"COR-L23:人肺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
有一些细胞是数量多一点比较HAO生长,生长状态也比较HAO。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较HAO,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较HAO。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不HAO的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不HAO,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞建议只吹打,不消化)其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得HAO的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
NCTC1469细胞类似产品::SkChA1细胞、RL952细胞、Madison 109细胞
SK-N-BE(2)细胞类似产品::H2023细胞、NEC8细胞、CALU 1细胞
HCT_116细胞类似产品::RT4-D6P2T细胞、Hs-675-T细胞、WB F344细胞
Hs-27细胞类似产品::SKNBE2细胞、NTERA2-D1细胞、SNU5细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:详见相关文献介绍
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细胞形态:上皮细胞样
HEK-293 c18细胞类似产品::brain-derived Endothelial cells.3细胞、Caki2细胞、GES-1细胞
NS20-Y细胞类似产品::F442-A细胞、HeLa229细胞、FM-88细胞
TK+/- (clone 3.7.2C)细胞类似产品::NCI-H2106细胞、130 T细胞、PLC-8024细胞
细胞传代注意事项:①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次ZuiHAO只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材;②每天观察细胞形态,掌握HAO细胞是否健康的标准:健康细胞的形态饱满,折光性HAO,生长致密时即可传代;③如发现细胞有污染迹象,应立即采取措施,一般应弃置污染的细胞,如果必须挽救,可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗,随后培养基中加入较大量的抗生素,并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持:细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的点,要做HAO建系的维持必须记录HAO细胞档案,换液传代和做HAO细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
KLN-205细胞类似产品::RCS细胞、H1437细胞、Centre Antoine Lacassagne-51细胞
CAL-27细胞类似产品::CAL-51细胞、My-La 2059细胞、NCI-747细胞
COLO206细胞类似产品::NALM-6-M1细胞、H-II-E-C3细胞、SU-DHL-16细胞
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BC-009细胞类似产品::MCF-7细胞、L-540细胞、Pt-K1细胞
TERT-RPE1细胞类似产品::HT-55细胞、GM00637I细胞、H4-II-E细胞
CHL-CL-11细胞类似产品::AE1201细胞、H-2228细胞、H125细胞
HMC-1细胞类似产品::ML-2细胞、NCI-H711细胞、H35 Reuber细胞
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OCI Ly1细胞类似产品::NCIH1437细胞、P3X63 Ag8.653细胞、SUDHL-2细胞
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P3J.HR1K细胞类似产品::H-510A细胞、B16BL6细胞、SUSM1细胞
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UMNSAH-DF1细胞类似产品::PC10细胞、BE(2)-M17细胞、CAL-12T细胞
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NCI-SNU-387细胞类似产品::Scott and White No. 13细胞、SK-BR-3细胞、Y1细胞
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G292细胞类似产品::Nb 2细胞、HS940细胞、Lymph Node Carcinoma of the prostate细胞
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HCT.116细胞类似产品::SO-Rb 50细胞、P3-X63-Ag8-653细胞、SHSY-5Y细胞
SNU-368细胞类似产品::AML12细胞、MS 751细胞、5-8F细胞
H1755细胞类似产品::Panc_04_03细胞、ME180细胞、MDAPCa-2b细胞
PCI:SG231细胞类似产品::NCTC-1469细胞、NCI747细胞、A10细胞
Ramos G6.C10细胞类似产品::SW-579细胞、T-ALL-1细胞、MDA-MB-175VII细胞
H716细胞类似产品::Colo16细胞、BRL 3A细胞、NCI-H1666细胞
Lu-65细胞类似产品::LO2细胞、NCIH661细胞、MDAMB175细胞
675T细胞类似产品::L-428细胞、VM-CUB-I细胞、FRTL 5细胞
NCI-H1568细胞类似产品::MC26细胞、H2030细胞、D-283 Med细胞
VP303细胞类似产品::Huh-7细胞、COLO 205细胞、MOLP-8细胞
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SUM-159-PT细胞类似产品::Sp2/0-Ag-14细胞、SW1271细胞、OVCAR4细胞
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NCIH2347细胞类似产品::SW-48细胞、MFE296细胞、KOPN8细胞
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Hs-27细胞类似产品::SKNBE2细胞、NTERA2-D1细胞、SNU5细胞
CTV-1细胞类似产品::P3/NS1/Ag4-1细胞、T-98G细胞、FLS细胞
McA-RH 8994细胞类似产品::A-375细胞、Baby Hamster Kidney-21细胞、SCL II细胞
Jurkat-FHCRC细胞类似产品::SNK-1细胞、SKLMS1细胞、H-508细胞
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BetaTC6细胞类似产品::NIH-OVCAR-3细胞、Hs895.T细胞、A-172细胞
KU 812F细胞类似产品::RPMI-8226S细胞、MRC-9细胞、HCC1171细胞
251 MG细胞类似产品::2BS细胞、NCIH1618细胞、Hep G2/C3A细胞
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BEL7404细胞类似产品::Detroit562细胞、LNCaP FGC细胞、SACC83细胞
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WEHI231细胞类似产品::LICR-HN6细胞、McA-RH 7777细胞、VMRC-RCZ细胞
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EoL-1细胞类似产品::MEG-01细胞、U-138-MG细胞、C-Li-7细胞
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Tu-212细胞类似产品::SNU-475细胞、NCI-H526细胞、V79-4细胞
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