"AN3-CA:人子宫内膜腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长：贴壁
可以这样说，对于需要消化传代的细胞，每一次的消化都是对这个细胞存活与否，状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题，自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的，可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了，状态越来越差劲了。对于这个问题，可以非常肯定地说，你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以，越长越差。在消化的过程中，你加入胰酶后，所有细胞都在被胰酶消化着，但是我们忽视了一个问题就是，细胞的生长状态是不一样的，每一个细胞的贴壁情况也是不一样的，有的贴壁牢固，有的贴壁没有那么牢固的，所以，让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的，他们受到了差别待遇当然会有脾气的，大家争取做到因材施教，比如试试下面的“四步消化法”。（以难消化细胞为例），具体操作：1)首先不加胰酶，倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍（目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉）。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍，这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍，两次所得悬液混合传入新瓶。（你可以将这些传入新瓶培养，以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了）3)吸干净瓶内剩余液体，加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍，吸掉弃之，再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察，待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶，加入新培养基开始吹打，吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养，以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶，如果你们那比较富裕的话，继续镜下观察，待剩余细胞间隙明显，细胞独立开来的时候，吸掉胰酶，加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养（根据实际情况把握）。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
NCIH2228细胞类似产品：：KCL-22细胞、FHL-124细胞、ZYM-SVEC01细胞
MIA-Pa-Ca-2细胞类似产品：：451-LU细胞、JEG-3细胞、Panc 08.13细胞
HCC1359细胞类似产品：：SU-DHL2细胞、MC3T3-E1 Subclone 24细胞、LL/2 (LLC1)细胞
JM细胞类似产品：：NCI-H929细胞、Pro-5WgaRI3C细胞、GM03190A细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞：T２５培养瓶(一瓶)或冻存细胞：１ml冻存管(两支)
细胞背景资料：AN３CA细胞建系于１９６４年。它衍生于子宫内膜癌患者淋巴结转移组织，具有癌细胞的基本特性，能在体外长期传代培养，接种实验动物产生明显肿瘤。但细胞的生物学特性及超微结构尚未深入研究，仅发现该细胞系促黑激素合成为阴性。细胞常用于人子宫内膜癌细胞生物学及其相关特性研究。
AN3-CA:人子宫内膜腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态：上皮细胞样
UM2细胞类似产品：：Pt K1 (NBL-3)细胞、MDA-MB-435S细胞、Molm 14细胞
SNU-354细胞类似产品：：SK RC 20细胞、Ketr-3细胞、NCTC-1469细胞
HCC1599细胞类似产品：：ARO 81-1细胞、ChaGo-K-1细胞、HCC95细胞
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升GAO到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
细胞传代方法：１：２传代
细胞来源说明：来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
AN3-CA:人子宫内膜腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性：贴壁生长
贴壁细胞传代：去掉原T25培养瓶里面的培养基，T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次；弃PBS，再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞，显微镜下观察，待细胞变圆，细胞间隙明显，部分细胞刚开始脱离瓶壁，加4 ml左右完全培养液混匀终止消化，将细胞小心吹打下来，1000rpm/min室温离心5min；弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:2-1:3，1:3-1:6，1:6-1:8），每T25瓶补足培养基至5-6ml，37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代：一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min 室温离心5min。弃上清，细胞沉淀用完全培养液重悬，按要求分瓶（视细胞密度而定1:4-1:8），每T25瓶加完全培养液至4-5ml，37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长，此时细胞生长状态良HAO，当补液时，需避免反复吹打。
HM细胞类似产品：：HCC1143细胞、P388D1细胞、SK-Mel 1细胞
SCCVII/St细胞类似产品：：Panc-327细胞、LNCaP-ATCC细胞、LS 180细胞
NCIH208细胞类似产品：：L6565细胞、Murine Long bone Osteocyte-Y4细胞、M-G63细胞
SKNSH细胞类似产品：：OVCAR 432细胞、Pfeiffer细胞、AR41P细胞
H146细胞类似产品：：NCTC 3960细胞、CWR22-Rv1细胞、HFLS-OA细胞
P31/FUJ细胞类似产品：：SNUC2A细胞、NFS-60细胞、MIA-Pa-Ca-2细胞
MHH-CALL-2细胞类似产品：：HIEC细胞、KYSE 270细胞、OCI/AML-3细胞
MDCK2细胞类似产品：：MDA-MB-134细胞、Jurkat77细胞、SPC-A-1细胞
ACC-3细胞类似产品：：4T1-LUC细胞、HRA 19细胞、SUM-149细胞
HEL-299细胞类似产品：：EoL-1细胞、TE3A细胞、NCIH810细胞
2E8细胞类似产品：：HCT 8细胞、U-87细胞、SKUT1细胞
HIMEC细胞类似产品：：NCI-157细胞、2V6.11细胞、SCL-2细胞
Roswell Park Memorial Institute 2650细胞类似产品：：LPC-H12细胞、NCI-H1417细胞、Duke University 145细胞
TEV-1细胞类似产品：：4175细胞、Pan02细胞、Normal fibroblast-10细胞
RAMOS2G64C10细胞类似产品：：McCoy细胞、MADB106细胞、U-87MG细胞
PC-9S1细胞类似产品：：TK 10细胞、MDA-MB436细胞、RMG-I细胞
PC-9S1细胞类似产品：：TK 10细胞、MDA-MB436细胞、RMG-I细胞
SK Mel28细胞类似产品：：USMC细胞、KU 812F细胞、RWPE-2细胞
DKMG细胞类似产品：：NR8383.1细胞、ECC 12细胞、Hs821T细胞
CEMx721.174.T2细胞类似产品：：Tn5B1-4细胞、TE-13细胞、2BS细胞
SW982细胞类似产品：：MD Anderson-Metastatic Breast-436细胞、HEI-193细胞、HS 1.Tes细胞
Line 207细胞类似产品：：HCC1806细胞、BC-022细胞、U251-MG细胞
BE(2)M17细胞类似产品：：Mhh-Call 2细胞、MPP-89细胞、Normal Rat, August 3, 1983细胞
WIL2 S细胞类似产品：：OSKM-1细胞、SW-1222细胞、HCC-2218细胞
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95D细胞类似产品：：OCUM-1细胞、C4-2细胞、NTHY-ORI3.1细胞
CCRF-CEM C7细胞类似产品：：1301细胞、Colon 26细胞、Alexander细胞
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TB-1 Lu细胞类似产品：：Jurkat细胞、b.End3细胞、D341MD细胞
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Huh-7细胞类似产品：：MCM细胞、EAhy926细胞、MDAMB435S细胞
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GM03570E细胞类似产品：：SU-DHL-2细胞、WM-239A细胞、Lu-165细胞
TE 354.T细胞类似产品：：NFHIOSE-80细胞、EB-1细胞、RPMI 7951细胞
AN3-CA:人子宫内膜腺癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
Human Embryo Kidney-2细胞类似产品：：U-251-MG细胞、JROECL 21细胞、C-26细胞
AML-12细胞类似产品：：HEL 299细胞、H1672细胞、CEF细胞
DLD 1细胞类似产品：：PC-3细胞、MCF-12A细胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2细胞
Panc-03.27细胞类似产品：：COLO 320F细胞、NKT细胞、B16-BL6细胞
HPAF II细胞类似产品：：MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞、Caki-1细胞、NUGC2细胞
UT7细胞类似产品：：MEG01细胞、TE-671细胞、T/GHA-VSMC细胞
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