"NCI-H209:人小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长：贴壁
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
SW 837细胞类似产品：：NCIH2122细胞、NCM-460细胞、Kasumi-1细胞
MAVER1细胞类似产品：：SNU-761细胞、HuNS1细胞、FF-WT-BJ细胞
RT-BM细胞类似产品：：DHL6细胞、H-740细胞、OKAC1细胞
2B4-L细胞类似产品：：SKNF1细胞、Hs 343.T细胞、GM04680细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
细胞背景资料：详见相关文献介绍
NCI-H209:人小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态：上皮细胞样
SW-1573细胞类似产品：：MDBK (NBL-1)细胞、IM 9细胞、NR 8383细胞
SkMel31细胞类似产品：：CWR22R-V1细胞、LS-174细胞、32D:cl3细胞
NCIH596细胞类似产品：：Tu-212细胞、NCIH2066细胞、CL1细胞
细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以１：２或１：２以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液３７℃下预热；③超净台台面应整洁，用７５%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面２０min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用７５%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入１ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖HAO瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化HAO的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖HAO瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO２的进入，将培养瓶放回CO２培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤７-９不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。
细胞传代方法：１：２-１：４传代；每周换液２次。
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
NCI-H209:人小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性：悬浮生长，有少数细胞疏松贴壁
贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。
UPCI:SCC90细胞类似产品：：Jurkat (clone E6-1)细胞、NCIH1155细胞、GM00637B细胞
D-341Med细胞类似产品：：MT2细胞、hTERT-HPNE细胞、RPMI #8226细胞
BMU-S1细胞类似产品：：Caco 2细胞、NCI-H1781细胞、SW 982细胞
OVCA5细胞类似产品：：PANC-10-05细胞、ML2细胞、MDA-MB-134-VI细胞
MFE280细胞类似产品：：EBC1细胞、MG-63细胞、BaF3细胞
CAL78细胞类似产品：：MFE-296细胞、Hs 737.T细胞、OEC19细胞
MCF-7ADR细胞类似产品：：Walker-Ca.256细胞、KASUMI1细胞、EJ 138细胞
HMO6细胞类似产品：：NG 108-15细胞、CNE2Z细胞、H-378细胞
RIN-m5F细胞类似产品：：NCIN87细胞、CCC-HHM-2细胞、639V细胞
EBC1细胞类似产品：：Panc 04.03细胞、NK 10a细胞、KNS-62细胞
SKMel-5细胞类似产品：：WC00097细胞、Hepatoma-22细胞、HL-1细胞
PAI细胞类似产品：：UPCISCC090细胞、MS751细胞、H1404细胞
HIT clone T15细胞类似产品：：NL20细胞、SVEC4-10细胞、NW-38细胞
3396细胞类似产品：：MDA MB 361细胞、Panc 05.04细胞、PC-3M-2B4细胞
TEC细胞类似产品：：BNL.CL2细胞、SK Mel 2细胞、LM3细胞
Bovine Turbinate细胞类似产品：：MARC-145细胞、TCC-PAN2细胞、RPMI-1846细胞
Bovine Turbinate细胞类似产品：：MARC-145细胞、TCC-PAN2细胞、RPMI-1846细胞
H-920细胞类似产品：：JVM3细胞、SNU475细胞、NCIH2052细胞
H2085细胞类似产品：：Epstein-Barr-1细胞、MC3T3, E1 subgroup-4 clone细胞、H1618细胞
CL 1-5细胞类似产品：：PANC-1细胞、H-1563细胞、IBMF-7细胞
SW780细胞类似产品：：TOV-21G细胞、EB3 [Human Burkitt lymphoma]细胞、Vero E6细胞
SK MEL-28细胞类似产品：：Mv 1 Lu细胞、SK-ChA1细胞、RGCs细胞
PC 12细胞类似产品：：RPMI-2650细胞、RPMI 6666细胞、SKN-SH细胞
Embryonic Bovine Tracheal cells细胞类似产品：：NCM460细胞、HNE2细胞、DMS 153细胞
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PG-4 S+L-细胞类似产品：：PLMVEC细胞、SW-780细胞、HSC-3细胞
KOSC-2细胞类似产品：：OAW42细胞、Mel-MeWo细胞、T-ALL-1细胞
NCI-441细胞类似产品：：SGC-996细胞、HCC-1569细胞、A 253细胞
Bac1 2F5细胞类似产品：：X63Ag8.653细胞、PanC1细胞、Hu-P-T4细胞
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HO-8910PM细胞类似产品：：3T6细胞、TYKnu细胞、T98G细胞
HCC-366细胞类似产品：：NCIH2591细胞、A 549细胞、LC-1细胞
Bac1 2F5细胞类似产品：：X63Ag8.653细胞、PanC1细胞、Hu-P-T4细胞
NCIH2171细胞类似产品：：CAL-148细胞、NCI-H2073细胞、LICR-LON-HN6细胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞类似产品：：L 540细胞、RMC细胞、P3-X63-Ag8-653细胞
R 1610细胞类似产品：：E0771细胞、PA1细胞、MLE12细胞
HNE2细胞类似产品：：SKN-AS细胞、Panc-05.04细胞、HPAEC细胞
HCC1588细胞类似产品：：H-211细胞、MDA-kb2细胞、H-3255细胞
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Soleus clone 8细胞类似产品：：Rat Glomerular Endothelial细胞、HT 1080细胞、OCI-LY-10细胞
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HGC27细胞类似产品：：SK BR 03细胞、MDA-134细胞、Hep G2细胞
KY180细胞类似产品：：SW1353细胞、SW 1088细胞、RKO-E6细胞
MDA1386细胞类似产品：：BT-549细胞、CEM/C1细胞、MN-60细胞
MS1细胞类似产品：：H1522细胞、MS-751细胞、YES-2细胞
BE(2)M17细胞类似产品：：Mhh-Call 2细胞、MPP-89细胞、Normal Rat, August 3, 1983细胞
PLC PRF 5细胞类似产品：：RLE-6TN细胞、U-2932细胞、DMS-53细胞
JIMT-1细胞类似产品：：TFK1细胞、H-1568细胞、BJA-B细胞
HTori-3细胞类似产品：：LM6细胞、Hs 746T细胞、MUG-Chor1细胞
C4-2 B细胞类似产品：：AR41P细胞、EB-3细胞、Panc-813细胞
QBC(939)细胞类似产品：：HSC（Human Schwann）细胞、ARPE-19细胞、MuM-2C细胞
SCC25细胞类似产品：：Hs-940细胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞、P3-Jiyoye细胞
KM12 SM细胞类似产品：：Madin Darby Bovine Kidney细胞、SCH细胞、GAK细胞
293EBNA细胞类似产品：：GM-3573细胞、A375-MEL细胞、Hs-281-T细胞
OVCAR.3细胞类似产品：：Vero C1008细胞、SKNEP1细胞、Madin Darby Canine Kidney细胞
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NCI-H295细胞类似产品：：NCIH2141细胞、HUC-1细胞、Keio University-19-19细胞
CAL-148细胞类似产品：：253J-Bladder-V细胞、T-47-D细胞、COLO680N细胞
Pfeiffer细胞类似产品：：L-Wnt-3A细胞、Melan-a细胞、HT clone H9细胞
H4-II-E-C3细胞类似产品：：Mel-624细胞、PL-45细胞、NCI-SNU-C2A细胞
BMU-S1细胞类似产品：：Caco 2细胞、NCI-H524细胞、NCIH841细胞
LN-382细胞类似产品：：W256细胞、SVGp12细胞、U-266细胞
HPMEC细胞类似产品：：Hela-mock细胞、GEO细胞、FAK+/+细胞
HCGC细胞类似产品：：BC3H-1细胞、PG-BE1细胞、OCUM-1细胞
NCIH747细胞类似产品：：SK Mel 1细胞、RFL-6细胞、U266BL细胞
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HeLa S 3细胞类似产品：：YD-38细胞、C2BBe 1细胞、L-363细胞
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Panc_08_13细胞类似产品：：CCD-112CoN细胞、Jurkat 77细胞、PCI-4M细胞
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ARO81细胞类似产品：：SN12C细胞、Y3-Ag1,2,3细胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21细胞
G361mel细胞类似产品：：VP 267细胞、HCC-202细胞、HPB/ALL细胞
EFO 27细胞类似产品：：TU 686细胞、Kit-225细胞、JB6 [Mouse]细胞
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J774A.1细胞类似产品：：32D:cl3细胞、UCLA-SO-14细胞、U-138-MG细胞
DMS 53细胞类似产品：：CCRF-CEM C7细胞、VB细胞、Eca 109细胞
HCC2218细胞类似产品：：Hs 819.T细胞、rHSC-99细胞、HCC-78细胞
Murine Lung Epithelial-12细胞类似产品：：OCI-LY-10细胞、JEG3细胞、HBVP细胞
NCI-H358细胞类似产品：：OCI Ly3细胞、3T3F442A细胞、WPMY1细胞
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Panc-02细胞类似产品：：UM-UC3细胞、LC-2 ad细胞、MARC-145细胞
PC 61-5-3细胞类似产品：：GM637细胞、NIH-3T3细胞、BNL.CL2细胞
LM(TK-)细胞类似产品：：HCC0015细胞、373 MG细胞、B/C3T3细胞
CL1-5细胞类似产品：：HuH-1细胞、HEp-2细胞、SW 626细胞
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CAL-33细胞类似产品：：COLO 678细胞、WM451细胞、hTERT-HPNE细胞
HHL-5细胞类似产品：：PL 5细胞、NCI-H1963细胞、LAD2细胞
KM12-SM细胞类似产品：：143B TK-细胞、Potorous tridactylus Kidney 2细胞、HLFa细胞
B-104细胞类似产品：：COLO-320DM细胞、SaOS细胞、RMS 13细胞
PANC0327细胞类似产品：：3T3 L1细胞、EU-2细胞、Granta-519细胞
SW837细胞类似产品：：MRC 5细胞、293AD细胞、EBC-1细胞
PLB985细胞类似产品：：Pro-5WgaRI3C细胞、P30-OHKUBO细胞、Panc-05.04细胞
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JM1细胞类似产品：：MG-HU-3细胞、MOLT 4细胞、S3-HeLa细胞
GH3细胞类似产品：：UPCI-SCC090细胞、HCT15细胞、293T细胞
NCI-H209:人小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
LNCaP-ATCC细胞类似产品：：MLA 144细胞、Japanese Tissue Culture-28细胞、P3HRI细胞
BRL 3A细胞类似产品：：PFSK细胞、UO.31细胞、HCC1954BL细胞
Transformed Human Liver Epithelial-2细胞类似产品：：OKT3细胞、MOLM-13细胞、RAW264细胞
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7860细胞类似产品：：HPAF II细胞、IMR90细胞、RS411细胞
GM0637细胞类似产品：：SUM149细胞、TOV112D细胞、Leukemic 1210细胞
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