"HCC202:人乳腺原发性导管癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长：贴壁
冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升GAO，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
RA 1细胞类似产品：：NCTC 1469细胞、A549 ATCC细胞、A-704细胞
H3255_DA细胞类似产品：：HCS2/8细胞、KPL-4细胞、OCI Ly3细胞
Capan1细胞类似产品：：SK-RC-20细胞、UWB1-289细胞、HRMC细胞
H-711细胞类似产品：：GM03570细胞、SNK1细胞、NIT-1细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
细胞背景资料：详见相关文献介绍
HCC202:人乳腺原发性导管癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态：上皮细胞样
OVCAR420细胞类似产品：：SiHa细胞、MDA MB 134VI细胞、SF767细胞
Y3细胞类似产品：：KLN205细胞、MuM-2B细胞、hRMECs细胞
Fetal Human Colon细胞类似产品：：GM04154细胞、PBMC细胞、SR786细胞
细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以１：２或１：２以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用７５% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液３７℃下预热；③超净台台面应整洁，用７５%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面２０min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用７５%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用２-３ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入１ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖HAO瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化HAO的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(７-１０ml/大瓶;３-５ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖HAO瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO２的进入，将培养瓶放回CO２培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤７-９不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
HCC202:人乳腺原发性导管癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性：贴壁生长
细胞传代后放入培养箱没有摇匀，或者放入时摇匀，但在细胞贴壁前，又移动了培养瓶，频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少，培养箱搁板表面不平整，这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象，大部分悬浮细胞在细胞密度很GAO的情况下，很可能会出现部分细胞抱团生长的现象，聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物，殃及周围的悬浮细胞，因此在培养悬浮细胞时需控制HAO细胞密度。如果出现了细胞团，可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团，也可以尝试一下方法：将细胞悬液收集到15ml离心管中，静置20min左右，小心取上层细胞上清培养（该方法只能去除部分较大的细胞团）。部分细胞本身存在一定的空泡（如HepG2，Ishikawa及一些耐药株等），这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡，则很可能是细胞状态不佳，可以通过调整血清浓度，控制消化，控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态；如果大部分细胞出现空泡，且单个细胞内空泡数目偏多，则可能细胞代次较GAO，细胞老化所致，需更换代次较早的细胞。
SN12C细胞类似产品：：H727细胞、D283-MED细胞、TJ905细胞
KP-2细胞类似产品：：NBL-S细胞、Colo-206F细胞、NCI-SNU-16细胞
H-716细胞类似产品：：CHL-IU细胞、KYSE140细胞、MGH-U3细胞
SBC-3细胞类似产品：：HCC4006细胞、NCIH716细胞、RM-1细胞
Detroit-562细胞类似产品：：T98细胞、H-35 Reuber细胞、QGP-1细胞
SNU668细胞类似产品：：Malme-3M细胞、H-446细胞、DU 4475细胞
KYSE-180细胞类似产品：：SUM190细胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]细胞、SKNBE(1)细胞
AD-293细胞类似产品：：C4-2 Bone metastatic细胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
细胞、Hs 888Lu细胞
WISH细胞类似产品：：OLN 93细胞、OVCA433细胞、SW-1116细胞
Colo16细胞类似产品：：HBMEC细胞、NCIH520细胞、Wills Eye Research Institute-Retinoblastoma-1细胞
MDCK细胞类似产品：：SK-BR-3细胞、PNEC30细胞、293/EBNA-1细胞
CT26.WT细胞类似产品：：NCIH1341细胞、SCC-25细胞、SN-12C细胞
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SK-MEL2细胞类似产品：：COLO824细胞、NCIH2286细胞、NBL-2细胞
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H322细胞类似产品：：P3-x63-Ag8 653细胞、Jiyoye细胞、293F细胞
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Hs 695T细胞类似产品：：P3/NS1/1-Ag4-1细胞、L-6细胞、Hos TE-85细胞
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G-292, clone A141B1细胞类似产品：：Hs 766.T细胞、SCC-1395细胞、MT4细胞
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LM TK negative细胞类似产品：：SW1088细胞、P3J细胞、HR1K细胞
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Reuber H35细胞类似产品：：TC-1[JHU-1]细胞、M-1 myeloid leukemia细胞、JM细胞
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H2106细胞类似产品：：RIMEC细胞、SW 403细胞、RCC-10RGB细胞
E.L.4细胞类似产品：：HEL9217细胞、T 98 G细胞、769P细胞
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BV-2细胞类似产品：：SKG IIIa细胞、INS1-E细胞、Mo7e细胞
C26细胞类似产品：：LS123细胞、TNC-1B12B4细胞、H9c2细胞
EU-2细胞类似产品：：TE-11细胞、Roswell Park Memorial Institute 7951细胞、NCI-H1404细胞
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MC 3T3-E1细胞类似产品：：SUNE1细胞、WBF344细胞、OE19细胞
Ramos (RA 1)细胞类似产品：：hESC细胞、K7M2 wt细胞、SW-1990细胞
JHH-7细胞类似产品：：GM03671细胞、Hs_578t细胞、HBE 135-E6E7细胞
G-292细胞类似产品：：U-CH1细胞、NCTC clone 1469细胞、H-647细胞
373 MG细胞类似产品：：OEC19细胞、MAVER1细胞、NCIH295R细胞
Hs683T细胞类似产品：：H1836细胞、PBL细胞、HTori3细胞
Hs683T细胞类似产品：：H1836细胞、PBL细胞、HTori3细胞
3T6 Swiss Albino细胞类似产品：：D283-MED细胞、NCI H23细胞、TI-73细胞
MDA231细胞类似产品：：JURKAT E-61细胞、Panc813细胞、KU-812细胞
MDA-468细胞类似产品：：HOC-1细胞、SO-Rb 50细胞、TCCPAN2细胞
NCI-H1975细胞类似产品：：LS-174细胞、H-889细胞、Jurkat-E6细胞
Ramos G6.C10细胞类似产品：：SW-579细胞、T-ALL-1细胞、MDA-MB-175VII细胞
hTERTHME1细胞类似产品：：SK-MEL-3细胞、PaCa2细胞、LY-R细胞
NCI-H2291细胞类似产品：：NCI-H1299细胞、OCI-LY-19细胞、H1435细胞
BTI-TN5B1-4细胞类似产品：：HASMC细胞、NTera 2/cl.D1细胞、Human Pancreatic Duct Epithelial细胞
GM03190细胞类似产品：：H-1092细胞、H69细胞、WiDr/S细胞
MDAPCa-2b细胞类似产品：：TOV-112D细胞、U-373MG细胞、HS-683细胞
HEC1B细胞类似产品：：PTK 2细胞、MIMVEC细胞、OE-21细胞
P3X63Ag8细胞类似产品：：HEK293A细胞、SCC-7细胞、SNU407细胞
COLO-699细胞类似产品：：LI7细胞、CMT-64细胞、BSC-1细胞
Centre Antoine Lacassagne-33细胞类似产品：：Det. 562细胞、MV522细胞、MAC1细胞
Tissue Culture-1细胞类似产品：：CA-46细胞、HCC1419细胞、WC00059细胞
BERH-2细胞类似产品：：MM1-S细胞、HL-7702细胞、Roswell Park Memorial Institute 2650细胞
HT3细胞类似产品：：FDC-P1细胞、HEK293EBNA细胞、OK细胞
Reh细胞类似产品：：CA922细胞、BT-474细胞、FHs74 Int细胞
LA-N-6细胞类似产品：：NCIH1781细胞、HLEC-SRA 01/04细胞、KLN 205细胞
Ramos-RA1细胞类似产品：：H-740细胞、H2052_MM细胞、870细胞
High-5细胞类似产品：：NCIH446细胞、CL-40细胞、HCC-1359细胞
H716细胞类似产品：：Colo16细胞、BRL 3A细胞、NCI-H1666细胞
HL-60 Clone 15细胞类似产品：：HHUA细胞、Roswell Park Memorial Institute 7666细胞、TE-6细胞
HCC202:人乳腺原发性导管癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
NRK52E细胞类似产品：：HCC-1500细胞、SK-MEL-2细胞、SKNEP1细胞
PAN 02细胞类似产品：：MFM-223细胞、MTEC1细胞、RAW-264.7细胞
C-643细胞类似产品：：AD293细胞、RA.1细胞、Granta519细胞
SN-12C细胞类似产品：：BRL 3A细胞、KM.12细胞、MCF7细胞
DLM8细胞类似产品：：TFH细胞、U-343细胞、CC-LP-1细胞
NCI-H498细胞类似产品：：RPE1-hTERT细胞、B16 subline B78细胞、22Rv-1细胞
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