV细胞、Neuro 2a细胞、NCI-SNU-886细胞
130 T细胞类似产品::H2106细胞、3396细胞、MDAMB231细胞
BNL.1ME A.7R.1细胞类似产品::NCI-H740细胞、NCI-SNU-C1细胞、3T3-Swiss albino细胞
C8-D1A细胞类似产品::MN9D细胞、CCRF CEM细胞、CSQT-2细胞
OCI-Ly03细胞类似产品::L929细胞、A-253细胞、MC/9细胞
NCIH292细胞类似产品::HS 683T细胞、Beta-TC-6细胞、BRL细胞
Vero E-6细胞类似产品::OCI-AML4细胞、T84细胞、Walker/LLC-WRC 256细胞
NL20SV细胞类似产品::MA-c细胞、NCI-SNU-398细胞、Jiyoye细胞
Centre Antoine Lacassagne-27细胞类似产品::MDA435细胞、HIT-T15细胞、C17.2细胞
C57 Mouse Tumor 64细胞类似产品::BALB/3T3细胞、MDAPCa2b细胞、RT-4细胞
Cloudman S91 melanoma细胞类似产品::COLO 206细胞、CAL39细胞、NCI-522细胞
HD-LM-2细胞类似产品::EOC 20细胞、GM04679细胞、FU-MMT-1细胞
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细胞
Panc_04_03细胞类似产品::YD38细胞、J 111细胞、SNU-739细胞
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KYSE70细胞类似产品::TF-1细胞、H-1838细胞、52PE细胞
COLO 741:人直肠癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
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HSCT6细胞类似产品::LSECs细胞、BI-Mel细胞、SVGp12细胞
MESSADX5细胞类似产品::MALME 3M细胞、CHL/IU细胞、P3-X63.Ag8.653细胞
3T3-442A细胞类似产品::SK-MEL-MeWo细胞、PANC 327细胞、RKO-AS45-1细胞
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