"AU565:人乳腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长：贴壁
冻存和复苏的原则：慢冻快融》当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升GAO，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序：采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时，1~2℃/min；当温度达-25℃以下时，5~10℃/min；当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中。2.简易程序：将冷冻管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱布袋系以线绳，通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口，按每分钟温度下降1~2℃的速度，在40min内降至液氮表面过夜，次晨投人液氮中。3.传统程序：冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时（或隔夜）→液氮槽长期储存。细胞冻存方法：1.预先配制冻存液》（1）8%DMSO+细胞生长液（92%血清）2.取对数生长期细胞，经胰酶消化后，加入适量冻存液，用吸管吹打制成细胞悬液（1×10(6)~5×10(6)细胞/ml）。3.加入1ml细胞于冻存管中，密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法：1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后，立即放入37℃水浴中，轻轻摇动冷冻管，使其在1分钟内全部融化（不要超过3分钟）。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养，24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液，以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂，然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
B16 F10细胞类似产品：：A-704细胞、253JBV细胞、LNCaP subline C4-2细胞
OVMANA细胞类似产品：：SK-MEL-5细胞、LIXC-002细胞、PA317细胞
Ramos (RA)细胞类似产品：：BALB/3T3 clone A31细胞、H19-7细胞、Nb-2细胞
MADB 106细胞类似产品：：HCT FET细胞、KMS18细胞、KMS18细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
细胞背景资料：详见相关文献介绍
AU565:人乳腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态：上皮细胞样
MCF-12F细胞类似产品：：COLO-741细胞、FHL 124细胞、GRSL细胞
C26细胞类似产品：：LS123细胞、TNC-1B12B4细胞、H9c2细胞
SJRH30细胞类似产品：：HMEL细胞、SKOV3细胞、WEHI 164 TC细胞
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制HAO的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋HAO冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做HAO标记；６)冻存：在殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。
细胞传代方法：１：４—１：６传代；每３-５天换一次液。
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
AU565:人乳腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性：贴壁生长
贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。
MES-13细胞类似产品：：OSK-1细胞、CTLL(2)细胞、Calu3细胞
Panc 4.03细胞类似产品：：WEHI-3细胞、RTE细胞、NCI-H2452细胞
VSMC细胞类似产品：：Hce8693细胞、Calu3细胞、IGROV 1细胞
NSH细胞类似产品：：THC-8307细胞、LA-N-6细胞、HEK 293 EBNA细胞
MC9细胞类似产品：：CCD1112Sk细胞、KYSE-180细胞、0V-1063细胞
BJ1细胞类似产品：：MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、T241细胞、NCI-H510A细胞
NCIH508细胞类似产品：：UACC893细胞、SUM-52PE细胞、Evsa T细胞
TMD8细胞类似产品：：UMNSAH/DF-1细胞、H-1915细胞、SNU387细胞
NCI-H2286细胞类似产品：：SBC-5细胞、OVCAR.4细胞、NTera2/D1细胞
P3HR1-BL细胞类似产品：：Pan02细胞、MCA-205细胞、SK-ES-1细胞
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RL-65细胞类似产品：：U266S细胞、MNNG-HOS (Cl#5)细胞、MDA468细胞
MDBK细胞类似产品：：ECC10细胞、U-hth74细胞、HBZY1细胞
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MV-4:11细胞类似产品：：SUM-159-PT细胞、FHs74 Int细胞、H-1755细胞
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4175细胞类似产品：：OVCAR433细胞、MDCK II细胞、Human Melanoma Cell Bowes细胞
SCI1细胞类似产品：：HC11 Mammary Epithelium细胞、SK-NSH细胞、PIGI细胞
SW 1463细胞类似产品：：HCC202细胞、H-345细胞、GT38细胞
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NCI-H1184细胞类似产品：：H748细胞、L363细胞、Hs 870.T细胞
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Transformed Human Liver Epithelial-2细胞类似产品：：OKT3细胞、MOLM-13细胞、RAW264细胞
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LS411细胞类似产品：：H-2195细胞、NCI-H1668细胞、HCC1954细胞
HP615细胞类似产品：：Panc 8.13细胞、HPASMC细胞、PIG1细胞
Human Microglia Clone 3细胞类似产品：：HCC2108细胞、SCL2细胞、32Dcl3细胞
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BT474细胞类似产品：：H-727细胞、McA-RH8994细胞、MS-751细胞
RD细胞类似产品：：MDA MB231细胞、Hs281T细胞、KYSE0410细胞
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MIA-Pa-Ca-2细胞类似产品：：451-LU细胞、JEG-3细胞、Panc 08.13细胞
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NK92细胞类似产品：：HSC5细胞、PC-9/S1细胞、N1S1细胞
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C4-2细胞类似产品：：BC-024细胞、NCI-H1693细胞、MDAMB453细胞
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Co 115细胞类似产品：：COLO829细胞、JHH7细胞、NCIH1688细胞
N9细胞类似产品：：KB细胞、KU-812-F细胞、HT144mel细胞
P3-X63-Ag 8.653细胞类似产品：：NCIH1618细胞、NBLS细胞、TGW细胞
H-1781细胞类似产品：：RD-2细胞、CHG-5细胞、HSC4细胞
HBZY 1细胞类似产品：：HOS-MNNG细胞、HEK-293F细胞、REC1细胞
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NIH3T3-L1细胞类似产品：：KE 37细胞、Hs294细胞、HCC38细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞类似产品：：GM17219细胞、UACC-812细胞、D-324 Med细胞
WC00097细胞类似产品：：HCC0202细胞、MFE-296细胞、SEM细胞
MESSA/Dx5细胞类似产品：：KM12-SM细胞、HLEC-B3细胞、MEG01细胞
BNL.CL2细胞类似产品：：TFK-1细胞、MA-104细胞、NCIH244细胞
PCI:SG231细胞类似产品：：NCTC-1469细胞、NCI747细胞、A10细胞
AU-Mel细胞类似产品：：RKO-AS45-1细胞、B 95-8细胞、NCI-157细胞
HMC-1细胞类似产品：：ML-2细胞、NCI-H711细胞、H35 Reuber细胞
AU565:人乳腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
BCP-1细胞类似产品：：P3X63Ag8-6-5-3细胞、High-5细胞、H-810细胞
CHO-Lec1细胞类似产品：：H1963细胞、H4-II-EC3细胞、A2780CP细胞
H2030细胞类似产品：：Molm14细胞、CALU1细胞、L 1210细胞
JROECL19细胞类似产品：：LC1/Sq细胞、U118细胞、BT483细胞
Hs68细胞类似产品：：DMS 114细胞、OCI-LY-1细胞、M21细胞
NCI H716细胞类似产品：：OCI-Ly10细胞、NW-38细胞、SW 1990细胞
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