"COV434:人卵巢颗粒肿瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
有一些细胞是数量多一点比较HAO生长,生长状态也比较HAO。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较HAO,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较HAO。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不HAO的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不HAO,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞建议只吹打,不消化)其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得HAO的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
A-2058细胞类似产品::U-2-OS细胞、MC-3T3细胞、PK15细胞
HET1A细胞类似产品::COR-L279细胞、Mv 1 Lu细胞、HAVSMC细胞
CNE1-LUC细胞类似产品::TE3A细胞、C643细胞、H-889细胞
H-747细胞类似产品::HPC-Y5细胞、H727细胞、VMRC-LCD细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:详见相关文献介绍
COV434:人卵巢颗粒肿瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
UCLA-SO-M14细胞类似产品::C22细胞、NCIH1563细胞、MLE 12细胞
SNU-398细胞类似产品::NOZ细胞、LICR-HN-6细胞、NF639细胞
H2196细胞类似产品::LA-N-6(OAN)细胞、MC/CAR细胞、IGR-OV1细胞
细胞培养实验基本操作:①进无菌室前要彻底洗手,按规定穿隔离衣。开始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻,安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意,金属器械不能在火焰中长时间烧灼,以防退火;烧过的器械要冷却后才能使用;已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼,因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质,吸管再用时会将其带到培养液中;胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长,以免烧焦产生有毒气体,危害培养细胞,同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶,开瓶后的培养液应保持斜位,避免直立,以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口,培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话,咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时,应专管专用,一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去,以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理HAO工作台面,用消毒水浸泡的纱布擦拭台面;防止细胞交叉污染:所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备,一旦怀疑发生交叉污染,可做细胞遗传学方面的鉴定,如发现原有的细胞遗传物发生改变,可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行;无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比,Zui大的YOU点是便宜,而且可以稀释50倍用,而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一种广谱灭菌剂菌,其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉,熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁生长
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
P3-X63.Ag8.653细胞类似产品::MonoMac 6细胞、SU-DHL-6细胞、BEL7405细胞
alpha TC1 clone 6细胞类似产品::Leukemic 1210细胞、COLO-320-HSR细胞、H19-7细胞
IBRS2细胞类似产品::DoTc2-4510细胞、NCI-H1092细胞、SW780细胞
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SNB19细胞类似产品::TOV21细胞、PFSK-1细胞、H748细胞
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HPC-Y5细胞类似产品::GM02131A细胞、H1694细胞、IEC 6细胞
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H-87细胞类似产品::Panc813细胞、Karpas299细胞、ZR75-30细胞
C2BBe1细胞类似产品::PC3-M细胞、GT39细胞、HPAF2细胞
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hSCC-25细胞类似产品::SF 295细胞、K1735细胞、HDF-a细胞
MFC细胞类似产品::MC3T3-L1细胞、C-Li-7细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞
MRC-V细胞类似产品::Human Pancreatic Duct Epithelial细胞、HSC 3细胞、HO8910细胞
MUTZ-1细胞类似产品::SKM1细胞、HEK293-EBNA细胞、HIT-T15细胞
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M2-10B4细胞类似产品::CMT 64细胞、IOSE-Van细胞、H522细胞
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H-1048细胞类似产品::3T3-442A细胞、C 6细胞、OC316细胞
HCC2157细胞类似产品::IMR-32细胞、Panc10.05细胞、OV433细胞
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K299细胞类似产品::CL34细胞、KYSE 70细胞、T47D:A细胞
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IB-RS-2细胞类似产品::CNE细胞、COS-1细胞、NCI-SNU-878细胞
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KYSE-410细胞类似产品::TE1细胞、SKMEL-1细胞、BTT739细胞
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H-735细胞类似产品::P30/Ohkubo细胞、LS 1034细胞、IPAM-WT细胞
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