"SNU-5:人胃癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:贴壁
绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可。吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足够消化细胞。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37℃消化。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育。不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化HAO了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常HAO,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个性。如果和标准形态不一致,那可能是自己没消化HAO导致的,但如果消化方法正确,仍然成片分布,甚至完全吹打成单细胞悬液,贴壁后仍然成片分布,这是细胞的性,是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布,你的细胞之后会对你越来越不HAO。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
Ramos(RA1)细胞类似产品::IPEC-J2细胞、SK-Mel 2细胞、COLO320/DM细胞
PGLH7细胞类似产品::CHL-11细胞、293 EBNA细胞、OACP4C细胞
H22-H8D8细胞类似产品::CHL1细胞、NCI-H69C细胞、HS-294-T细胞
Jurkat E6-1细胞类似产品::CLL-CII细胞、Colon-26细胞、HB 611细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:该细胞来源于一名低分化胃癌患者的转移性腹水,1987年分离建立。该细胞表达CEA和TAG-72。
SNU-5:人胃癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:上皮细胞样
NCI-H196细胞类似产品::NIE-115细胞、Centre Antoine Lacassagne-12T细胞、L615细胞
Embryonic Bovine Tracheal cells细胞类似产品::NCM460细胞、HNE2细胞、DMS 153细胞
Mono Mac 6细胞类似产品::CCD-841CoN细胞、Walker-Ca.256细胞、Hs 578Bst细胞
细胞培养方面注意的几点:无菌意识要强:实验进行前,超净台以紫外灯照射30分钟灭菌,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域,一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约45°角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升GAO到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
细胞传代方法:2-3天补液一次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
SNU-5:人胃癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:多细胞聚集、悬浮生长
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
H1650细胞类似产品::H2171细胞、PLB-985细胞、HCCLM6细胞
SK-RC 42细胞类似产品::SW 13细胞、Hs 870.T细胞、USMC细胞
22Rv1细胞类似产品::MDA.MB.231细胞、GM04680细胞、UT-7细胞
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MDA-MB157细胞类似产品::hUC-MSC细胞、CZ-1细胞、SUM-102细胞
KYSE0520细胞类似产品::Caki-1细胞、RM-1细胞、S16细胞
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MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII细胞类似产品::LM TK negative细胞、MDAMB175细胞、OVCAR 5细胞
LLCPK1细胞类似产品::SK-NMC细胞、B-CPAP细胞、HBEpiC细胞
SW480E细胞类似产品::MDA-361细胞、NCI-H650细胞、SU-DH-L5细胞
DK-MG细胞类似产品::CAL-12T细胞、NRCC细胞、OCI-LY-18细胞
SNU-5:人胃癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
H-1693细胞类似产品::3 LL细胞、Hs 274细胞、IHH4细胞
HPAEC细胞类似产品::Vero细胞、FBHE细胞、SK-SH-SY5Y细胞
JJN-3细胞类似产品::HOC1细胞、CW2细胞、UMUC14细胞
HTR8/SVneo细胞类似产品::COS7细胞、P19细胞、Hela-Ap-1细胞
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PC2细胞类似产品::Nb2细胞、HOP92细胞、HLEB3细胞
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SK-MEL24细胞类似产品::IGROV 1细胞、EFM192B细胞、COLO-1细胞
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Hs294细胞类似产品::HIT细胞、SKml2细胞、PC 61细胞
22Rv1细胞类似产品::MDA.MB.231细胞、MES-SA-Dx5细胞、Farage Original Line细胞
SBC5细胞类似产品::NCI-SNU-C2A细胞、KLE细胞、RD细胞
SK-N-BE2C细胞类似产品::MDA-MB468细胞、TE 32.T细胞、OVCAR-432细胞
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751-NA细胞类似产品::EFO27细胞、HeLa.S3细胞、138MG细胞
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Mono Mac 1细胞类似产品::BHP-10细胞、KE 37细胞、Leukemia 1210细胞
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U-87-MG细胞类似产品::MFHL-2细胞、A375细胞、T98 G细胞
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J82 COT细胞类似产品::TE-1细胞、Namalva细胞、NCIH196细胞
HSC-4细胞类似产品::RPMC细胞、COLO 679细胞、SK-N-BE细胞
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JF305细胞类似产品::HT115细胞、HT22细胞、HTh74细胞
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H3255细胞类似产品::RCC-4细胞、KP4细胞、KU-812F细胞
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NTera 2细胞类似产品::N1E115细胞、NK62a细胞、NCI-H295细胞
SNU-5:人胃癌复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
CCRF/CEM细胞类似产品::M-1细胞、PL 5细胞、DHBE细胞
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JB-6 Cl 30细胞类似产品::U-343 MG细胞、EC-109细胞、V79细胞
MFE 280细胞类似产品::C57 Mouse Tumor 64细胞、SK ES 01细胞、HCC-1833细胞
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