"5637:人膀胱癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长：贴壁
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
Bac 1.2F5细胞类似产品：：130-T细胞、K422细胞、NTERA-2cl.D1细胞
IB-RS-2细胞类似产品：：CNE细胞、RIMEC细胞、MDA-MB-435-S细胞
HEC-1-B细胞类似产品：：QBC939细胞、BrCL15细胞、KP-4细胞
DU145细胞类似产品：：RKN细胞、Mc Coy细胞、1.1B4细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
细胞背景资料：该细胞源于一位６８岁的患有膀胱癌的白人男性患者。据报道，该细胞能产生SCF、IL-１、IL-３、IL-６、G-CSF、GM-CSF等。
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细胞形态：上皮细胞样
Vx2细胞类似产品：：697细胞、NCIH2196细胞、Psi-2 DAP细胞
HCC 38细胞类似产品：：NCTC1469细胞、Ku812细胞、NCI-H2171细胞
HCCC9810细胞类似产品：：Hs 840.T细胞、MEL细胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-１９６℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】１)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前１d换液；２)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达５×１０／ml左右密度，离心，去上清；３)加入配制HAO的冻存液(培养液６.８ml，小牛血清２ml，DMSO １ml，５.６%NaHCO３ ０.１ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂１０％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；４)分装于无菌冻存管中，每管加１.５m悬液；５)旋HAO冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做HAO标记；６)冻存：在殊的仪器或简易的液氮容器中，按-１℃／min的速度，在３０～４０min时间内，下降到液氮表面，再停３０min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】１)从罐中取出冻存管；２)迅速放入３６℃～３７℃水浴，不时摇动，使其急速融化，３０～６０s内完成；３)冻存管用７０％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加１０ml培养液；４)低速离心(５００～１０００r／min) ５min，去上清后再用培养液洗一次；５)用培养液适当稀释后，装入培养瓶３７℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到１０／ml，在融后稀释２０倍时，仍能保持５×１０／ml数量。
细胞传代方法：１：４-１：８传代；每周换液２-３次。
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性：贴壁生长
贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。
MIMVEC细胞类似产品：：A2780细胞、CCLP1细胞、SW-780细胞
HT3细胞类似产品：：FDC-P1细胞、HEK293EBNA细胞、OK细胞
SK LU 1细胞类似产品：：EMT6细胞、LA-N-6(OAN)细胞、NCIH1836细胞
Hs 822.T细胞类似产品：：SK-N-MC细胞、CV 1细胞、GCT0404细胞
LS123细胞类似产品：：HS-68细胞、A-172 MG细胞、HSMC细胞
NCI-747细胞类似产品：：Ramos-2G6-4C10细胞、CHG5细胞、FRO81-2细胞
HCC1937细胞类似产品：：JROECL 21细胞、SHSY-5Y细胞、DMS53细胞
KYSE 450细胞类似产品：：Med 283细胞、WM239细胞、SNU354细胞
L5178Y TK+/-3.7.2c细胞类似产品：：293S细胞、A375mel细胞、H4IIEC3细胞
HBdSMC细胞类似产品：：SUM 52细胞、IHH细胞、H526细胞
Det 562细胞类似产品：：Loucy细胞、G402细胞、NCI-H1882细胞
BSC40细胞类似产品：：J 82细胞、HCC-1599细胞、751-NA细胞
H-2066细胞类似产品：：OVCA433_Bast细胞、RKO-AS-45-1细胞、Panc 02细胞
KLN205细胞类似产品：：HeLa S 3细胞、ES-2细胞、H9c2 (2-1)细胞
DV90细胞类似产品：：SRA01/04 (HLE)细胞、RenCa细胞、373 MG细胞
8226/S细胞类似产品：：LCD细胞、HCC-4006细胞、293细胞
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Hs832T细胞类似产品：：PA I细胞、SCL I细胞、mIMCD-3细胞
MB157细胞类似产品：：SNU-1细胞、18G3.cl 1细胞、SK-ChA-1细胞
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WERI细胞类似产品：：OV3121细胞、AHH1细胞、HAC-84细胞
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H-647细胞类似产品：：Kit225/K6细胞、P3X63 AG 8.653细胞、NRK49F细胞
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HPDE6c7细胞类似产品：：B16F1细胞、BCPAP细胞、RCC 786-O细胞
ISHI细胞类似产品：：SF17细胞、MC-26细胞、NCI-SNU-387细胞
H-2228细胞类似产品：：VB细胞、KE-39细胞、KP-N-RT-BM细胞
C-127细胞类似产品：：McARH7777细胞、TOV112细胞、BPH-1细胞
Human Corneal Endothelial Cells-12细胞类似产品：：SGC-7901/DDP细胞、BAEC细胞、UPCI-SCC-154细胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4细胞类似产品：：MDA-MB361细胞、SW-837细胞、Cloudman M3细胞
HMEL细胞类似产品：：Strain V细胞、HEK 293A细胞、H1184细胞
NCI-BL2141细胞类似产品：：UO31细胞、H3255_DA细胞、HO8910/PM细胞
MSTO-211细胞类似产品：：HSC2细胞、TFK1细胞、SK.MEL.2细胞
HS 683T细胞类似产品：：NCI-H522细胞、U266细胞、3T3-Swiss细胞
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H1092细胞类似产品：：MM134细胞、S91细胞、MHCC 97细胞
HEK-AD 293细胞类似产品：：H184A1细胞、NPC-TW 01细胞、NS-20Y细胞
SK LU 1细胞类似产品：：EMT6细胞、C2A细胞、Reuber-H-35 hepatoma细胞
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NCI-SNU-668细胞类似产品：：B16-BL6细胞、PATU-S细胞、L2细胞
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KB细胞类似产品：：T-ALL1细胞、H-2171细胞、SUM-159PT细胞
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NCI-H1876细胞类似产品：：H-647细胞、RBL细胞、RKO细胞
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MHCC 97细胞类似产品：：LL2细胞、EL-4细胞、MDA-kb2细胞
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SK-Col-1细胞类似产品：：H-1838细胞、NIE-115细胞、TYK-nu细胞
H-1522细胞类似产品：：KNS-42细胞、CAL-78细胞、Hs 766.T细胞
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P-2003细胞类似产品：：SCC 15细胞、TYK-nu细胞、HSAS4细胞
Adeno 293细胞类似产品：：COLO-824细胞、Hep-G2/C3A细胞、HCAEC细胞
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SKOV-3细胞类似产品：：MOLT 3细胞、MADB-106细胞、G-292细胞
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5637:人膀胱癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
MCF 10A细胞类似产品：：OCI-Ly01细胞、HBdSMC细胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2细胞
AZ-521细胞类似产品：：MADISON LUNG TA-109细胞、MOLT.4细胞、T98-G细胞
GM05887A细胞类似产品：：MDCK Type II细胞、H2196细胞、CORL51细胞
HNE2细胞类似产品：：SKN-AS细胞、Panc-05.04细胞、HPAEC细胞
SK-ML2细胞类似产品：：COR L279细胞、Sp2/0-Ag14细胞、J 111细胞
LS180细胞类似产品：：SW982细胞、MDA-MB453细胞、Hs 294T细胞
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