"KP4:人胰腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长：贴壁
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
HuCC-T1细胞类似产品：：HOP 62细胞、P3HR1-BL细胞、H-209细胞
Pa16C细胞类似产品：：F9细胞、Panc02-H0细胞、HO-8910 PM细胞
HCT-8/V细胞类似产品：：DR2R 1610细胞、B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1细胞、TCCSUP细胞
A2780CP70细胞类似产品：：P3 NS1 Ag4/1细胞、THLE2细胞、B16 melanoma细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
细胞背景资料：详见相关文献介绍
KP4:人胰腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态：上皮细胞样
As-PC1细胞类似产品：：MDA-MB-435-S细胞、U373细胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)细胞
LPC-H12细胞类似产品：：SK-RC 42细胞、MCF7/WT细胞、Kuramochi细胞
TE-85细胞类似产品：：Calf Pulmonary Artery 47细胞、MDCK Type II细胞、COLO-320细胞
细胞培养无菌操作的演示：凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用７５％酒精擦拭瓶子的外表面；靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌，继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在GAO处，使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯，动作要轻、准确，不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管，防止交叉污染。玻璃器械洗消：一、新的玻璃器皿的洗消：自来水刷洗，除去灰尘。烘干、泡：烤箱中烘干，然后再浸入５％稀中１２小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干：１２小时后立即用自来水冲洗，再用洗涤剂刷洗，自来水冲干净后用烤箱烘干；泡酸、清洗：用清洁液浸泡１２小时，然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗１５次，Zui后蒸馏水冲洗３-５次和用双蒸水过３次。烘干、包装：洗干净后先烘干，然后用牛皮纸(油光纸)包装。GAO压消毒：包装HAO的器皿装入GAO压锅内盖HAO盖子，打开开关和安全阀，当蒸气成直线上升时，关闭安全阀，当指针指向１５磅时，维持２０-３０分钟。GAO压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消：刷洗、烘干：使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中，泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净，然后烘干。泡酸、清洗：烘干后泡入清洁液(酸液)，１２小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗)，再用蒸馏水冲洗３次。烘干、包装：洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
KP4:人胰腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性：贴壁生长
贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。
HCC1954-BL细胞类似产品：：HEK-A细胞、SK-MEL-3细胞、MyLa 2059细胞
Malme-3M细胞类似产品：：NCI-H920细胞、HEK-EBNA细胞、Hs 343.T细胞
Hep G2/C3A细胞类似产品：：HeLa-229细胞、GM05887细胞、SK-MEL28细胞
H35细胞类似产品：：OV 2008细胞、6T-CEM细胞、OVCAR8细胞
TOV21细胞类似产品：：H-1563细胞、MDA-231细胞、OCI-Ly18细胞
SW-527细胞类似产品：：293E细胞、Capan-1细胞、PASMCS细胞
MDA-MB-435-S细胞类似产品：：Kit225-K6细胞、NTERA2D1细胞、Hs 737.T细胞
BCP-1细胞类似产品：：P3X63Ag8-6-5-3细胞、High-5细胞、H-810细胞
C-Lu-65细胞类似产品：：CMT-167细胞、AU565细胞、RH7777细胞
J82 COT细胞类似产品：：TE-1细胞、Namalva细胞、NCIH196细胞
TSU-Pr1细胞类似产品：：H1568细胞、COLO-829细胞、R.K.13细胞
SKMEL-31细胞类似产品：：NOMO1细胞、EST81细胞、b.End3细胞
VK2/E6E7细胞类似产品：：ESC细胞、H660细胞、C17细胞
BNL.1ME A.7R.1细胞类似产品：：NCI-H740细胞、NCI-SNU-C1细胞、3T3-Swiss albino细胞
T241细胞类似产品：：JeKo 1细胞、VMCUB1细胞、MRC5细胞
NCI.H226细胞类似产品：：HEC1-B细胞、5-8F细胞、NCI H508细胞
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C-4-I细胞类似产品：：Capan2细胞、beta-TC6细胞、Jijoye细胞
MDAMB435细胞类似产品：：NCIH647细胞、PTK1细胞、UACC 812细胞
HS766T细胞类似产品：：CTLL(2)细胞、HMO6细胞、PZ-HPV-7细胞
Ketr3细胞类似产品：：HRA19细胞、VE细胞、RPMI7666细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468细胞类似产品：：YH-13细胞、SLK细胞、NCIH1869细胞
L6细胞类似产品：：SKCO 1细胞、DU4475细胞、Michigan Cancer Foundation-12F细胞
T98G细胞类似产品：：RS4:11细胞、130T细胞、NSI/1-Ag4-1细胞
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NCIH889细胞类似产品：：LS180细胞、SK-HEP-1细胞、FHL 124细胞
N-87细胞类似产品：：108CC15细胞、Hs 895 T细胞、KYSE 520细胞
FF-WT-BJ细胞类似产品：：hTERT-HPNE细胞、R 2 C细胞、H-4细胞
NCTC 1469细胞类似产品：：WiDrTC细胞、Rat Glomerular Endothelial细胞、HCC-1171细胞
LAPC4细胞类似产品：：EVSAT细胞、SNU886细胞、Bovine ENDometrial cells细胞
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CAL148细胞类似产品：：Hs895T细胞、QG-56细胞、SKOV-433细胞
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HEK/293细胞类似产品：：VMM5A细胞、Human Corneal Epithelial cells-Transformed细胞、L-M[TK-]细胞
MARC145细胞类似产品：：FRH-0201细胞、IPLB-SF-21-AE细胞、HCC2157细胞
Earle's L cells细胞类似产品：：MGECs细胞、NCI-SNU-620细胞、JHH7细胞
L-5178-Y细胞类似产品：：Clone 929细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、GM03569D细胞
NCI-H28细胞类似产品：：Nittby-Salford 1细胞、L929(NCTC)细胞、H774细胞
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W133细胞类似产品：：HN 4细胞、UPCISCC090细胞、Sp2/0细胞
NBL-1细胞类似产品：：LC-1 sq细胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞、KU19-19细胞
3D4/21细胞类似产品：：32D CL3细胞、MNNG/HOS Cl #5细胞、TFH细胞
Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞类似产品：：HeLa S-3细胞、RPMI-8402细胞、G-Olig2细胞
Factor Dependent Cell-Paterson 1细胞类似产品：：HeLa S-3细胞、RPMI-8402细胞、G-Olig2细胞
Tu177细胞类似产品：：CMT64细胞、Mhh-Call 2细胞、HPDE细胞
HTh 74细胞类似产品：：MDA-MB-415细胞、GM00637细胞、IOSE-Mar细胞
SNK1细胞类似产品：：H1882细胞、NCI-H847细胞、Human Hepatocyte Line 5细胞
HCC-1438细胞类似产品：：LN229细胞、PA I细胞、BpRcl细胞
HPF细胞类似产品：：2B4-L细胞、SVHUC细胞、Hepatoma-22细胞
H9c2(2-1)细胞类似产品：：MFE296细胞、PLCPRF5细胞、HCC0044细胞
CTLA4Ig-24细胞类似产品：：HEK293-H细胞、NCTC-929细胞、A2008细胞
LK 2细胞类似产品：：MZ-CRC-1细胞、LADMAC细胞、J774 A1细胞
IMCD3细胞类似产品：：P560细胞、MKN-1细胞、NCI-H2052细胞
Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4细胞类似产品：：Hs 294T细胞、U-118MG细胞、HNE-1细胞
HLEC-B3细胞类似产品：：MOLT 16细胞、BN-CL2细胞、MTEC1细胞
Duke University 4475细胞类似产品：：SUM-190PT细胞、EM3细胞、CMT64细胞
95-D细胞类似产品：：Line 870 Emory University-4细胞、SHP77细胞、SCI1细胞
A-172细胞类似产品：：SK Mel 2细胞、Calu-3细胞、COLO-320-HSR细胞
RPMI-8226细胞类似产品：：Human Epithelioma-2细胞、P31/Fujioka细胞、X63.Ag8.653细胞
Hep 3B细胞类似产品：：Factor Dependent Continuous-Paterson 1细胞、NT2D1细胞、HDLM2细胞
HR-1细胞类似产品：：HEK293F细胞、Walker-256-TC细胞、SNU638细胞
SPC-A1细胞类似产品：：H548细胞、NCIH1793细胞、HMEC-1细胞
8305C_1细胞类似产品：：NCI-H2087细胞、P-815细胞、H345细胞
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NCI-H125细胞类似产品：：J82COT细胞、SKMEL28细胞、HT144-mel细胞
WC00079细胞类似产品：：A549ATCC细胞、MKN74细胞、D 407细胞
HD11细胞类似产品：：GM05887细胞、RPMI-6666细胞、SKNDZ细胞
H2108细胞类似产品：：MES-13细胞、H-2405细胞、NCIH69细胞
KTCTL-140细胞类似产品：：C518细胞、COLO 684细胞、H-1954细胞
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CEK细胞类似产品：：BEAS 2B细胞、HS 445T细胞、Calu-1细胞
MDAMB134VI细胞类似产品：：R2C细胞、HCC0015细胞、RPMI 1846细胞
HDQP1细胞类似产品：：Tissue Culture-1细胞、HuP-T4细胞、Ect1/E6E7细胞
P3X63细胞类似产品：：GM3570细胞、L6565细胞、TE 354.T细胞
P3X63细胞类似产品：：GM3570细胞、L6565细胞、TE 354.T细胞
NK-92MI细胞类似产品：：SLMT1细胞、SUPB-15细胞、NCI-SNU-407细胞
RPMI-8226S细胞类似产品：：RCSMC细胞、C32 mel细胞、HT115细胞
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OCILY-19细胞类似产品：：HLEB3细胞、SUM149细胞、CV-1细胞
NCI-SNU-761细胞类似产品：：293细胞、KM12细胞、SNU-182细胞
Fao细胞类似产品：：RPMI #8226细胞、Keio University-19-19细胞、BEL 7402细胞
LNT-229细胞类似产品：：H1435细胞、MAVER-1细胞、C-33A细胞
H2126细胞类似产品：：AMC-HN-8细胞、NCI-HUT-520细胞、K562/ADP细胞
NKM1细胞类似产品：：ECC 10细胞、RD-2细胞、766T细胞
NCI-SNU-C2B细胞类似产品：：X63-Ag8细胞、SUM 52细胞、GL261细胞
RPMI 6666细胞类似产品：：TOV-112细胞、Fetal Human Colon细胞、NCI-H1437细胞
HCC-1833细胞类似产品：：Menschliche Und Tierische Zellkulture-1细胞、Panc 5.04细胞、HOCF细胞
KP4:人胰腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
MUTZ-1细胞类似产品：：SKM1细胞、HEK293-EBNA细胞、HIT-T15细胞
OV-2008细胞类似产品：：IPAM-WT细胞、MHCCLM3细胞、R1610细胞
NCI-H1417细胞类似产品：：KTCTL-140细胞、SNU-620细胞、HuT78细胞
NHLF细胞类似产品：：149PT细胞、A-1847细胞、Anglne细胞
HT 1197细胞类似产品：：RFL 6细胞、HEK293-FT细胞、IALM细胞
SuDHL 8细胞类似产品：：ACC-M细胞、Duck embryo细胞、SK-MEL-28细胞
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