"C6:大鼠神经胶质瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
贴壁细胞冻存注意事项:细胞冻存液需提前配制,不可直接将DMSO加入细胞悬液中;不同细胞消化时间有差异,以实际镜检结果为准,大部分细胞回缩变圆并有少量细胞脱落即可中止消化,消化时间不宜过长;应选择汇合度80%-90%左右,细胞处于对数生长期时进行冻存操作,确保细胞冻存时状态Zui佳,冻存密度可根据细胞性进行调整;冻存细胞保存温度应低于-130℃,不可在-80℃长期保存。贴壁细胞冻存操作步骤:从培养箱中取出准备冻存的细胞;显微镜下观察细胞状态并拍照记录;酒精消毒培养瓶后放入安全柜中;吸去多余的培养基,加人2~3ml(PBS缓冲液)润洗一次;加入1ml胰酶,放入37℃消化;消化1min左右,在显微镜下观察细胞消化情况;消化完全后,加3ml完全培养基终止;将细胞悬液移入15ml离心管中离心,1000rpm/min(约200g)离心3-5min;吸去多余的液体,向细胞沉淀中加入适量的冻存液,轻轻吸打混匀;按比例分装至冻存管中;贴HAO标签后放入梯度冻存盒中;将冻存盒放入-80℃,降温过夜后,移入液氮中保存。贴壁细胞冻存实验准备事项:将15mL离心管、冻存管、PBS缓冲液、移液管、电动移液器等物品提前放入生物安全柜中,紫外照射30min消毒灭菌;细胞完全培养基、0.25%胰酶-0.02%EDTA、细胞冻存液等从4℃冰箱中取出后,复温至室温,备用;程序降温盒复温至室温备用。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
CTLL(2)细胞类似产品::KU-19-19细胞、SLMT-1细胞、MC9细胞
HN 4细胞类似产品::NTERA2细胞、EFM-192A细胞、NCI-H1915细胞
Caco2-BBE细胞类似产品::Hs729细胞、OCI-AML5细胞、Embryonic Bovine Tracheal cells细胞
MDA-453细胞类似产品::JCA1细胞、CHP-100细胞、Caco-2/BBe 1细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:胶质细胞株C6是由Benda等用N-nitrosomethylurea诱导的大鼠胶质瘤克隆,并经过一系列的体外培养和动物传代交替后建成的。 当细胞从低密度生长到满瓶时,S-100产量增加10倍。
C6:大鼠神经胶质瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
SK N SH细胞类似产品::MDCC MSB1细胞、Hopkins-92细胞、H-1341细胞
Roswell Park Memorial Institute 8226细胞类似产品::Clone Y1细胞、H-2087细胞、SRA 01/04细胞
SK-MEL-3细胞类似产品::HBZY-1细胞、GM07404D细胞、Strain L-929细胞
培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制HAO的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋HAO冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做HAO标记;6)冻存:在殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10/ml数量。
细胞传代方法:1:2传代
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
C6:大鼠神经胶质瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:贴壁生长
传代24h-48h处于对数期的细胞,在冻存前24h换液;按照常规方法消化,离心,收集细胞沉淀;用血清重悬细胞沉淀,用血球计数板或者细胞计数仪进行细胞计数;配制细胞冻存液,将冻存液加到细胞液中,吹打混匀,控制细胞密度为2×10(6)-5×10(6)/ml;将细胞悬液按照1ml/支分装至已标记HAO的冻存管中,旋紧管盖;将冻存管放入程序冻存盒中,冻存盒立即移至-80°C冰箱中,过夜后将冻存细胞移至液氮中长期保存。冻存管内细胞数目一般不低于2x10(6)cells/ml/vial,融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml/vial为宜。细胞冻存和复苏遵循“慢冻快溶”的原则。取出冷冻管后,须立即放入37°C水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化,并注意水面不可超过冷冻管盖沿,否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管之爆裂。细胞冻存时细胞状态不佳,会严重影响复苏时细胞的活率。一般选择处于对数生长期的细胞进行冻存,冻存前一天细胞ZuiHAO进行换液;消化过度也会严重影响细胞冻存后复苏的活率;冻存细胞时为按照温度梯度进行操作,会严重影响细胞活率。
SNU-C2B细胞类似产品::MDA-MB-435细胞、H-82细胞、HuLEC-5a细胞
DMS-53细胞类似产品::HPDEC细胞、Hs 695.T细胞、HL-7702细胞
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T98细胞类似产品::SUPB-15细胞、CF PAC-1细胞、MV-4-11细胞
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C6:大鼠神经胶质瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
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Madison 109细胞类似产品::NCI-BL2141细胞、SK RC 52细胞、H510细胞
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Rat-2细胞类似产品::KMS18细胞、Kit225-K6细胞、526细胞
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HS-68细胞类似产品::HCC-1438细胞、CCD-112 CoN细胞、ChaGo-K-1细胞
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Walker-Ca.256细胞类似产品::Tu 177细胞、WSU-DLCL(2)细胞、KNS42细胞
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NS1-Ag 4/1细胞类似产品::Meat Animal Research Center-145细胞、AMO-1细胞、ESC细胞
C6:大鼠神经胶质瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
Fetal Human Lens-124细胞类似产品::bEnd.3[BEND3]细胞、A375-S2细胞、A-431细胞
D407细胞类似产品::NIH:OVCAR-3细胞、IB-RS-2细胞、Panc5.04细胞
7404细胞类似产品::4-1st细胞、Hs 706.T细胞、Hs 821.T细胞
MDAMB134细胞类似产品::HIT.T15细胞、Panc-10.05细胞、Nittby-Salford 1细胞
MUGCHOR1细胞类似产品::no.11细胞、HCCC-9810细胞、WIL2S细胞
7404细胞类似产品::4-1st细胞、Hs 706.T细胞、Hs 821.T细胞
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