"RKN:人卵巢癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
冻存和复苏的原则:慢冻快融》当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升GAO,并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序:采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时,1~2℃/min;当温度达-25℃以下时,5~10℃/min;当温度达-100℃时,可迅速放入液氮中。2.简易程序:将冷冻管(管口要朝上)放入纱布袋内,纱布袋系以线绳,通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口,按每分钟温度下降1~2℃的速度,在40min内降至液氮表面过夜,次晨投人液氮中。3.传统程序:冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。细胞冻存方法:1.预先配制冻存液》(1)8%DMSO+细胞生长液(92%血清)2.取对数生长期细胞,经胰酶消化后,加入适量冻存液,用吸管吹打制成细胞悬液(1×10(6)~5×10(6)细胞/ml)。3.加入1ml细胞于冻存管中,密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法:1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,轻轻摇动冷冻管,使其在1分钟内全部融化(不要超过3分钟)。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养,24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液,以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂,然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HEI-193细胞类似产品::HNSC细胞、NIH:OVCAR-5细胞、NCI-H1819细胞
OCIAML4细胞类似产品::NG10815细胞、A2780/Taxol细胞、3T3 clone A31细胞
U-87-MG细胞类似产品::MFHL-2细胞、A375细胞、T98 G细胞
A2780细胞类似产品::RMG1细胞、Sf21细胞、CCD 841 CoTr细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:详见相关文献介绍
RKN:人卵巢癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
PATU-S细胞类似产品::SHZ-88细胞、NCI-460细胞、SW620细胞
RFL6细胞类似产品::HT-1197细胞、CAKI.1细胞、COLO 738细胞
MH-S细胞类似产品::Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1细胞、PC12(高分化)细胞、KE39细胞
细胞培养无菌操作的演示:凡是带入超净工作台内的酒精、PBS、培养基、胰蛋白酶的瓶子均要用75%酒精擦拭瓶子的外表面;靠近酒精灯火焰操作。器皿使用前必须过火灭菌,继续使用的器皿(如瓶盖、滴管)要放在GAO处,使用时仍要过火。各种操作要靠近酒精灯,动作要轻、准确,不能乱碰。如吸管不能碰到废液缸。吸取两种以上的使用液时要注意更换吸管,防止交叉污染。玻璃器械洗消:一、新的玻璃器皿的洗消:自来水刷洗,除去灰尘。烘干、泡:烤箱中烘干,然后再浸入5%稀中12小时以除去脏物、铅、等物。刷洗、烘干:12小时后立即用自来水冲洗,再用洗涤剂刷洗,自来水冲干净后用烤箱烘干;泡酸、清洗:用清洁液浸泡12小时,然后从酸缸内捞出器皿用自来水冲洗15次,Zui后蒸馏水冲洗3-5次和用双蒸水过3次。烘干、包装:洗干净后先烘干,然后用牛皮纸(油光纸)包装。GAO压消毒:包装HAO的器皿装入GAO压锅内盖HAO盖子,打开开关和安全阀,当蒸气成直线上升时,关闭安全阀,当指针指向15磅时,维持20-30分钟。GAO压消毒后烘干。二、旧的玻璃器皿的洗消:刷洗、烘干:使用过的玻璃器皿可直接泡入来苏尔液或洗涤剂溶液中,泡过来苏尔溶液(洗涤剂)的器皿要用清水刷洗干净,然后烘干。泡酸、清洗:烘干后泡入清洁液(酸液),12小时后从酸缸内捞出器皿立即用自来水冲洗(避免蛋白质干涸后粘附于玻璃上难以清洗),再用蒸馏水冲洗3次。烘干、包装:洗干净的器皿烘干后取出用牛皮纸(油光纸)等包装。
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
RKN:人卵巢癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁生长
一般使用trypsin-EDTA 浓度为0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液浓度过GAO时,易造成培养基中细胞碎片增多,黑渣子增多,常规细胞传代时建议用0.05%的胰酶进行消化,对于难消化的细胞可采用0.25%胰酶进行消化,细胞密度过GAO超过80%时,采用分步消化法。胰酶储存在-20°C,解冻在4°C进行,次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于-20°C,避免反复冷冻解冻造成trypsin之活性降低,并可减少污染之机会。胰酶消化的程度是细胞培养中的一个关键步骤:消化过度细胞碎片增多,黑渣子增多,细胞会成片脱落,严重影响细胞活性,并有部分细胞漂浮,随弃去的胰酶流失;消化不足则细胞难于从瓶壁上吹下,反复吹打同样也会损伤细胞活性。不同细胞对消化液的敏感性不同,胰酶消化的时间也会有差异。胰酶消化时间与胰酶的浓度,是否含EDTA,胰酶的储存时间,胰酶的储存温度,是否反复冻融,消化加入的胰酶体积,消化温度及细胞的密度有关。对于新购买的细胞,建议客户先用低浓度的胰酶仔细去摸索一下消化时间,可每隔1分钟镜下观察细胞是否变圆,记录Zui佳消化时间,下一次操作参考之前的记录来控制时间即可。
SK Mel 2细胞类似产品::VK2细胞、H.Ep. No. 2细胞、GH3细胞
SNU484细胞类似产品::Hs819T细胞、NCIH64细胞、OV-2008细胞
RK-13细胞类似产品::CALU 1细胞、Hep II细胞、MES-23.5细胞
Walker-Ca.256细胞类似产品::Tu 177细胞、WSU-DLCL(2)细胞、KNS42细胞
RMG1细胞类似产品::MFE-280细胞、NCI-H2110细胞、H82sclc细胞
HEK 293-F细胞类似产品::TR 146细胞、Chang liver细胞、RPMI No. 1846细胞
RIN-m细胞类似产品::MOLM-13细胞、DMS 53细胞、BMU-S1细胞
CCRF.CEM细胞类似产品::OCIAML2细胞、SUDHL-16细胞、Hs 688(A).T细胞
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LK 2细胞类似产品::MZ-CRC-1细胞、LADMAC细胞、J774 A1细胞
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SW1573细胞类似产品::JEKO细胞、MOLM-16细胞、Hs1.Tes细胞
MDA415细胞类似产品::H2135细胞、A 375细胞、HPDLF细胞
SKN-SH细胞类似产品::Hs606细胞、GOS-3细胞、B16-F0细胞
HCV-29细胞类似产品::E.L.4细胞、NCI-H-295细胞、Hmy.2 CIR细胞
HS-683细胞类似产品::HTori3细胞、OK-WT细胞、HCC 38细胞
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KLN205细胞类似产品::HeLa S 3细胞、ES-2细胞、H9c2 (2-1)细胞
MDCK细胞类似产品::SK-BR-3细胞、PNEC30细胞、293/EBNA-1细胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞类似产品::H-810细胞、KAT-5细胞、MB39细胞
CCRF.CEM细胞类似产品::OCIAML2细胞、SUDHL-16细胞、Hs 688(A).T细胞
B6Tert-1细胞类似产品::CEM-0细胞、EL4细胞、SNT8细胞
SNU-119细胞类似产品::HL7702细胞、IBRS2细胞、PaCa2细胞
SGC-996细胞类似产品::Hs 604.T细胞、HCET细胞、LAN1细胞
RKN:人卵巢癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
NBL-2细胞类似产品::NPC-039细胞、Farage Original Line细胞、EFM192B细胞
RCC-JF细胞类似产品::HUVEC-C[HUVEC]细胞、T47D细胞、EFM19细胞
RCC-JF细胞类似产品::HUVEC-C[HUVEC]细胞、T47D细胞、EFM19细胞
Caki-2细胞类似产品::SK-Mel 1细胞、B16-F10-BL6细胞、MPVECs细胞
SVOG细胞类似产品::Panc-1-P细胞、HCC94细胞、B10BR细胞
WM115-mel细胞类似产品::L-Wnt3A细胞、SK-MES1细胞、Pt K1细胞
Mono-Mac-1细胞类似产品::ssMCF7细胞、ATC241细胞、Normal Rat Kidney细胞
LA-4 [Mouse lung adenoma]细胞类似产品::H2347细胞、DSL-6A-C1细胞、RIMEC细胞
NCIH2110细胞类似产品::CL1.0细胞、SK-N-BE(1)细胞、LA 4细胞
H87细胞类似产品::LNCaP-ATCC细胞、HEK293F细胞、RC-2细胞
Ramos (RA 1)细胞类似产品::hESC细胞、K7M2 wt细胞、SW-1990细胞
RMC-1细胞类似产品::VM-CUB-I细胞、LC-1-sq细胞、HuT102细胞
LICR-LON-HN6细胞类似产品::NW-38细胞、HOP-62细胞、H2023细胞
MDA231-LM2-4175细胞类似产品::CSQT-2细胞、Leukemia L1210细胞、HCT-FET细胞
RPMI-1846细胞类似产品::Hs940.T细胞、NCI-HUT-125细胞、HUASMC细胞
MNNG细胞类似产品::I90细胞、Clone 929细胞、SW 839细胞
OCILY19细胞类似产品::hFOB 1.19细胞、NCIH2029细胞、Walker-256细胞
H1436细胞类似产品::Hep 2细胞、NRK clone 49F细胞、D6P2T细胞
BERH-2细胞类似产品::MM1-S细胞、HL-7702细胞、Roswell Park Memorial Institute 2650细胞
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NCIH1993细胞类似产品::3AA细胞、KPL4细胞、HUV-EC-C细胞
HK2细胞类似产品::OCI-Ly 10细胞、2E8细胞、H-4-II-E细胞
GM02131A细胞类似产品::B16/F10细胞、PLC-8024细胞、MDA MB 453细胞
S180细胞类似产品::SK-N-BE(2)细胞、HT clone H9细胞、NCI-H1975细胞
FL 62891细胞类似产品::HL60细胞、NCI-SNU-216细胞、KPL-1细胞
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SW-837细胞类似产品::P3HR-1细胞、WM451Lu细胞、TCam-2细胞
4T1细胞类似产品::BSC40细胞、T173细胞、SK_HEP1细胞
GC-2细胞类似产品::OVCAR 4细胞、C57/B6-L细胞、TSCC1细胞
CEM clone 7细胞类似产品::NKM-1细胞、BTI-TN5B1-4细胞、SW-620细胞
Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞类似产品::H-810细胞、KAT-5细胞、MB39细胞
MIA PaCa-2细胞类似产品::NCI H82细胞、SP2细胞、DoTc2-4510细胞
SPC-A1细胞类似产品::H548细胞、NCIH1793细胞、HMEC-1细胞
H1755细胞类似产品::Panc_04_03细胞、ME180细胞、MDAPCa-2b细胞
KYSE180细胞类似产品::RSC-96细胞、SU4细胞、JROECL21细胞
L929(NCTC)细胞类似产品::C-26细胞、JROECL 21细胞、MESSADX5细胞
HOP 62细胞类似产品::SNU886细胞、TCCSUP细胞、95D细胞
RK-13细胞类似产品::CALU 1细胞、NEC8细胞、CT 26细胞
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Centre Antoine Lacassagne-39细胞类似产品::Mv 1 Lu (NBL-7)细胞、High 5细胞、CD 18细胞
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BEL 7404细胞类似产品::Colo205细胞、JiyoyeP-2003细胞、HIMEC细胞
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NCI-H520细胞类似产品::Hs888T细胞、DC2.4细胞、HIEC-6细胞
SNU1细胞类似产品::K-1735细胞、SNU449细胞、MM-1S细胞
SNU-C1细胞类似产品::NGP细胞、GLAG-66细胞、Ly7细胞
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Ca Ski细胞类似产品::Tb 1 Lu (NBL-12)细胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14细胞、D-407细胞
TE-671细胞类似产品::LM8细胞、P3/NS1/Ag4-1细胞、ROS 17/28细胞
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DH 82细胞类似产品::A549/DDP细胞、MEG01细胞、IMR 32细胞
HUT125细胞类似产品::MLE 12细胞、P3X63Ag8653细胞、32D clone3细胞
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Mel-624细胞类似产品::CCK81细胞、OCI-Ly8细胞、KYSE-30细胞
HRA-19细胞类似产品::NCI-H441细胞、aTC1-6细胞、HL 60细胞
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4T1-A细胞类似产品::KU-812细胞、IMR 90细胞、OVCA5细胞
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RKN:人卵巢癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
HEYA8细胞类似产品::Hs675T细胞、SJRH30细胞、FET细胞
Caco-2BBe细胞类似产品::SW 954细胞、SCC-9细胞、NCI-H2141细胞
T/G HA VSMC细胞类似产品::10T1/2细胞、AsPC-1细胞、HARAB细胞
UACC893细胞类似产品::H-841细胞、HEK-293FT细胞、CCRF-CEM/S细胞
Strain KB细胞类似产品::6-T CEM细胞、RPMI 8226细胞、H-1792细胞
RPMI8226细胞类似产品::TERT-RPE1细胞、PLA801-95C细胞、LIPF178C细胞
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