"NCI-H2342:人非小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
细胞组成了组织,组织组成了器官,器官的组织就形成了一个个体,所有的组织和器官都是由细胞分化增殖形成的,通过汲取营养物质,Zui后形成个体。把人体的单个小细胞比喻成一个地球,人体组织呢就是一个太阳系,器官就是银河系,这样生动形象的比喻,可以让我们很容易了解到细胞与组织、组织与器官之间的关系。人的身体就像一个庞大的机器工厂,每时每秒都在进行着能量的传输与转化,它也像个巨大的产业链,一旦某个环节出了问题,同样伴随着的是人的身体也会出现不同程度的功能障碍,这也就是为什么人到某一定阶段以后身体的某些功能会逐渐衰退的原因。人的基本生命活动是通过细胞实现的,细胞的活动或功能异常,人体就容易生病。人之所以会得病就是人体内的细胞除了问题,一旦细胞有问题——组织就有问题——器官就有问题——系统就有问题——人就会得病。人体细胞每天都在分裂增殖,但是增长到一定阶段后就开始停止、病变或凋亡,如果不及时修复或增加,人体就会出现不同程度的疾病症状,小到病毒感冒,大到疑难杂症无一不都是因为人体内的细胞出了问题。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
IEC-6细胞类似产品::AdHek细胞、OCI-LY-7细胞、Hs 839.T细胞
Panc813细胞类似产品::Vero-E6细胞、HPB-ALL细胞、SuDHL 2细胞
3T3 L1细胞类似产品::NL20SV细胞、IEC6细胞、NALM 6细胞
HEK 293-H细胞类似产品::Hs870T细胞、KYSE510细胞、PLA801-95C细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:详见相关文献介绍
NCI-H2342:人非小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
Giant Cell Tumor细胞类似产品::L- cell细胞、NCI-H69细胞、E.L.4细胞
NOK细胞类似产品::Biologics Standards-Cercopithecus-1细胞、RPMI 1846细胞、DoHH2细胞
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培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制HAO的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋HAO冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做HAO标记;6)冻存:在殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10/ml数量。
细胞传代方法:1:2-1:6传代
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
NCI-H2342:人非小细胞肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁生长
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
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